性别控制研究PPT资料.pptx
- 文档编号:13007292
- 上传时间:2022-10-02
- 格式:PPTX
- 页数:26
- 大小:2.88MB
性别控制研究PPT资料.pptx
《性别控制研究PPT资料.pptx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《性别控制研究PPT资料.pptx(26页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
H-Y抗原是存在于雄性哺乳动物细胞膜上的一种糖蛋白。
但H-Y抗原表达与睾丸发育不总具有相关性,并不决定睾丸分化。
SRY(sexdeterminingregionofY-chromosome,Y染色体性别决定区):
1987年,Page发现睾丸决定因子(testisdeterminingfactor,TDF)存在于Y染色体短臂接近假长染色体的区域。
1990年,Sinclair等研究人、牛、小鼠时,确定距假常染色体边缘5kb处的一个片段为SRY。
同时,Gubby等在小鼠中发现类似同源系列,称为Sry。
SRY就是人们长期探索的雄性基因。
生殖器官个体发育的特点与泌尿器官的发生和结构上有密切关系幼胚生殖腺是两性的均有两套生殖管道(一对中肾管Mesonephriccanal即WOLFFIANDUCT、一对副中肾管Paramesonephriccanal即MULLERIANDUCT)性分化后的个体,只有一套生殖管道发育UROGENSINUS&
TUBERCandVULVAUTERUSOVARYVAGINAUTERINETUBESEXUALDEVELOPMEPENISSEMINALVESICLEDUCTEPIDIDYMISDUCTUSDEFERNSEFFERENTBULBOURETHRALGLANDurethraINTERSTITIALCELLSRETETESTISTUBULUSRECTUSSEMINIFEROUSTUBULETESTISWOLFFIANDUCTMESONEPHRICDUCTPROSTATEPARAMESONEPHRICDUCTM:
ULLERIANDUCTGONADonholdVULVAUTERUSOVARYVAGINAUTERINETUBESOMESEXUALHOMOLOGUESPROSTATEPENISSEMINALVESICLEDUCTEPIDIDYMISDUCTUSDEFERNSEFFERENTBULBOURETHRALGLANDurethraINTERSTITIALCELLSRETETESTISTUBULUSRECTUSSEMINIFEROUSTUBULETESTISLabiamajoraClitorisPenisScrotumUterusUterinetubeAppendixtestisEpididymisPUtricleOvaryTestisEpoo:
phoronEfferentductsGa:
rtner抯ductTESTISGONADonholdYSex-determiningFactor/SRYDRIVENPATHWAYSTestosteroneMullerian-inhibitingFacDihydrotestosteronePENISSEMINALVESICLERETETESTISDUCTEPIDIDYMISDUCTUSDEFERNSEFFERENTBULBOURETHRALGLANDurethraINTERSTITIALCELLSTUBULUSRECTUSSEMINIFEROUSTUBULETESTISWOLFFIANDUCTSINUUROGENITAL&
TUBERCLEPROSTATEMU:
LLERIANregressesOVARYGONADonholdDefaultpathwayWOLFFIANDUregressesUTERUSOVARYVAGINAVULVAUTERINETUBEGENITALTUBERCL?
MU:
LLERIANDUCTProblemsofsexualdevelopmentcanariseatseveralpoints,thus:
(i)AbsentorfaultySRYgeneinthemale(ii)Failureoftestiscellstorespondtothegenesproduct(iii)AbsentordefectiveMIFgene;
orproblemsintheMullerianductsresponse(iv)Leydig-cellfailuretomakeanddeploytheenzymestoproducetestosterone(v)DefectiveorabsentandrogenreceptorintheWolffian-ductandexternal-genitaltargetsfortestosterone(XYgenotype,butwoman抯phenotype)WOLFFIANDUCTregresses,exceptforUTERUSOVARYVAGINAREMNANTSINTHEWOMANMesonephricMU:
LLERIANDUCTUTERINETUBEEpoo:
phoron&
Paraoo:
phoronVULVAGa:
rtner抯cystPENISSEMINALVESICLERETETESTISEPIDIDYMISDUCTUSDEFERNSurethraINTERSTITIALCELLSTESTISWOLFFIANDUCTUROGENITALSIN&
TUBERCLEPROSTATEEFFERENTTUBULUSDUCTRECTUSSEMINIFEROUSTUBULEAppendixtestisBULBOURETHRALGLANDProstaticUtricleParamesonephricREMNANTSINTHEMANM:
ULLERIANDUCTregresses,exceptfor胚胎性别鉴定核型分析:
显微镜检查囊胚细胞核型,寻找与X性染色体不配对的Y染色体。
处理时间长,准确率差异大,胚胎损伤大。
测定X染色体相关的酶活性:
与X染色体相关连酶(如次黄嘌呤磷的细胞内浓度及活性是雄性胚的两倍(但可能因1条雌性染色体失活造成误判),可用于胚胎早期检测。
检测H-Y抗原:
用雄鼠脾脏匀浆制造H-Y抗血清或单克隆抗体,检测效价,与桑椹胚共培养,继续发育为有腔囊胚者为雌性胚胎,发育抑制者为雄性胚胎。
雄性胚胎洗脱抗血清后仍可继续发育。
抗血清还可连上带有荧光素的二抗,发荧光的胚胎为雄性胚胎。
本法具有一定准确性,对胚胎损伤小。
分子生物学方法(检测SRY)PCR方法:
引物设计、胚胎取样(5-8个胚胎细胞)、扩增、电泳、染色显带。
时间2-2.5h,准确率95%,胚胎损失不大LAMP法:
针对目标基因的6个区段设计4对引物,链置换反应,可利用浊度仪一步完成扩增、检出、判定,时间40min。
简便、快速、准确,但仪器和试剂盒较贵。
核酸探针法:
将胚胎细胞DNA与Y染色体特异标记的DNA序列(探针)杂交,阳性者为雄性。
灵敏度低、耗时长。
性别控制:
XY精子分离物理方法沉降法凝胶过滤法密度梯度离心法电泳法分离结果不确实,纯度低、精子受损伤免疫学方法(免疫磁力选择法):
将洗过的精子用H-Y抗原的单克隆抗体处理,再加入包裹超磁化多聚体小珠的二抗,利用磁体可将与磁珠相连的精子从样品中去除。
此法分离纯度高、效率低。
流式细胞仪精子分离法1981年用流式细胞仪测精子DNA1989年分离活精子成功,得到性控兔后代1989-1998年实验应用2000年英国Cogent公司进入商业化生产(有10台仪器,日产量1080支)世界上少数几个国家拥有不足20台仪器中国几家公司正在积极引进,目前规模:
天津12台,内蒙2台原理X精子比Y精子DNA含量多3%-4%(猪3.5%、牛3.9%、羊4.2%)采用无毒荧光染料(HOECHST33342)对精子染色流式细胞仪中氩离子紫外激光激发荧光染料,产生蓝色激发光(X精子荧光强)仪器喷嘴高频震动,使喷出液体形成一滴滴带单个精子的液滴荧光信号通过光电倍增管转变为电信号,经仪器信息处理,使液滴中单个X和Y精子分别带上负、正电荷液滴通过高压电场,带有不同电荷的X、Y精子分别落入不同的收容器中。
分离效率仪器喷射液体速率每秒90000滴每秒精子收集总速率20000滴(微滴中含多个精子不能被识别,只有被识别的精子才能施加电荷)每秒钟收集活的X、Y精子3000-5000个每小时可得到1000-1400万个X精子每天可生产100-150支细管X精液(每支精子数200万)分离正确率约90%人工授精青年母牛受孕率50%存在问题分离效率低(4万/年、台),每支细管精子数少(200万/支)、成本高(50美元或350-400元/支)一般冷冻精液每支精子数1500-3000万只,深部输精有效精子数应达到500-1000万。
分离过程对精子有一定损伤需要解决顶尖公牛精子的来源仪器昂贵、分离效率低和得到顶尖公牛精液是成本居高不下的主要原因应对措施养殖顶尖公牛,保证精液质量,分离的精液能占领市场提高分离效率,降低分离精液成本配合其它技术(子宫深部或输卵管输精、超数排卵、体外受精、单精子注射等),提高分离精液的使用效率冻精生产单位还得与行政主管部门协调精液品质、每支冻精精子数量等有关规定和标准的问题利用流式细胞仪分离X、Y精子是目前最有可能在生产上得到应用的性别控制技术。
如何提高分离效率、降低X(Y)精子成本、发展分离精子应用的相关技术,是本项技术能否在生产上得到广泛推广的关键。
本项技术有可能为我国奶牛的繁殖和改良带来革命性的变化。
谢谢
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 性别 控制 研究