尿液分析和临床显微镜检查的质量控制流程Word文档格式.doc
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l外观出现尿色变深,透明度变混或尿气味带有氨味;
l化学成分出现葡萄糖,胆红素、尿胆原、维生素C下降,亚硝酸盐升高,pH与蛋白质升高或下降;
l镜检出现RBC、WBC管型下降,结晶或细菌升高。
3.尿液标本的保存:
尿液标本如不能及时送检或分析,必须冷藏或防腐保存。
冷藏可抑制细菌的生长繁殖,维持尿液pH恒定,使尿中有形成分基本不变,但4℃条件下冷藏不得超过8h,有时冷藏会导致盐类析出产生沉淀,影响沉渣检查。
化学防腐①甲苯:
通常用于化学成分的保存;
②甲醛:
用于尿沉渣检验标本的保存。
4.尿液标本接收:
实验室应建立严格的标本接收制度,工作人员在接收标本时,必须检查:
•标本内容器是否符合要求
•标记内容与医生所填写化验单是否一致
留尿到接收标本时间是否过长
标本是否被污染
近期是否给服用对尿液分析有影响的药物和其它物质
•尿量不少于30ml:
特殊病例不能达到此要求时(如小儿、烧伤,肾衰无尿期等)应在报告单上注明收到尿量及检查方法。
尿液标本的接收要求:
凡留尿超过2h(未采取相应的保存措施),未注明留尿时间或尿量不够的标本应拒收。
检验科收到合格的标本后应签收,在送验单上注明留尿时间、送检时间。
须说明近期是否给服用对尿液分析有影响的药物和其它物质。
(二)使用仪器、器材、试剂的规范要求
原则:
Ø
选用国家有关部门批准上市的仪器和试剂;
检验用仪器和计量器具均需经校准后方能使用,且可溯源;
选用的试纸条、校准条尽可能与仪器配套;
有条件时,要对所选用的仪器和试剂进行评价。
1、收集标本的容器
收集和运送尿液的容器应由不与尿液成份发生反应的惰性材料制成,应具备以下条件:
v洁净、防漏、防渗,一次性使用
v容积应>
50ml
v园形开口的直径>
4cm
v具有较宽的底部
v尽可能使用具有安全、易于开启的密封装置。
2、显微镜
在尿分析实验室,应使用具有下列特点的高质量显微镜:
v双目镜筒
v内置光源
v机械载物台,使玻片易于平稳移动
v基本的物镜组(10X和40X)及目镜组
(10X/12.5X)
v如使用多台显微镜时,应用相同的物镜或目镜。
3、自动化设备
尿液分析使用的自动化设备主要有自动尿液分析仪、自动尿沉渣分析仪或尿沉渣工作站等,这些仪器必须经权威机构认可。
4、计算机处理系统
有条件的单位,可用带计算机成像系统的显微镜、标准化的沉渣检测系统和相关辅助软件来自动处理结果。
但检查方法和尿沉渣结果报告方法必须标准化。
5、干化学试纸条
所用的干化学试纸条必须优质稳定,要具备生产合格证并经主管部门评价。
试纸条一定要有失效期,必须在有效期内使用。
(三)试纸条的性能评价
1、对比试验
将新选用的试纸条与仪器配套的试纸条做对比试验,符合率达到要求才能使用。
将两系统的测定结果以表格形式汇总,完全一致的为对角线上的例数,判断符合的指标为对角线上下、左右各一档的范围,在此范围内的数据与总测定数之比为符合率。
例:
下表为30例样本两台尿液分析仪的检测结果的比对
尿
液
分
析
仪
2
尿液分析仪1
–
±
+
2+
3+
4+
合计
10
1
3
4
5
6
11
7
30
•本例的完全符合率为:
•本例的符合率为:
2、重复性
可选用+或++浓度的质控液连续测定10条试纸带,只允许有一条有差异才算合格。
3、稳定性
为保证尿试纸条的稳定性,要求必须在有效期内使用,存放也必须按说明书要求存放。
4、敏感性与特导性
尿试纸条中每个项目的试验敏感性与特导性是很重要的,在应用过程中应注意以下特点:
蛋白质膜块只对白蛋白敏感,对球蛋白不敏感,对本周氏蛋白不反应。
葡萄糖膜块只对葡萄糖产生反应,对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反应。
酮体膜块对乙酰乙酸最敏感,丙酮次之对β一羟丁酸不反应。
潜血膜块不仅对完整和破损RBC均有反应,而且对游离Hb也反应。
白细胞膜块仅对中性粒细胞有反应,而对淋巴细胞无反应。
胆红素及尿胆原膜块灵敏度比Harrison手工法低得多。
比重膜块只能反映尿中阳离子多少与比重计结果不一;
对婴儿等低比重尿则不敏感。
根据以上特点,必须区分试带结果的涵义与传统手工法的不同。
临床根据病情应用传统手工法进行确证。
二、分析中的质量控制
是指样本在分析过程中的质量管理。
(一)统一尿液分析检查方法,规范操作其内容包括:
项目名称、适用仪器、检测原理、样本要求、种类、保存、预处理、样本量、试剂及配套品、校准、质量控制,操作程序、参考值范围、方法特性等。
1.配备仪器标准操作手册(SOP)(随机附带的原文(复印件)及仪器检定,自检,校验等相关文件,记录,证书等)。
2.建立仪器操作卡(用于指导操作人员开、关机,主要操作步骤和维护)。
3.规范检查方法
3.1外观/物理分析
颜色
正常尿液应为黄色和琥珀色。
病理尿色应围绕红色、黄色、绿色、棕色、乳白色报告。
浊度(透明度)
正常混匀尿应透明。
其浊度可用透明、雾状、云雾状、浑浊报告。
气味
必要时应报告。
比重(SG)
建议用折射仪法作为参考方法。
(当尿液含X光线反差介质、葡萄糖、蛋白时可使结果增高,应予校正。
Pro1G/dl时SG增高0.003,Glu1G/dlSG增高0.004)。
3.2化学分析
湿化学分析至少应包括糖和蛋白两项。
尿糖可用葡萄糖氧化酶法,条件较差者也可用班氏法:
尿蛋白可用磺基水杨酸法或加热加酸法。
干化学分析是一种简单快速,对尿半定量的检测方法。
由于生产尿分析仪和使用的试剂带厂商繁多,各厂对量级标准不一致,造成医院间、医院内测定结果差异很大。
为此,在使用干化学法分析时应注意下列问题:
标本必须新鲜,要求在采样后2小时内完成。
使用仪器与试剂带应配套,若使用不同厂商生产的试剂带,必须经严格对照,确定无显著性差异时方可代用。
所用试剂带必须优质稳定,要具备“三证”要求:
试剂条贮放于原装容器内,短暂暴露于直射光和室内温度都会使试剂条产生错误的结果。
参照厂商规定,要避免、防潮、干燥,并在一定温度条件下妥善保存。
使用时一次只取出所需要的试剂带,并立即盖紧,多余的试剂带不可再放回容器中。
不要合并各容器内的试剂带。
不可触摸试剂带上的化学检测块。
干扰干化学法的理化、药物因素很多,常导致假阳性,假阴性结果出现,造成误诊及漏诊,因此,对干化学结果,要结合临床资料进行分析
尿十项试剂带常见产生假阳性、假阴性的原因
项目
假阳性
假阴性
酸碱度(PH)
与食物及放置时间有关
同左
比重(SG)
随尿量及尿液含固体物质浓度、食物、药物性质及尿液放置时间有关。
同左,碱性尿
蛋白质(PRO)
尿液PH变化可影响实验结果、药物喹宁、喹宁丁、嘧啶等强碱尿(PH=9.0)、季胺盐类
尿液PH值变化可致,高盐浓度,本一周氏蛋白,球蛋白,粘蛋白,青霉素
葡萄糖(GLU)
尿液污染了葡萄糖、H2O2、漂白粉、氧化型清洁剂
维生素C>
500mg/L,乙酰乙酸>
400mg/L,5-羟吲哚乙酸,尿黑酸,阿司匹林,左旋多巴,酮体,高比重,低PH时。
酮体(KET)
苯丙酮和酚酞复合物含-SH基物质(巯甲丙脯酸),BSP、L-DOPA,头孢类抗菌素,高度着色尿
细菌污染,尿放置时间长。
胆红素(BIL)
大量氯丙嗪治疗,尿中含盐酸偶氮吡啶,色素尿,尿蓝母,硫酸吲哚酚
阳光照射,尿中含维生素C≥(250mg/L),亚硝酸盐,陈旧尿。
尿胆原(URO)
胆色素原,吲哚,胆红素,吩噻嗪,药物色素,非那吡啶,对氨苯磺酸。
阳光照射,偶氮基色素药物,亚硝酸盐,福尔马林。
亚硝酸盐(NIT)
细菌污染,标本放置太久,色素尿,非那吡啶。
尿在膀胱逗留时间短,非利用硝酸盐微生物感染,NIT≤13umol/L,尿中维生素C≥250mg/L,硝基呋喃。
红细胞(BLO)
次氯酸盐、易热酶干扰,细菌过氧化物酶污染,肌红蛋白,氧化型清洁剂。
高浓度维生素C(≥200mg/L),高蛋白尿,高比重尿,PH<
5.0,卡普托利,福尔马林,样品末混匀,RBC沉淀,试条Hb灵敏度达不到150mg/L。
白细胞(LEU)
福尔马林,呋喃坦啶,大量胆红素,氧化型清洁剂。
尿比重高,头孢霉素IV、庆大霉素,四环素,硼酸,高浓度草酸。
3.3显微镜检查
尿液显微镜检查是尿液有形成份确证的唯一方法
3.3.1NCCLS对尿沉渣镜检范围提出三点要求。
v医生提出要求
v病人的疾病,病情或其他检查要求。
v尿液分析中有任何一项理化检查不正常。
3.3.2根据NCCLSLireratureGP16-A要求,达到以下条件者可认为是标准化操作:
v尿样最佳选择是第一次晨尿,并在未冷藏情况下2小时内完成检查。
v尿样本量应标准化,建议统一用10ml。
v离心时间建议统一为5分钟,以确保同等程度的沉积。
v离心速度建议相对离心力(RCF)约400G。
v留置尿沉渣样本为0.2ml(200ul)。
v用统一述语,报告格式,参考范围对尿有形成份以单位体积定量报告。
建议用XX细胞(或管型)/ul的报告方式。
(有利于临床医师对患者进行动态观察)。
在报告结果前,必须重审所有结果(包括生化结果)是否与镜检结果一致,不符合的结果应再次检测。
3.3.3尿沉渣的检查内容应包括:
v细胞:
红细胞、白细胞、吞噬细胞、上皮细胞(包括肾小管上皮细胞、移行上皮细胞、鳞状上皮细胞)、异型细胞等。
v管型:
透明管型、细胞管型、颗粒
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