0621PCR培训班考试题最终版A文档格式.docx

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和。

其中前者监测和控制的是实验室测定的，而后者则通过对不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的。

4.在进行荧光定量PCR检测之前，样本手工预处理应该在中进行，并且使用吸头进行样本操作。

5.PCR的基本反应过程包括、、。

6.荧光定量PCR使用的Taqman探针两端标记有7.根据遗传中心法则，遗传信息的流动方向为基团和基团。

。

8.普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区：

、、、。

9.提纯的核酸样品可根据的比值计算出其纯度。

波长的光吸收值算出其含量，通过计算10.临床基因扩增实验室检测用的试剂应当经11.cfDNA的中文名称是，ctDNA的中文名称是批准。

1

A卷二．是非题（在你认为正确的句子后面打√，错误的后面打×

，每题1分，共15分）1.DNA双链中，碱基A-T之间以三个氢键相连，G-C以两个氢键相连。

（）2.PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。

（）3.使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR试剂盒，该酶可以降解含有UTP的扩增产物。

（）4.核酸的复制是由3＇→5＇方向进行的。

（）5.自制室内质控品时，应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。

（）6.定量PCR与定性PCR测定原理的最主要的区别点在于前者的测定点在PCR的指数扩增期，而后者多为扩增平台期。

（）7.处理PCR标本时，在没有生物安全柜的情况下，可用超净台操作。

（）8.临床检验中的系统误差通常表现为质控物测定结果的SD增大。

（）9.扩增管没有盖好会造成PCR反应液热蒸发，直接影响结果，但不会成为一个污染源。

（）10.核酸是极性化合物，可溶于水，不溶于乙醇等有机溶剂。

（）11.核酸的解链温度（Tm）与G+C含量有关，G+C含量愈大，Tm愈高。

（）12.无法参加室间质量评价计划时，可以用室内质控替代。

（）13.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。

（）14.PCR可应用于遗传病、肿瘤、病原体检测及判断亲缘关系等方面。

（）15.质量管理体系的要素包括质量方针、质量目标和质量指标。

（）三．单选题（请将所选答案填写在题后的括号中，每题1分，共25分）1.PCR技术扩增DNA,需要的条件是（）①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A.①②③④B.②③④⑤C.①③④⑤D.①②③⑥2.多重PCR需要的引物对为（）A.一对引物B.半对引物C.两对引物D.多对引物3.TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（）A.35-40℃B.50-55℃C.70-75℃D.80-85℃2

A卷4.以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（）A.各区合并B.注意风向C.因地制宜D.方便工作5.下列哪一种病毒的遗传物质为RNA（）A.乙肝病毒B.人乳头瘤病毒C.巨细胞病毒D.人类免疫缺陷病毒6．在做结核分枝杆菌-荧光PCR检测之前，应采用下面哪个浓度的氢氧化钠对痰液标本进行液化。

（）A.2%B.3%C.4%D.5%7.普通PCR基因扩增仪最关键的部分是（）A.热盖B.温度控制系统C.软件系统D.荧光检测系统8.PCR技术的发明人是：

（）A.WatsonJ.D.;

B.CrickF.H.C.;

C.KaryMullis;

D.RosalindFranklin.9.生物安全水平的级别共分为几个等级（A．1个B．2个C．3个D．4个10.以下在PCR反应中，对扩增产物的特异性起决定因素为（A.模板B.引物C.dNTPD.镁离子11.有关荧光定量PCR方法，下述哪一条是错误的？

（A.在扩增的指数期定量；

B.在扩增的终点测定定量；

C.可采用Taqman探针；

D.采用内标和外标方法均可。

12.在选择开展临床检验项目时，应首先考虑：

（A.临床有效性和分析有效性；

B.检测精密度和检测准确度；

C.临床有效性和检测精密度；

D.分析有效性和检测准确度。

13以下哪项有利于DNA的保存：

（A.加入EDTA螯合钙离子，去除核酸酶的活性；

B.加入少量DNase；

C.溶于pH3.0溶液；

D.加入少量RNase。

14.荧光定量PCR检测过程中，基线漂移的可能原因有：

（A.蒸发；

B.探针水解C.相邻荧光通道干扰D.以上都是15.将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态，目的是：

（A.防止有生物传染危险的样本逸出；

B.防止扩增产物从该区逸出；

C.防止该区灰尘的逸出；

D.为了生物安全的目的3）））））））

A卷16.真核生物染色体DNA主要以下列哪种形式存在（）A.环状单链分子B.线性单链分子C.环状双链分子D.线性双链分子17.TaqMan探针采用的是（）A．荧光标记的探针B．生物素标记的探针C．同位素标记的探针D．SYBRGreen荧光染料18.最大量程为200ul的微量移液器，显示读数为020，实际的吸液容量值为：

（）A．0.2ulB．2ulC．20ulD．200ul19.有关核小体的错误叙述是：

（）A．核小体是染色体的基本单位B．DNA和组蛋白共同构成核小体C．DNA和组蛋白H1构成核小体连接区D．RNA和组蛋白共同构成核小体20.基因突变的实质是：

（）A．染色体上的DNA序列变化了B．染色体上的DNA变成了RNAC．染色体上的DNA变成了蛋白质D．染色体上的DNA高级结构发生了局部改变21.如果一个PCR反应体系中加入模板200个，经过30个循环后扩增产物的数量将达到（）A.200×

30×

2B.2002×

30C.200×

230D.200×

30222.双链DNA中的碱基对有：

（）A．A-UB．G-TC．C-AD．T-A23.下列四个DNA片段中含有回文结构的是（）A.GAAGAAB.TGGAAAC.GAAAAGD.GAATTC24.核酸分子中储存遗传信息的关键部分是：

A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA25.核酸检测探针的标志性特征是：

（）（）A．一小段已知序列的单链核酸；

B.一小段未知序列的单链核酸；

C.一小段已知序列的双链核酸；

D.有同位素或非同位素标记物。

4

A卷四.简答题（每题5分，共25分）1.简述什么情况下应该对分子诊断检验程序进行性能验证？

（5分）2.临床PCR实验室质量管理体系文件应包含哪些内容？

（5分）5

A卷3.可用哪些方法对分子诊断实验室的员工进行技术工作能力评估（至少列出5种）。

（5分）4.感染性疾病的定量、定性检测，人基因组的基因型检测，对上述三类PCR检测的室内质控品的浓度水平和型别如何要求？

（5分）5.简述生物安全的概念、实验室生物安全水平的概念。

（5分）6

A卷五.论述题（共20分）1.某一开展乙肝DNA定性检测的临床PCR实验室，参加盲样测试（包括三个阳性样本，两个阴性样本），该实验室做出的结果为5份样本全部阳性，工作人员将盲样全部阳性的结果确认后立即发出。

第二天发现当天的室内质控结果也是全部阳性，并且当天的阳性率明显增高。

请回答：

（1）这样做是否正确？

（4分）

（2）应该如何处理？

（8分）（3）分析该情况产生的所有可能原因？

（8分）7