临床微生物SOP-链球菌属检验标准操作规程Word文档格式.doc
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1.概述
链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。
该菌属种类繁多,目前临床上仍沿用Lancefield血清学方法进行分群(A、B、C、D、F、G等18个群),或根据溶血现象(β溶血,α溶血或草绿色溶血、γ溶血或不溶血)进行分类。
化脓性链球菌是临床上最重要的链球菌,属A群、β溶血的链球菌。
2.标本类型
血液、尿液、痰、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。
3.鉴定
3.1形态与染色革兰阳性球菌,固体培养基上呈单个或成双排列,较少呈链状排列,肉汤培养基中呈长链状排列,肺炎链球菌呈矛头状,成双或链状排列。
3.2培养特性在血琼脂平板上菌落可出现三种溶血反应:
α溶血周围有灰绿色的狭窄溶血环;
β溶血周围有明显较大的完全透明环;
γ溶血(不溶血性)无异常变化。
肺炎链球菌菌落中央呈脐窝状、表面光滑、灰色、扁平,周围有草绿色α溶血环。
3.3生化反应触酶试验阴性,对各种碳水化合物的分解因菌种而异,链球菌不被胆汁溶解。
肺炎链球菌胆盐溶菌试验阳性,Optochin试验敏感(抑菌环>
14mm)。
3.4鉴定要点
3.4.1本菌属特征革兰阳性球菌,单个、成双或链状排列,菌落较小,可出现β溶血、α溶血或不溶血,触酶试验阴性。
3.4.2根据溶血及关键性试验,对链球菌进行推测性鉴定分群。
A群链球菌(化脓性链球菌):
α溶血,杆菌肽敏感。
B群链球菌(无乳链球菌):
β溶血,CAMP试验阳性,马尿酸钠试验阳性。
C群链球菌(似马链球菌、兽疫链球菌和马链球菌等):
马尿酸钠、6.5%氯化钠耐盐试验均为阴性,血清学分型、杆菌肽耐药(抑菌试验阴性)。
D群肠球菌(粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌等):
胆汁七叶苷、6.5%氯化钠耐盐试验阳性,45℃生长。
现归属于肠球菌属。
C、F及G群链球菌的鉴定常需用血清学方法。
非β溶血链球菌的鉴别见表
菌名
Optochin试验
胆汁溶菌试验
胆汁七叶苷试验
肺炎链球菌
+
-
牛链球菌
其他草绿色链球菌群
3.5操作步骤
3.5.1涂片、染色观察菌落特征,挑取可疑菌落,涂片染色镜检。
3.5.2触媒试验参见《触媒试验标准操作规程》
3.5.3鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。
4.药敏
参见《抗菌药物敏感试验标准操作规程》及CLSI最新版本文件。
5.质量控制
参见《质量管理程序》。
6.检验结果解释与分析
6.1草绿色链球菌是人体正常菌群的一部分,通常是不致病的,只有当草绿色链球菌出现在血液等无菌液体中时,鉴定才有意义。
6.2如果检测出链球菌对青霉素敏感,同时该菌被认为对氨苄西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、阿莫西林、头孢克洛、头孢唑林、头孢地尼、头孢布坦、头孢曲松、头孢吡肟、头孢唑肟、头孢噻肟等头孢类敏感,则不必进行上述抗生素的药敏试验。
如果检测出肺炎链球菌苯唑西林抑菌圈≤19mm,应当检测青霉素、头孢噻肟和头孢曲松的MIC,因为可能发生青霉素耐药或中介现象。
如果检测出链球菌对红霉素敏感或耐药,则提示该菌对克拉霉素、阿奇霉素、地
红霉素敏感或耐药。
近年来青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)及多重耐药(MDRSP)菌株的增加,给临床治疗带来一定的困难。
7.临床意义
化脓性链球菌(A群链球菌)是引起化脓性感染的主要病原菌,致病力最强,可引起痈、蜂窝织炎、急性咽炎、丹毒、脓疱疮、猩红热、医源性伤口感染和产后感染等。
此外其感染后也可发生急、慢性风湿热和急性肾小球肾炎等严重变态反应性并发症。
无乳链球菌(B群)正常寄居于妇女阴道和人体肠道,带菌率可达30%左右,此菌可引起新生儿感染。
肺炎链球菌存在于正常人群的口腔、鼻咽部,属正常菌群,可引起大叶性肺炎或支气管炎。
草绿色链球菌是人体上呼吸道正常
菌群,通常不致病。
如果在血液内或无菌体液中检出草绿色链球菌,有临床意义。
8.鉴定流程
链球菌科(链球菌属和肠球菌属)的鉴定索引
菌落观察:
灰暗色、扁平、干燥,溶血或不溶血
涂片染色:
GPC球菌,单个、成双或短链状排列
触酶(-)
α溶血β溶血γ溶血
菌落、菌体特征胆汁七叶苷
胆汁溶菌试验杆菌肽CAMP七叶苷-+
Optochin(5ug)S黄色素+草链D群
A链马尿酸钠胆汁七叶苷6.5%NaCl
S(溶菌,>
15)R+
肺链胆汁七叶苷B链+-+-
--D群G链肠球菌属D链
草绿链球菌群D群
参考文献
[1]中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:
2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008
[2]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:
上海科学技术出版社,2007
[3]叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京:
东南大学出版社,2006
[4]MurrayPR.Manual0/FClinicalMicrobilogy.9thed.Washington:
ASMPress,2007
[5]IS015189:
2007医学实验室一质量和能力认可准则.2007
编写人签名
复审人签名
审批人签名
生效日期
姓名:
XXX
编写日期:
2011-05
姓名:
复审日期:
2011-06
批准日期:
2011-07
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