沙棘叶总黄酮对AA肉鸡钙代谢及肠钙结合蛋白表达的影响Word文件下载.doc
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关键词:
沙棘叶总黄酮;
钙代谢;
钙结合蛋白基因;
AA肉鸡
中图分类号:
文献标识码:
A文章编号:
EffectsofTotalFlavonoidsofSeabuckthornLeavesonCalciumMetabolism
andIntestinalCalbindin-D28KmRNAExpressioninArborAcresBroilers
Abstract:
(Objective)TostudyeffectsoftotalflavonoidsofSeabuckthornleavesoncalciummetabolismandcalbindin-D28KmRNAexpressioninintestineofArborAcresbroilers.(Method)atotalof2401-day-oldhealthmaleArborAcrebroilerswererandomlyusedfor4dietarytreatments.Eachtreatmentwasreplicatedfourtimeswithfifteenbroilerseach.Thefourdietarytreatmentswerebasaldiet,basaldiet+0.025%flavonoidsofseabuckthornleaves,basaldiet+0.05%flavonoidsofseabuckthornleavesandbasaldiet+0.1%flavonoidsofseabuckthornleaves.Theexperimentwasconductedfor7weeks.(Result)TheresultshowedthattherewerenodifferencesintheconcentrationofE2andcalciuminbloodserumsupplementedwithflavonoidsofseabuckthornleavesandbasaldiet(P=0.1737;
P=0.5009),WhereastheconcentrationofvitaminD3andCaBPinbloodserumwassignificantlyincreased(P=0.0121;
0.0001).Apparentdigestibilityofdietaryproteinwassignificantlyincreased(P=0.0014).RealtimeRT-PCRwasappliedtodetectCalbindin-D28KmRNAexpressioninintestine.Theresultshowedthattheexpressionlevelofcalbindin-D28Kgeneofthedietsupplementedwithflavonoidsofseabuckthornleaveswassignificantlyhigherthanthatofcontrolgroup(P<
0.0001).(Conclusion)Intotal,totalflavonoidsofseabuckthornleavescouldincreasetheconcentrationofvitaminD3inbloodserumsoastoincreasetheexpressionlevelofcalbindin-D28Kgeneinduodenum,whichleadedtotheconcentrationofCaBPincreased.Asaresult,calciumabsorptionofAAbroilersinintestinewasincreased.
Keywords:
totalflavonoidsofseabuckthornleaves;
calciummetabolism;
calbindin-D28KmRNA;
ArborAcre(AA)broilers
沙棘(HippophaerhamnoidesL)属于胡颓子科沙棘属植物,分布广泛,且含有丰富的生物活性物质,其最主要的活性成分沙棘黄酮存在于沙棘的所有部位,尤以沙棘叶中含量最为丰富。
大量研究表明大豆黄酮属于植物黄酮类物质大量研究表明植物黄酮类物质,具有弱的雌激素样活性,并能提高钙的吸收能力,预防骨质疏松,被称为“植物雌激素”[1-3],如大豆黄酮。
。
而沙棘黄酮也属于植物黄酮类物质,并与大豆黄酮同属于多酚类化合物,化学结构和生理功能极为相似,提示:
是否沙棘黄酮也应具有和大豆黄酮相似的弱的植物雌激素作用,并能在一定程度上提高钙的吸收能力呢。
?
据现有研究表明,大豆黄酮等植物雌激素对钙代谢的调控机制之一是其与雌激素受体相结合而发挥作用大豆黄酮等植物雌激素对钙代谢的调控机制是其与雌激素受体相结合而发挥作用[4、5],但植物雌激素对骨组织强大的影响一定还应存在其他的调控机制但植物雌激素对骨组织强大的影响想必还应存在其他的调控机制。
在家禽钙代谢的研究中还发现,钙结合蛋白(CaBP)对钙具有高度亲和力,在禽类肠道组织小肠上皮细胞内其含量与肠钙吸收的量呈正相关,故CaBP在禽类肠钙吸收代谢过程中起重要作用[6、7]。
目前,关于沙棘叶总黄酮对钙代谢的影响及其作用机制的研究还未见报道。
本试验旨在通过检测沙棘叶总黄酮对钙代谢相关指标的影响及肠道钙结合蛋白基因的表达,探讨沙棘叶总黄酮对钙代谢作用的另一潜在的机制,为沙棘成为功能性饲料添加剂提供一定的理论依据。
1材料与方法
1.1试验材料
沙棘叶总黄酮(总黄酮含量为50%以上)由东北农业大学动物营养研究所提供。
1.2试验动物及试验设计
选择健康的1日龄AA肉仔鸡240只。
按体重相近的原则,随机分成4组:
每组4个重复,每个重复15只。
饲养试验共进行7周。
按常规免疫程序免疫,其它同常规肉鸡饲养管理。
1.3基础日粮
基础日粮参照NRC肉鸡(1994)饲养标准,配制玉米-豆粕型基础饲粮。
饲料原料成分参照中国饲料营养成分(2001),其具体配方和营养水平见表1。
表1基础日粮组成及营养成分
Table1Compositionandnutrientlevelsofbasaldiets
日粮组成Compositions(%)
1~3周
(1~3week)
4~7周
(4~7week)
营养水平
Nutrientlevel
玉米Corn
57.50
62.30
代谢能ME(MJ/kg)
12.33
12.50
豆粕Soybeanmeal
34.50
30.00
粗蛋白CP(%)
21.75
19.72
豆油Soybeanoil
3.00
赖氨酸Lys(%)
1.18
1.04
鱼粉Fishmeal
1.00
蛋氨酸+胱氨酸Met+Cys(%)
0.91
0.86
蛋氨酸Methionine
0.20
钙Ca(%)页:
3
计算还是实测值?
1.07
0.96
磷酸氢钙
Calciumphosphate
1.65
1.70
总磷TotalP(%)
0.70
0.68
石粉Limestone
1.50
1.20
有效磷AvailableP(%)
0.46
0.45
食盐Salt
0.35
0.30
维生素预混料
VitaminPremix
0.03
微量元素预混料
ElementsPremix
胆碱Choline
0.10
合计Total
100
每kg饲粮中含:
维生素A1500IU;
维生素D3200IU;
维生素E10IU;
维生素K0.5mg;
维生素B120.01mg;
生物素0.15mg;
叶酸0.55mg;
尼克酸30mg;
泛酸10mg;
吡哆醇3.5mg;
核黄素3.6mg;
硫胺素1.8mg;
铜8mg;
碘0.35mg;
铁80mg;
锰60mg;
硒0.15mg;
锌40mg。
Providedperkgofdiet:
VA1500IU;
VD3200IU;
VE10IU;
VK0.5mg;
VB120.01mg;
Biotin0.15mg;
Folic0.55mg;
Niacin30mg;
Calciumpantothenate10mg;
pyridoxine3.5mg;
VB23.6mg;
VB11.8mg;
Cu8mg;
I0.35mg;
Fe80mg;
Mn60mg;
Se0.15mg;
Zn40mg
1.4测定项目及方法
1.4.1血清生化指标测定
肉鸡生长到49日龄,每组每个重复随机抽取3只,进行翅静脉采血,制备血清,检测指标:
血钙(Ca)采用全自动生化分析仪测定;
雌二醇(E2)采用放射免疫试剂盒测定(北京福瑞生物工程公司);
活性维生素D3(1,25-(OH)2D3)、钙结合蛋白(CaBP-D28k)采用酶联免疫法(ELISA)试剂盒测定(美国ADL公司)。
具体测定方法均按试剂盒说明进行。
1.4.2代谢试验指标测定
肉鸡生长到49日龄,预饲3天,采用全收粪法进行4天的代谢试验。
以重复为单位准确记录采食量、粪样重,同期采集各试验组饲料样品。
测定饲料与粪中粗蛋白和钙的含量,测定方法依据《饲料分析与质量检测》(杨胜,1998),并计算上述养分的表观消化率。
1.
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