常用pH缓冲液Word格式文档下载.docx
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6.4
26.5
73.5
6.6
37.5
62.5
6.8
49.0
51.0
7.0
61.0
39.0
7.2
72.0
28.0
7.4
81.0
19.0
7.6
87.0
13.0
Na2HPO4·
2H2O分子量=175.050.15Mol/L溶液含26.7g/L。
12H2O分子量=358.220.15Mol/L溶液含53.7g/L。
NaH2PO4·
H2O分子量=138.000.15Mol/L溶液含20.7g/L。
2H2O分子量=156.030.15Mol/L溶液含23.4g/L。
(四)0.2Mol/LPB缓冲液
附表30.2mol/LPB缓冲液配制法
0.2Mol/LNa2HPO4(ml)
0.2Mol/LNaH2PO4(ml)
5.8
8.0
92.0
6.0
12.3
87.7
6.2
18.5
81.5
7.8
91.5
8.5
94.7
5.3
0.2Mol/LNa2HPO4·
2H2O溶液35.61g/L
12H2O溶液含71.64g/L
0.2Mol/LNaH2PO4·
H2O溶液含27.60g/L
2H2O溶液含31.21g/L
欲配0.1Mol/LPB缓冲液则在0.2Mol/LPB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。
欲配制PBS液时,则在溶液中加0.85%的NaCl溶液即可。
(五)无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)
(0.15Mol/LPH7.2)
NaCl8.0g
KCl0.2g
Na2HPO41.15g
(如为Na2HPO4·
12H2O,则为2.89g)
KH2PO40.2g
将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中,完全溶解后,115℃高压灭菌10min~15min,存在4℃冰箱中备用。
此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
(六)硼酸盐缓冲液(Boratesalinebuffer)
1.硼酸(H3BO3)
0.2Mol/L硼酸:
硼酸12.37g加水至1000ml。
2.硼砂(Na2B4O7)
0.05Mol/L硼砂:
硼砂19.07g加水至1000ml。
附表4不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法
0.05Mol/L硼砂(ml)
0.2Mol/L硼酸(ml)
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
1.5
8.4
4.5
5.5
2.0
8.7
4.0
3.0
(七)巴比妥缓冲液
1.pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥钠47.6g
蒸馏水3000ml
1.17NHCl55.0ml
(1.17NHCl=193ml浓HCl加1807ml蒸馏水)
⑴将4.76g巴比妥钠溶于3000ml蒸馏水。
⑵加1.17NHCl55ml。
⑶用HCl调节pH到8.2,并加蒸馏水至4265ml。
2.pH8.40.06Mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥1.84g
巴比妥钠10.30g
加蒸馏水至1000.00ml
3.pH8.60.06Mol/L巴比妥缓冲液
巴比妥1.66g
巴比妥钠12.76g
加蒸馏水1000.00ml
(八)0.2Mol/L醋酸盐缓冲液见表附表5
附表50.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法
0.2Mol/L
Tris(ml)
0.1Mol/L
HCl(ml)
23℃
37℃
9.10
8.95
25
5
8.06
7.90
27.5
8.92
8.76
7.5
7.96
7.82
30.0
8.75
8.60
10.5
7.87
7.73
32.5
8.62
8.48
12.5
7.77
7.63
35.0
8.50
8.37
15.5
7.66
7.52
8.40
8.27
17.5
7.54
7.40
40.0
8.32
8.18
20.0
7.36
7.22
42.5
(九)三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液(Tris—HCl缓冲液)
不同pH,0.05Mol/L
25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加хml0.1NHCl,加水稀释至100ml(见下表)
附表6Tris—HCl缓冲液配制法
0.1NHCl
(ml)
8.96
8.05
8.78
8.74
10.0
15.0
8.23
8.10
22.5
7.20
7.05
45.0
8.14
8.00
25.0
三羟甲基氨基甲烷(Tris)
分子量=121.14
0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷:
Tris24.23g,加水至1000ml。
0.1NHCl:
取HCl8.6ml,加水至1000ml。
(十)0.5Mol/LpH9.5碳酸盐缓冲液
NaHCO33.70g
Na2CO30.60g
溶于600.00ml蒸馏水中即得。
不用时塞紧瓶塞,以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。
最好小量配制。
(十一)甘油磷酸缓冲液
1.配制pH8.0磷酸缓冲液
0.1Mol/LNa2HPO494.50ml
0.1NNaH2PO45.50ml
混合即可
2.9份甘油与1份pH8.0磷酸缓冲液混合,即为甘油磷酸缓冲液。
用途:
用于免疫荧光试验。
(十二)Hank’s液
1.贮存液
NaCl80.00g
KCl4.00g
12H2O1.52g
KH2PO40.60g
葡萄糖4.00g
0.4%酚红液50.00ml
双馏水加至100.00ml
115℃高压灭菌15min,冰冻保存。
2.工作液
贮存液1份
双馏水9份
115℃高压灭菌15min。
临用时用灭菌的5.6%NaHCO3液调pH值至7.2左右(溶液呈橙红色)。
(十三)萘(钠)氏试剂(Nessler’sreagent)
配方1:
氯化汞6.0g
碘化钾12.4g
20%NaOH30ml
加蒸馏水至100ml
配方2:
碘化汞11.5g
碘化钾8g
蒸馏水50ml
(完全溶解后)过滤,加20%NaOH50ml。
检测溶液中氨离子。
(十四)阿氏(Alsever’s)液
葡萄糖2.05g
柠檬酸钠0.80g
氯化钠0.42g
蒸馏水100ml
溶解后,以10%柠檬酸调节pH至6.1,过滤,分装,10磅10min灭菌,4℃保存。
(十五)青、链霉素混合液(简称S.P.液或双抗液)
青霉素(40万U)5支
链霉素(200万μg)1支
分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中,混合后分装小瓶,置-10℃~-20℃冰箱保存备用(1万单位μg/ml)。
临用时,按1%的量加入营养液或其他溶液中,最后浓度是青霉素100U/ml,链霉素100ug/ml。
(十六)洗液(清洁液)
重铬酸钾150g
蒸馏水300ml
浓硫酸3000ml
将重铬酸钾加入蒸馏水中,使之自然溶解或水浴溶解,亦可在大坩埚中加热溶解,然后慢慢加入浓硫酸,边加边搅拌,见发热过剧则稍停,冷却后再继续加。
此为强洗液。
盛清洁液的容器要坚固,上加厚玻璃盖,操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套,以保安全。
洗液一旦变绿,表示铬酸已经还原,失去了氧化能力,不宜再用。
如将这样洗液加热,再加适量重铬酸钾,又可重新使用。
浓硫酸50%
蒸馏水50%
重铬酸钾5%
此为中等强度洗液。
配方3:
重铬酸钾100g
蒸馏水1000ml
加热溶解,冷却后缓慢加入
工业硫酸100ml
此液为弱洗液,为棕红色。
使用此液时,必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净,经自来水冲洗,沥干然后才能浸入,否则该洗液很快失效。
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- 常用 pH 缓冲液