薄层扫描法测定车前草中熊果酸的含量_精品文档Word文档下载推荐.doc
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全草含熊果酸、车前贰、桃叶珊瑚贰、俘谷街醇等Cz7,其中熊果酸具有明显的安定、降温、抗菌、抗炎、降酶、抗癌等作用L}}。
因此测定车前草中熊果酸的含量可为评价药材内在质量提供依据,也可对制定含有车前草的中药制剂质量标准有一定意义。
本文采用薄层扫描法测定车前中熊果酸的含量。
1仪器与材料仪器:
CS-930双波长薄层扫描仪,岛津DR-2型处理机,定量毛细管(美国);
试剂:
硅胶G(青岛海洋化工产),其它试剂均为分析纯;
样品材料:
样品A,B,C均为市售品,由药材站提供,I)为自采,自然晒干。
经本所中药室鉴定为车前I'
lantagoasiaticaL。
对照品:
熊果酸由中国药品生物制品检定所提供,批号(742-9405)o
2方法与结果
2.1薄层色谱条件吸附剂为硅胶G;
展开剂为苯一醋酸乙酷c7,3);
显色剂:
lo/硫酸乙醇液,105C'
加热约5min,显色;
(见附图);
扫描方式:
双波长反射法锯齿扫描,1s=520nmaR=700nm;
灵敏度中,狭缝1.2X1.2mm,sx=3o
2.2标准溶液及样品溶液的制备标准溶液的制备:
精密称取熊果酸标准品5mg置10ml量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度,摇匀,即得。
样品溶液的制备:
精密称取车前草粗粉约1.0g,置索氏提取器中,加乙醚100ml,提取4h,提取液回收乙醚至干,残渣加无水乙醇一氯仿(3:
2)混合液溶解,定容于5ml容量瓶中,摇匀,即得。
2.3标准曲线的绘制吸取1.0,2.0,4.0,5.o,s.o,s.o,lo.oμg上述标准溶液,分别点样于同一硅胶G薄层板上,展开,晾干,显色,测定各斑点的面积积分值,以含量对面积积分值进行回归处理,得回归方
程Y=13264.24X一964.2812,r=0.9995。
熊果酸在0.5~5ug范围内呈良好的线性关系。
附图车前草TLC图谱
1.样品,2.熊果酸对照品
2.4精密度实验同一块薄层板上点五个等量对照品溶液,按上述方法测定,峰面积基本一致,RSD==1.%。
(见表1)
表1精密度实验结果
2.5重现性实验
对同一批样品按上述方法制备6份供试液,进行测定,平均为2.30mg/g,RSD=3.7%(n=6)(见表2)。
表2重现性实验结果
2.6稳定性实验薄层板自显色后,每隔30min测1次熊果酸斑点积分值,其面积积分值在}t,内基本保持稳定,RSD=3.5%。
2.7回收率实验精密称取同一批车前草粗粉,分别精密加人熊果酸对照品,各份均依样品测定项下方法操作,测定,计算回收率,结果(见表3),平均回收率为97.8%,RSD=3.3%。
表3回收率实验
2.8样品测定精密吸取供试品溶液4μg,标准品
溶液3与6μg,交叉点于同一硅胶G薄层板,按上述
薄层色谱条件测定,结果(见表4),2.8样品测定精密吸取供试品溶液4μgμg,标准品溶液3与6μg,交叉点于同一硅胶G薄层板,按上述薄层色谱条件测定,结果(见表4)。
表4样品测定结果
3讨论
3.1实验中,采用了多种展开系统,如石油醚(60℃~90℃):
苯:
醋酸乙醋:
冰醋酸((20,40:
14,1);
苯一氯仿一甲醇((5:
25:
2);
环己烷一氯仿一醋酸乙醋(20:
5:
8),经反复比较研究,展开剂确定为苯-醋酸乙醋(7,3),斑点重现性好,且与其它成份斑点能很好分离,本文采用硫酸乙醇显色,也曾对磷钼酸显色进行考察,因在可见光下吸收干扰大而未采用。
3.2实验中对回流提取时间进行了考察,比较2,4,6h测定结果,表明4h已提取完全,经过重现性实验和回收率实验,证明此方法可靠、准确、简便,可用于评价车前草的内在质量。
参考文献
1.中国药典(一部).1995;
53
2,张贵君等:
常用中药鉴定大全,黑龙江科学技术出版社,哈尔滨市.1993;
151
3、季宇彬等:
中药有效成分药理与应用,黑龙江科学技术出版社,哈尔滨市.1995;
&
82
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