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(1)“无菌操作”是微生物培养的基本要求,该实验的培养基在配制时,应先对不含尿素的基本培养基进行____________法灭菌,待冷却至60℃时,再加入经__________的尿素溶液。
(2)土壤中能分解尿素的细菌通过____________分解尿素,该种菌对生态平衡所起的作用是____________。
(3)该同学____________(填“能”或“不能”)分离出该种菌。
理由是______________。
(二)下图中的①②③代表通过植物组织培养技术培育新植株的三条途径,请回答:
(1)外植体a、b、c来自同种植株,植株A、B、C中的细胞,全能性表达程度____________(填“相同”或“可能不同”)。
(2)途径②和③需要用到____________和____________(填培养基的物理性质)两种培养基,将含B1的试管放在摇床上,通过____________培养可以分散成单细胞。
(3)外植体c脱去细胞壁过程中需要加入适宜浓度的____________(A.甘露醇 B.盐酸 C.蒸馏水 D.氯化钠)以保持一定的渗透压。
原生质体培养成功标志着____________技术又向前迈进了一步。
(4)通过大量培养特定细胞系,可以实现能产生重要____________(如某些中药)的细胞大量克隆和产物的工业化生产。
2.回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)随着社会的发展,石油产品的使用越来越多,石油烃污染也越来越严重。
为了筛选出分解石油烃能力强的微生物,人们不断地进行研究。
下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程,请回答有关问题:
(1)获取土壤样品的取样地点最好选在____________。
为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源,其原因是____________。
(2)根据⑤平板上生长的菌落,对④进行接种采用的方法是____________,若发现在⑤中无法区分菌落,可以将图中③取出的菌液____________。
(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是____________。
采用____________方法对其进行灭菌。
划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。
造成划线无菌落可能的操作失误是____________(写出一点即可)。
(二)请回答利用基因工程生产人胰岛素的相关问题:
(1)先从人体____________细胞中获取控制人胰岛素合成的mRNA,然后在____________酶催化下合成人胰岛素基因。
(2)构建重组DNA分子通常需要____________的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体,然后用DNA连接酶使两者连接在一起。
(3)大肠杆菌的____________会阻碍重组DNA进入细胞,通常使用氯化钙处理大肠杆菌。
(4)为检测目的基因是否在大肠杆菌中高效稳定表达,最简单有效的方法是____________(A.检测大肠杆菌中有无人胰岛素基因 B.检测培养基中葡萄糖浓度 C.检测大肠杆菌中人胰岛素mRNA含量 D.检测培养基中胰岛素含量)。
人胰岛素基因能在大肠杆菌中表达是因为人和大肠杆菌共用____________。
(5)胰岛素除了用于治疗糖尿病之外,还可以用来提高动物____________形成率。
3.回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)下图为实验室制作葡萄酒的基本流程,请回答:
(1)上述流程中,A为______________过程,B为____________过程。
用KMnO4溶液浸泡葡萄的目的是____________。
发酵瓶中葡萄汁的装量通常控制在容器的2/3以下,主要原因是____________。
(2)在配制酵母斜面培养基时,培养基中应加入一定量的凝固剂,如_________。
培养基配好后,置于高压蒸汽锅内,在压强为0.1MPa(1kg/cm2)、温度为________℃(A.120 B.140 C.121 D.180)的条件下,维持一段时间,可达到灭菌的目的。
(二)我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗,其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质(S蛋白),对应的基因为S基因。
请回答:
(1)在构建重组DNA分子时,要用限制性核酸内切酶处理____________,并用____________酶使两者结合。
将重组DNA分子导入哺乳动物细胞,经筛选得到工程细胞。
(2)在细胞培养过程中,工程细胞在生长过程中有____________现象,需要定期使用__________________酶处理,以便于分瓶培养。
(3)为提高工程细胞培养的成功率,下列措施中不能采用的是( )
A.取单个细胞进行培养
B.加入胰岛素
C.二氧化碳培养箱
D.加入动物血清
(4)由于哺乳动物细胞培养较难,成本较高,近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”,进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。
在这种技术中,作为重组DNA分子受体细胞的一般是____________。
4.回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。
蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;
果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。
为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果如表所示。
请回答有关问题。
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
蒸馏水(mL)
2
1
缓冲液(mL)
0.5
果胶酶液(mL)
蜗牛酶液(mL)
纤维素酶液(mL)
5实验结果(绿色深浅程度)
-
++
+
(注:
“+”越多表示绿色越深,“-”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是__________________________,使原生质体从小叶片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:
蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有_______等多种酶。
该实验中________是空白对照组,其设置意义是__。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用____________(A.低渗溶液
B.高渗溶液 C.等渗溶液 D.自来水)洗涤。
(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是______________。
(二)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因羊的羊乳中获得(人染色体组成为44+XX/XY,羊染色体组成为40+XX/XY),流程如下:
(1)在上述基因工程中,获得htPA基因(序列已知)的方法最可能是________。
(2)图中①为体外受精,卵(母)细胞一般数量较多,是对供体母羊使用________激素处理后采集到并培养使之成熟的,而B是经筛选过的、染色体组成为_____且达到________状态的精子。
③过程应将早期胚胎植入代孕母羊的_______内。
(3)下列关于图示内容的叙述中,错误的是__________。
A.体细胞核移植不属于胚胎工程研究的内容
B.图中①过程与体内受精的实质是相同的
C.图中的转基因羊也属于“试管动物”
D.胚胎工程打破了物种间远缘杂交不亲和的障碍
5.回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)回答与微生物实验室培养有关的问题:
(1)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是________。
若培养基需调节pH,则应在灭菌之__________(填“前”或“后”)调节。
(2)为防止外来杂菌入侵,对__________等可采用干热灭菌法进行灭菌。
(3)下图为平板划线法接种后的示意图。
在划线接种的整个操作过程中,对接种环至少需进行__________次灼烧灭菌。
接种后盖上皿盖,将平板__________放入恒温箱中培养,这样放置的目的是__________。
(4)用稀释涂布平板法统计活菌数目时,每隔一个“时间间隔”统计一次菌落数目,最后选取__________作为结果,这样可以防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目。
(二)生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。
如图为转基因牛和抗虫棉的培育过程,请回答:
(1)在培育转入人的生长激素基因牛的过程中,①过程需要的工具酶是____和__________。
②过程中,应对代孕母牛进行__________处理,以便早期胚胎的着床。
若在②过程中培养到早期胚胎阶段采用____________技术,可培育出多头相同的转基因牛。
(2)在抗虫棉培育过程中,重组Ti质粒先导入细菌M,细菌M的名称是_______,③过程中的棉花细胞常采用愈伤组织细胞而不采用叶肉细胞,原因是愈伤组织细胞____________,④过程中,愈伤组织细胞可通过____________技术培养成单个胚性细胞,胚性细胞再分化形成的胚状体可发育成植株。
【加固训练】
回答下列
(一)、
(二)小题:
(一)某研究小组以紫葡萄为原料制作葡萄酒的基本流程和装置示意图如下。
(1)制作葡萄浆前,对葡萄进行清洗和用____________色的高锰酸钾溶液浸泡。
制作酵母悬液时,在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖,待酵母悬液中出现__
即可。
(2)装瓶后开始的一段时间,发酵瓶中溶解氧的含量变化是________。
发酵过程中,发酵瓶中酒精的含量变化是__。
(3)下列关于装置中有水弯管作用的叙述,错误的是____________。
A.隔绝气体
B.使发酵瓶内外的压强基本平衡
C.减少杂菌污染
D.有利于发酵瓶内形成缺氧环境
(4)欲利用葡萄酒制作果醋,发酵瓶中应加入的菌种是____________,该菌种在____________条件下能将乙醇氧化为醋酸。
(二)诺贝尔生理学或医学奖授予给研究细胞核重组编程的两位科学家。
所谓细胞核重组编程即将成年体细胞重新诱导回早期干细胞状态,用于形成各种类型的细胞。
通过对人体细胞的重新编程,科学家们创造了诊断和治疗疾病的新方法。
(1)胚胎干细胞可来自囊胚的__________,能被诱导分化为多种细胞、组织,说明它具有____________的特性。
(2)培养胚胎干细胞的关键是要有一种既能促进细胞分裂又可抑制_______的培养体系,一般在培养胚胎干细胞时可以采用____________作为饲养层来实现。
(3)如图为运用胚胎干细胞核移植技术进行高等动物克隆的模型图,则C→D一定包含____________技术。
(4)限制性核酸内切酶可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。
下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列和切割位点,切割出来的DNA粘性末端可以相互配对的是__________。
A.BamHⅠ和EcoRⅠ
B.BamHⅠ和HindⅢ
C.BamHⅠ和BglⅡ
D.EcoRⅠ和Hi
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