大鼠取血方法.docx

大鼠取血方法.docx

《大鼠取血方法.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《大鼠取血方法.docx（13页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

大鼠取血方法

大鼠取血方法

1.割（剪）尾采血：

当所需血量很少时采用本法。

每鼠一般可采血10余次以上。

小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。

2.鼠尾刺血法：

大鼠用血量不多时（仅做白细胞计数或血红蛋白检查），可采用本法。

先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。

用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集10～50mm3。

如果长期反复取血，应先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。

3.眼眶静脉丛采血：

体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。

4.断头取血：

采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大（小）鼠的颈部皮肤，并作动物头朝下倾的姿势。

右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。

小鼠可采用约0.8～1.2ml;大鼠约5-10ml。

5.心脏采血：

鼠类的心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。

若做开胸一次死亡采血，先将动物作深麻醉，打开胸腔，暴露心脏，用针头刺入右心室，吸取血液。

小鼠约0.5-0.6ml；大鼠约0.8-1.2ml。

1.浅麻醉大鼠

2.四肢展开固定在平板上

3.按常规碘酒、酒精消毒后

4.用食指感觉心博最动处

5.大约在胸骨下缘1/3处、稍偏左0.2-0.5左右的地方垂直进针（1/4号）

6.针头抵心脏有明显的搏动感，再稍进针，有空虚感，血液跳跃而上针腔

7.从血液的颜色很容易判断在心室还是心房，一般都在心室

8.多次同一大鼠的心脏采血，切记初次进针的位置及深度，不要随意更换固定姿势！

9.我每次取1ml血液，大约可操作4-5次（200g大鼠）

6.颈动静脉采血：

先将动物仰位固定，切开颈部皮肤，分离皮下结缔组织，使颈静脉充分暴露，可用注射器吸出血液。

在气管两侧分离出颈动脉，离心端结扎，向心端剪口将血滴入试管内。

离心取上清后，余下的红细胞加适量生理盐水从尾静脉中回输给大鼠，这样可能对大鼠的血量、体内药物的浓度等影响均小些。

颈动静脉插管:

1.麻醉后手术,大鼠固定后头朝自己,颈部中线附近开1-2厘米口,用弯止血钳钝性分离,动脉在中间,静脉比较靠边,而且分支较多,找到较粗的部分,小心,耐心分离,用线结扎远心端,在近心端预置一结扎用线,用止血钳牵拉远心端线,使血管充盈,显微剪剪开小口,插管,结扎.插管封口.（打结即可）

2.动脉方法相似.

3.将动静脉插管引至背后,分清动静脉,一般手术后17小时或更长时间开始给药,取血,通常动脉取血,静脉给药,期间要用肝素冲管道.

颈静脉采血：

采血者可以站在动物头端，不需要麻醉动物，用个硬纸筒稍固定头部防止动物咬，左手固定将头部稍向左扭一下，会看见出现一个三角区，右手持注射器平行于三角区正中进针就可以了。

左右两边颈静脉均可以采，采左边时上面的操作反方向。

从锁骨上方，紧贴锁骨中间的地方进针，这个位置很重要！

！

！

！

！

！

！

！

！

！

进针后，稍稍抽下针管，如果没有血，则往前或向后走下针头，其实我的经验是大都是向前扎的太多了，应往后抽下针头。

如果有血，哈哈，固定住注射器抽血吧。

抽完2ml，大鼠100%存活的

7.腹主动脉采血:

最好先将动物麻醉，仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露。

用注射器吸出血液，防止溶血。

或用无齿镊子剥离结缔组织，夹住动脉近心端，用尖头手术剪刀，剪断动脉，使血液喷入盛器。

8.股动（静）脉采血:

①先由助手握住动物，采血者左手拉直动物下肢，使静脉充盈。

或者以搏动为指标，右手用注射器刺入血管。

体重15-20g小鼠采血约0.2-0.8ml，大鼠约0.4-0.6ml。

②在大鼠麻醉状态下，固定，仰卧位固定，在大鼠的左侧腹股沟处切口，暴露股动静脉，分离并分别插管（插管中要求有肝素盐水并在插管的一头接上三通方便取血使用），取血。

注意：

药动学实验一般不主张麻醉，因此动脉插管不应使用，而且大鼠血量有限，不适合短时间内多次取血，取血量过大会直接影响大鼠生理状态，即使得到一些数据，意义也不大。

目前比较可行的办法是在每个时间点各取一组大鼠的血，再进行求算。

尾静脉取血不行，血量有限，而且采集时间太慢，根本来不及。

眼底静脉取血倒是可行的，血量最多的一回，我曾经取到过接近4ml,一般可以在1ml以上，但取血有一定难度，时间长了，手就受不了了，我的经验是可以浅麻一下，用乙醚短时间麻醉，让鼠没有太大力气就可以，而且对实验结果没有明显影响，但要几个人合作，准确掌握好取血的时间。

一个老鼠仅仅作为一个时间点的话，就从眼眶取血，大概200克大鼠可以取6ml左右，最好不要进行麻醉，只要毛细管在眼眶后扎对位置，血会象自来水一样流的，一开始的劲过了就不太挣扎了。

如果是单个大鼠连续取血，也可用本法，就是最多一次不可超出1ml，最好是0.5-0.6ml，并且适当在消除期补充生理盐水腹腔注射。

尾静脉的血没有眼眶出得快，很慢的，取用量少还可以，在取前用甲苯擦一下，使静脉扩张，然后用注射针头（经肝素润湿过）扎进去，直接就会慢慢滴出来的。

刚开始抓它时温柔点，然后使其眼充分突起，迅速扎入并旋转，一般很快就出血。

但此时它们可能会比较凶，你手卡着它脖子并牢牢地把它按在笼盖上，只要手别软，别心疼它，应该没问题的。