武工大生化作业解答.docx

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武工大生化作业解答

P77~78习题参考答案

20

P121习题解答10：

P155作业订正

补充1：

指出用电泳技术分离下列物质，pH是多少最适合，并说明理由？

（6分）。

①血清清蛋白（pI=4.9）和血红蛋白（pI=6.8）

②肌红蛋白（pI=4.6）和胰凝乳蛋白酶（pI=9.5）

③卵清蛋白（pI=4.6）和脲酶（pI=5.0）。

解：

电泳分离技术中，被分离质点所带净电荷差异越大，分离效

果就越好，所以应取两者的pI的中间值，带正电的向负极移动，

带负电的向正极移动。

因此，

①最佳pH=5.8；②最佳pH=8.2；③最佳pH=4.9。

P194习题解答：

2

补充1：

某肽经BrCN水解得到三个肽段，这三个肽段的结构分别为Asn.Trp.Gly.Met，Gly.Ala.Leu，Ala.Arg.Tyr.Asn.Met；用胰凝乳蛋白酶水解也得到三个肽段，其中一个为四肽，用6mol/LHCl水解此四肽只得到（Asp）2和一个Met三个氨基酸，请推导出此肽的氨基酸序列。

解：

P249习题解答

5：

pH7.0时：

②polyIle③polyArg⑥polyThr⑦polyPro：

不能形成α-螺旋

∵②侧链的空间位阻大；③侧链带相同电荷；⑥侧链有OH；⑦亚氨基酸

①polyLeu:

能形成α-螺旋

④polyArg（pH13））：

能形成α-螺旋（侧链解离，不带电荷）

⑤polyGlu（pH1.5）：

能形成α-螺旋（侧链不解离，不带电荷）

P348习题解答：

12

补充1：

某酶制剂的比活力为42U/mg酶蛋白，每毫升含12mg蛋白质，试计算当底物浓度达到饱和时，1mL反应液中含：

①20μL酶制剂时的反应初速度；②5μL酶制剂时的反应初速度（单位为国际活力单位）；③该酶制剂在使用前是否需要稀释？

解：

由题意知：

每mL酶制剂含有42×12=504U

①20μL酶制剂含有20×10-3×504=10.08U

酶促反应的初速度为10.08μmol/mL.min

②5μL酶制剂含有5×10-3×504=2.52U，

酶促反应的初速度为2.52μmol/mL.min

③一般情况下，酶制剂都应当稀释，以便在适当的实验期间内底物不被过分消耗，如：

10分钟内，1mL反应液内含5μL酶制剂，消耗的底物为：

（2.52μmol/mL.min）×10min=2.52×10-2mol/L。

因此，为了保证底物的消耗低于5%，必须使[S]＞0.5mol/L。

如此大的底物浓度是很难达到的，所以酶制剂在使用时应当稀释。

补充2：

己糖激酶催化葡萄糖磷酸化时，Km=0.15mmol/L，催化果糖磷酸化时，Km=1.5mmol/L。

假如两种反应的Vmax相同：

①写出己糖酶催化葡萄糖和果糖磷酸化的反应式；

②分别计算葡萄糖和果糖为底物时，[S]=0.15、1.5、15mmol/L时，酶催化反应的V0是多少？

解：

①

②根据米氏方程，计算结果如下：

[S]，mmol/L0.151.515

葡萄糖，V00.5Vmax0.91Vmax0.99Vmax

果糖，V00.091Vmax0.5Vmax0.91Vmax

补充3：

乳酸脱氢酶（LDH）催化下列反应，已知NAD+在340nm处无光吸收，而NADH在340nm处有光吸收，请设计测定LDH活性的实验方法。

解：

由于NAD+在340nm处无吸收，而NADH在340nm处有吸收，因此根据一定时间内NADH的生成量（测A340的大小）的多少既知LDH活力的大小。

LDH的活力单位定义为：

在最适条件下，每分钟在340nm下的光吸收增加0.1个单位定为1个活力单位。

13：

由题意知：

设：

1U=1μgTyr/min

∴①1mL酶液中含酶蛋白的量为0.1×6.25=0.625mg蛋白

酶活力单位为1500/（60×0.1）=250U

②比活力=250U/mL

③1g酶制剂=1000mL酶液，总蛋白=0.625g

总活力=250U/mL×25mL=6.25×103U。

14：

1U=1g淀粉/h

P381习题解答

3

10：

由图可知:

①Km=5×10-4mol/L

②Vmax=6μmol/L.min

③Vmax=kcat.[ET]，

kcat=Vmax/[ET]=6/10-3=6×103/minkcat/Km=6×103/5×10-4×60

=2×105L/mol

④kcat=6×103/min=6×103/60=100/S

13：

已知：

[I]=2×10-4mol/L，Km=Km`，Vmax`=75%Vmax，

又知：

V=Vmax[S]/（Km+[S]）（1+[I]/Ki）

Vmax`=Vmax/（1+[I]/Ki）即

75%Vmax=Vmax/（1+2×10-4/Ki），Ki=6.66×10-5mol/L

P430习题解答

8

琥珀酸为底物的竞争物，与ATCase结合，可改变酶的构象，使之从T→R转化，在[Asp]低时，[琥珀酸]↑，平衡向右偏移程度↑，∴v↑。

但琥珀酸并不是酶的底物，当[琥珀酸]增至一定值后，T→R转变达到最大程度，同时终产物[CTP]也达到最大，从而对反应造成抑制，另底物Asp消耗完，也无CTP生成，∴v↓。

P500习题解答

下册P90习题解答

2

P112习题解答

4

P174习题解答：

1

P195习题解答：

1

7、缺脱枝酶

糖原磷酸化酶：

催化糖原α（1→4）糖苷键磷酸解

脱枝酶：

催化糖原α（1→6）糖苷键水解，产物是Glc。

P338习题解答：

6

P375习题解答

2、∵Glucose+2NAD++2ADP+2Pi

→2H++2NADH+2H2O+2ATP+2丙酮酸

丙酮酸经GPT催化生成Ala

∴Glucose合成Ala的总平衡式为：

4：

补充1：

Glu在体内的物质代谢中有什么主要作用？

请举例说明

解：

Glu在生物体内具有非常主要的作用，主要有以下几点：

①组成蛋白质的必需成分，是由基因编码的二十种氨基酸之一。

②脑中积累过量的游离氨会导致休克死亡，在正常情况下游离氨可与Glu结合生成Gln，通过血液运到肝脏，再通过尿素循环生成尿素排出体外。

③嘧啶核苷酸生物合成的第一步，就是由Gln和CO2、ATP在氨甲酰磷酸合成酶催化下，生成氨甲酰磷酸，为嘧啶环的构成提供N3。

④Glu脱羧生成γ-氨基丁酸，对神经有抑制作用。

⑤Glu在GDH催化下脱氨和氨的同化作用，在氨基酸的相互转化起重要作用。

⑥在氨基酸的分解代谢中，Pro、Arg、Gln和His都是先转化为Glu，再脱氨生成α-酮戊二酸进一步分解。

Pro在体内的合成是由Glu环化而成。

补充2：

利用纯酶制剂和必需因子催化乙酰辅酶A和丙二酸单酰辅酶A合成软脂肪：

①供给有氚标记的乙酰辅酶A和无标记但过量的丙二酸单酰辅酶A，生成的软脂酸分子中有多少氚标记？

②如果用氚标记过量的丙二酸单酰辅酶A，但不标记乙酰辅酶A，生成的软脂酸分子中有多少氚标记？

③供给有14C标记的乙酰辅酶A和无标记但过量的丙二酸单酰辅酶A，生成的软脂酸分子中被标记的C原子是C1还是C16或C15？

为什么？

解：

①有3个氚原子。

因为每个乙酰辅酶A分子中，有3个氢原子被标记，在足够量的丙二酸单酰辅酶A存在时，除脂肪酸合成的第一步外，不再有乙酰辅酶A参与，所以只有3个氚原子。

②有14个。

因为丙二酸单酰辅酶A分子中有2个氢被标记，合成软脂酸需要7分子的丙二酸单酰辅酶A分子，所以有14个氚标记。

③在脂酸合成中，除第一步是乙酰-ACP和丙二酸单酰-ACP缩合外，以后的循环合成步骤中，在足量的丙二酸单酰辅酶A存在下，乙酰辅酶A不再参与脂肪酸的合成，所以以14C标记的乙酰辅酶A和无标记但过量的丙二酸单酰辅酶A，合成的软脂酸分子中14C标记出现在C16和C15。