血清清蛋白γ球蛋白的分离提纯与鉴定医学第六实验室讲解.docx
- 文档编号:12784534
- 上传时间:2023-04-22
- 格式:DOCX
- 页数:18
- 大小:239.38KB
血清清蛋白γ球蛋白的分离提纯与鉴定医学第六实验室讲解.docx
《血清清蛋白γ球蛋白的分离提纯与鉴定医学第六实验室讲解.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《血清清蛋白γ球蛋白的分离提纯与鉴定医学第六实验室讲解.docx(18页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
血清清蛋白γ球蛋白的分离提纯与鉴定医学第六实验室讲解
生物化学实验报告
姓名:
学号:
专业年级:
组别:
第六实验室
生物化学与分子生物学实验教学中心
一、实验室规则
1.实验前应认真预习实验指导,明确实验目的和要求,写出预实验报告。
2.进入实验室必须穿白大衣。
严格遵守实验课纪律,不得无故迟到或早退。
不得高声说话。
严禁拿实验器具开玩笑。
实验室内禁止吸烟、用餐。
3.严格按操作规程进行实验。
实验过程中自己不能解决或决定的问题,切勿盲目处理,应及时请教指导老师。
4.严格按操作规程使用仪器,凡不熟悉操作方法的仪器不得随意动用,对贵重的精密仪器必须先熟知使用方法,才能开始使用;仪器发生故障,应立即关闭电源并报告老师,不得擅自拆修。
5.取用试剂时必须“随开随盖”,“盖随瓶走”,即用毕立即盖好放回原处,切忌“张冠李戴”,避免污染。
6.爱护公物,节约水、电、试剂,遵守损坏仪器报告、登记、赔偿制度。
7.注意水、电、试剂的使用安全。
使用易燃易爆物品时应远离火源。
用试管加热时,管口不准对人。
严防强酸强碱及有毒物质吸入口内或溅到别人身上。
任何时候不得将强酸、强碱、高温、有毒物质抛洒在实验台上。
8.废纸及其它固体废物严禁倒入水槽,应倒到垃圾桶内。
废弃液体如为强酸强碱,必须事先用水稀释,方可倒入水槽内,并放水冲走。
9.以实事求是的科学态度如实记录实验结果,仔细分析,做出客观结论。
实验失败,须认真查找原因,而不能任意涂改实验结果。
实验完毕,认真书写实验报告,按时上交。
10.实验完毕,个人应将试剂、仪器器材摆放整齐,用过的玻璃器皿应刷洗干净归置好,方可离开实验室。
值日生则要认真负责整个实验室的清洁和整理,保持实验整洁卫生。
离开实验室前检查电源、水源和门窗的安全等,并严格执行值日生登记制度。
二、实验报告的基本要求
实验报告通过分析总结实验的结果和问题,加深对有关理论和技术的理解与掌握,提高分析、综合、概括问题的能力,同时也是学习撰写研究论文的过程。
1.实验报告应该在专用的生化实验报告本上、按上述格式要求书写。
2.实验报告的前三部分
实验原理、
实验材料(包括实验样品、主要试剂、主要仪器与器材)、
实验步骤(包括实验流程与操作步骤)要求在实验课前预习后撰写,作为实验预习报告的内容。
预习时也要考虑并设计好相应实验记录的表格。
3.每项内容的基本要求
(1)实验原理:
简明扼要地写出实验的原理,涉及化学反应时用化学反应方程式表示。
(2)实验材料:
应包括各种来源的生物样品及试剂和主要仪器。
说明化学试剂时要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。
试剂要标清所用的浓度。
(3)实验步骤:
描述要简洁,不能照抄实验讲义,可以采用工艺流程图的方式或自行设计的表格来表示,但对实验条件和操作的关键环节应写清楚,以便他人重复。
(4)实验记录:
包括主要实验条件、实验中观察到的现象及实验中的原始数据。
(5)结果(定量实验包括计算):
应把所得的实验结果(如观察现象)和数据进行整理、归纳、分析、对比,尽量用图表的形式概括实验的结果,如实验组与对照组实验结果的比较表等(有时对实验结果还可附以必要的说明)。
(6)讨论:
不应是实验结果的重述,而是以结果为基础的逻辑推论。
如对定性实验,在分析实验结果的基础上应有中肯的结论。
还可以包括关于实验方法、操作技术和有关实验的一些问题,对实验异常结果的分析和评论,对于实验设计的认识、体会和建议,对实验课的改进意见等。
(7)结论:
一般实验要有结论,结论要简单扼要,说明本次实验所获得的结果。
三、实验报告的评分标准(百分制)
1.实验预习报告内容(30分)
学生进入实验室前应预习实验,并书写预习报告。
实验预习报告应包括以下三部分:
实验原理(10分):
要求以自己的语言归纳要点;
实验材料(5分):
包括样品、试剂及仪器。
只列出主要仪器、试剂(常规材料不列);
实验方法(15分):
包括流程或路线、操作步骤,要以流程图、表格式给出要点,简明扼要。
依据各部分内容是否完整、清楚、简明等,分以下三个等级给分。
优秀
合格
不合格
30~25
24~18分
17~0分
优秀:
项目完整,能反映实验者的加工、整理、提炼。
合格:
较完整,有一定整理,但不够精炼。
不合格:
不完整、缺项,大段文字,完全照抄教材,记流水账。
实验预习报告不合格者,不允许进行实验。
该实验应重新预约,待实验室安排时间后方可进行实验。
2.实验记录内容(20分)
实验记录是实验教学、科学研究的重要环节之一,必须培养严谨的科学作风。
实验记录的主要内容包括以下三方面:
主要实验条件(如材料的来源、质量;试剂的规格、用量、浓度;实验时间、操作要点中的技巧、失误等,以便总结实验时进行核对和作为查找成败原因的参考依据);
实验中观察到的现象(如加入试剂后溶液颜色的变化);
原始实验数据:
设计实验数据表格(注意三线表格式),准确记录实验中测得的原始数据。
记录测量值时,要根据仪器的精确度准确记录有效数字(如吸光值为0.050,不应写成0.05),注意有效数字的位数。
实验记录应在实验过程中书写;应该用钢笔或者圆珠笔记录,不能用铅笔。
记录不可擦抹和涂改,写错时可以准确划去重记。
记录数据时请教师审核并签名。
实验记录分以下三个等级给分。
优秀
合格
不合格
20~17
16~13分
12~0分
优秀:
如实详细地记录了实验条件、实验中观察到的现象、结果及实验中的原始数据(如三次测定的吸光度值)等;实验记录用钢笔或者圆珠笔记录,没有抹擦和涂改迹象。
书写准确,表格规范(三线表)。
有教师的签字审核。
合格:
记录了主要实验条件,但不详细、凌乱;实验中观察到的现象不细致;原始数据无涂改迹象,但不规范。
有教师的签字审核。
不合格:
记录不完整,有遗漏;原始数据有抹擦和涂改迹象、捏造数据(以0分计);图、表格形式错误;用铅笔记录原始数据;无教师的签字审核。
若记录的结果有怀疑、遗漏、丢失,必须重做实验,培养严谨的科学作风。
3.结果与讨论(45分)
(1)数据处理(5分)
对实验中所测得的一系列数值,要选择合适的处理方法进行整理和分析。
数据处理时,要根据计算公式正确书写中间计算过程或推导过程及结果,得出最终实验结果。
要注意有效数字的位数、单位(国际单位制)。
经过统计处理的数据要以X±SD表示。
可分成以下三个等级给分。
优秀
合格
不合格
5分
4分
3~0分
优秀:
处理方法合理,中间过程清楚,数据格式单位规范。
合格:
处理方法较合理,有中间计算过程;数据格式单位较规范。
不合格:
处理方法不当;无中间过程;有效数字的位数、单位不规范。
(2)结果(20分)
实验结果部分应把所观察到的现象和处理的最终数据进行归纳、分析、比对,以列表法或作图法来表示。
同时对结果还可附以必要的说明。
要注意图表的规范:
表格要有编号、标题;表格中数据要有单位(通常列在每一列顶端的第一行或每一行左端的第一列)。
图也要有编号、标题,标注在图的下方;直角坐标图的纵轴和横轴要标出方向、名称、单位和长度单位;电泳图谱和层析图谱等要标明正、负极方向及分离出的区带、色带或色斑的组分或成分。
电泳结果还要标记泳道,并在图题下给出泳道的注释;要标出分子量标准的各条带的大小。
并且注意需要结合图表对结果进行较详细的解释说明。
可分成以下三个等级给分。
优秀
合格
不合格
20~17
16~13分
12~0分
优秀:
实验结果有归纳、解释说明,结果准确,格式规范。
合格:
堆砌实验现象、数据,解释说明少。
不合格:
最终实验结果错误且无解释说明,图表、数字不规范。
(3)讨论(20分)
讨论应围绕实验结果进行,不是实验结果的重述,而是以实验结果为基础的逻辑推论,基本内容包括:
①用已有的专业知识理论对实验结果进行讨论,从理论上对实验结果的各种资料、数据、现象等进行综合分析、解释,说明实验结果,重点阐述实验中出现的一般规律与特殊性规律之间的关系;
实验结果提示了哪些新问题,指出结果与结论的理论意义及其大小;
对实践的指导与应用价值;④实验中遇到的问题、差错和教训,与预想不一致的原因,有何待解决的方法,提出在今后的实验中需要注意和改进的地方;⑤实验目的是否达到。
同时能结合查阅的其他文献等资料进行讨论,有独到的见解。
在实验结果和理论分析的基础上,经过推理,归纳规律得出结论。
结论要严谨、精炼,表达要准确,与实验目的呼应。
也分三个等级给分。
优秀
合格
不合格
20~17
16~13分
12~0分
优秀:
分析实验结果的问题与经验;分析实验设计的优劣;能提出实验技术、方法的改进意见;能结合自己查阅的其他资料来讨论,有自己独到的见解;有结论。
合格:
仅针对实验结果进行讨论,有一定自己的见解。
不合格:
将讨论写成注意事项分析或回答思考题等,与实验结果无关。
4.格式与版面(5分)
按照实验报告的书写格式、版面是否整洁、工整,分三个等级给分。
优秀
合格
不合格
5分
4分
3~0分
优秀:
实验报告字体工整,版面整洁。
合格:
实验报告字体较工整,版面较整洁。
不合格:
实验报告字体潦草,版面凌乱。
5.加分(5~10分):
以全英文书写实验报告视情况加5~10分。
IntroductiontoBiochemistryExperiment
Biochemistryexperimentisapreclinicalcurriculumofomni-specialtiesinbiomedicineandanexperimentalcurriculumforgoingwithbiochemistryteaching.Itstaskistohelpstudentstounderstandandmasterthebasictechnicalprinciplesandmethodsinbiochemistry,topossesstheabilitiesofanalyzingproblemsandworkingoutsolutionsindependently.Bylearningthiscurriculum,thestudentsshouldunderstandthebasicexperimentalprinciplesofspectrophotometry,chromatography,electrophoresisandcentrifuge,etal.,masterthebasictechnicalskillscommonlyusedwiththeseprinciplesandpossesstheabilitiestoapplytheskillssystematicallyandtooptimizetheexperimentconditions.Thegoalofbiochemistryexperimentistomakethestudentsstrengthentheirgraspofthebiochemistrytheoriesandtointegratewhattheyhavelearnedwithscientificresearchandclinicalapplication.
Thereare9experimentsthatrepresentmostimportantareasofbiochemistryincludingcharacterizationofproteinsandnucleicacidbyelectrophoresisandspectroscopicorchromatographicanalysis.Theseexperimentsareessentialforatypicalone-semestercourseandaretoberevisedandupdatedwhennecessary.Newexperimentswillbeaddedtothislistinthefuturetocovermoretopicsofbiochemistryandtoreflectthemanyadvancesinbiochemistry.
BiochemistryLaboratoryRules
1.Pre-LaboratoryPreparation
AllstudentsmustprepareBEFOREARRIVINGINTHELABORATORY.Theexperimentsaredesignedsothattheycanbecarriedout–withproperadvanceplanning–withinthefour-hourlaboratoryperiods.Itisexpectedthatstudentsshouldhaveafundamentalunderstandingofthetheoryandpracticespertainingtotheexperimentbeforeenteringthelaboratorytoconducttheseexperiments.
Biochemicalexperimentsoftenemploytoxicchemicals.Forthehealthandsafetyofallstudents,theexperimentalprotocolsmustbestudiedandtheday’sactivitiesshouldbeplannedinadvance.Ifitbecomesobviousthatastudentisill-prepared,heorshewillnotbepermittedtocontinuetheexperiment.
2.SafetyPrecautionsintheBiochemistryLaboratory
AllINJURIES,nomatterhowminor,shouldbereportedtotheinstructorIMMEDIATELY.Ifyouhaveanyquestionsregardingthesafehandlingofanybiochemical,consultyourinstructor.
3.Strictlyfollowtheexperimentalprocedures.
Turntoinstructorsimmediatelyforhelponcethelaboratoryinstrumentsdon’twork.DON’Ttrytofixthebreakdownbyyourself.Propercompensationforlossbecauseofyourownfaultwillbedemanded.
4.DisposalofSolutions
Inmostcasesthesolutionsusedduringthelaboratorycanbedisposedofasdirectedbylaboratorypersonnelattheendoftheperiod.Anyvolatileorganicsolventsshouldbeplacedinthehoodasdirected.Laboratorypersonnelwillthendisposeofthesesolvents.
5.Solidtrashesincludingwastepapersareprohibitedtodiscardintothesink.
6.Alltheglasswareshouldbecleanedimmediatelyafteruse.Andallthereagentbottlesandinstrumentsshouldbeplacedneatlyafteruse.
7.AnexperimentreportshouldbesubmittedtotheProfessorand/orTAsintime.
LaboratoryReport
1.Althoughstudentswillworkinpairsforallexperiments,eachstudentmustturninanindividuallaboratoryreport,writtenbyhimselforherself.Thesereportsshouldbeclearlywritteninink,typed,orprintedandbeclearandlegible.Ifmistakesaremade,neatlycrossthemoutandenterthecorrectionsnearby.Reportsshouldbewritteninthethirdperson(e.g.,donotuse“I”or“we”).STAPLEaTitlePagetothetopofthereportandSTAPLEtheaccompanyinggraphs,tables,andlaboratorynotebooksheetstotheback.Ifthereportisnotclearlypresented,theinstructormayreturnthereportwithoutgradingit.
2.Eachlaboratoryreportshouldconsistof:
a.TitlePage
Atitlepageforeachexperimentisrequiredandshouldstatethetitleoftheexperiment,thenameofthestudent,thedatesofthelaboratoryperiodscovered,thenamesofthelaboratorypartners,andthedatethatthelaboratoryreportisdue.
b.Objectives
Statementofthepointoftheexperiment-innomorethantwosentences.
c.Procedures
DONOTrecapitulatethelaboratoryprotocol.WriteinyouOWNwords.Aclearflowchartoftheproceduresisrecommended.
d.Results
Thissectionshouldsummarizeyourobservationspresentedintheformofgraphs,calculations,tables,etc.
e.Discussion
Evaluateyourdata.Explainwhatyouobservedandalsowhyyouthinkthedatawereasobserved.Donotrestateprocedures!
Listpossiblesitesoferror.Wheneverpossibledemonstrateyourunderstandingofthetheorybehindtheexperiment.Supportyourresults(e.g.:
“UsingthelinearportionoftheAbsorbancevs.Concentrationgraphtocalculatetheslope,itwasdeterminedthat...”)(Limitedtoonlyonepageperexperimentforexperiments1-6andfourpagesforexperiment7-9).
3.Ifanylaboratoryreportisnotcompletedandturnedinbytheendofthequarter,thestudentmaybereceiveanIncompleteforthecourseatthediscretionoftheinstructors;alternativelya“zero”forthemissinglaboratoryreportwillberecordedandthefinalgradedeterminedaccordingly.
实验名称
(TitleofExperimetn)
血清清蛋白、γ-球蛋白的分离、提纯与鉴定
实验日期
(DateofExperiment)
2013-12-13
实验地点(LabNo.)
第六实验室
合作者(Partner)
指导老师(Instructor)
总分
(TotalScore)
教师签名(Signature)
批改日期
(Date)
【实验报告第一部分(预习报告内容):
实验原理、
实验材料(包括实验样品、主要试剂、主要仪器与器材)、
实验步骤(包括实验流程、操作步骤和注意事项);评分(满分30分):
XX】
1、实验原理:
蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。
不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等都有所不同。
利用这些性质的差别,可分离纯化各种蛋白质。
2、实验材料:
药品:
人血清、葡聚糖凝胶G-25(SephadexG-25)层析柱、二乙基氨基乙基(DEAE)纤维素离子交换层析柱、饱和硫酸铵溶液、各不同浓度的醋酸铵溶液、20%磺基水杨酸、1%BaCl2溶液。
仪器:
电泳仪、电泳槽
实验步骤:
实验流程:
粗提→脱盐→纯化→鉴定
操作步骤:
步骤
操作
盐析粗提
取血清0.8ml,边摇边缓慢滴加饱和硫酸铵溶液0.8ml,混匀室温放置10min,4000r/min离心10min。
凝胶柱层析除盐
1、沉淀(含球蛋白)加水0.6ml溶解。
2、过葡聚糖凝胶G-25层析柱(1.0
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 血清 蛋白 球蛋白 分离 提纯 鉴定 医学 第六 实验室 讲解
![提示](https://static.bdocx.com/images/bang_tan.gif)