中国药科大学卓工班微生物复习资料.docx

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中国药科大学卓工班微生物复习资料

绪论

主要人物事件

巴斯德推翻生命的自然发生说，建立了胚种学说（1861年曲颈瓶实验）

初步发酵理论（厌氧发酵）

创立了巴氏消毒法

研究病原微生物，研制了炭疽菌苗、狂犬疫苗、鸡霍乱杆菌苗

柯赫（郭霍）建立了一系列微生物学研究方法：

固体培养基法、细菌染色法

分离病原菌：

结核杆菌、霍乱弧菌等

确定病原菌的科赫法则

琴纳首创用牛痘预防天花，为预防医学开辟了广阔途径，免疫学进入实验阶段

免疫

1、抗原是能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，并能与相应免疫产物（抗体或致敏淋巴细胞）发生特异性反应的物质（免疫抗原性最重要的因素：

异物性）

2、抗原表位抗原分子中决定抗原特异性的基本结构或化学基团成为抗原表位，是特异性淋巴细胞受体及抗体特异性结合的基本单位，亦称抗原决定簇。

3、Ig和Ab的区别Ig是化学结构与Ab相似的球蛋白，不一定具有抗体活性。

4、IgG图

VH和VL是抗原结合部位

CL和CH带有同种异型的遗传标志

IgG的CH2和IgM的CH3是补体结合部位，参与补体激活；IgG通过CH2通过胎盘

CH3有免疫细胞的Fc受体结合部位

IgE通过Fc段与肥大细胞结合，参与Ⅰ型超敏反应

5、经典补体激活途径

6、主要组织相容性抗原（MHC抗原）

主要组织相容性复合体MHC

（人类：

HLA复合体）

编

码

主要组织相容性抗原MHC分子（抗原）

（人类：

HLA抗原）

7、MHC限制性T细胞与抗原提呈细胞、靶细胞相互作用中，在识别抗原肽的同时，还需识别与抗原肽结合的HLA分子。

这一现象称MHC限制性。

（注意T细胞活化时的双信号学说中运用到了MHC限制性）

8、中枢免疫器官胸腺（T细胞）骨髓（B细胞）

9、抗原递呈细胞（APC）能够加工、处理抗原，并将抗原肽呈递个=给抗原特异性T淋巴细胞的一类免疫细胞。

10、体液免疫应答的一般规律

a、Ag进入机体后刺激B细胞增殖分化为浆细胞，分泌Ig进入体液；

b、初次免疫应答，先产生IgM，随后才出现IgG，Ab总量在血清中的滴度低，与Ag亲和力低，维持时间短；

c、再次免疫应答，产生的特异性Ab主要是IgG，潜伏期短且滴度高，持续时间长与Ag亲和力较高；（直接刺激Bm）

d、实际应用：

免疫接种时可采用多次接种加强免疫。

11、超敏反应

类型全称出现时间免疫机制疾病

Ⅰ型速发型2—30minIgE抗体常见的过敏反应（青霉素）

Ⅱ型细胞毒型5—8hrIgG、IgM和补体新生儿溶血

12、人工获得性免疫

细菌

1、细菌的结构

1.细胞壁；2.细胞膜；3.核质体；4.间体；5.贮藏物；6.细胞质；7.芽孢；8.鞭毛；9.菌毛10.性菌毛；11.荚膜；12.粘液层

2、细胞壁

G+（S.aureus）

G-（E.coli）

双糖单体

一致（M-G）

四肽侧链

L-Ala

D-glu

L-Lys

D-Ala

L-Ala

D-glu

meso-DAP

D-Ala

交联方式

有肽桥（5Gly）

无肽桥，四肽侧链直接相连

结构

结构紧密，交联度大，三维立体结构

结构松散，交联度小，二维平面结构

3、细胞壁缺陷型细胞

自然界长期进化形成：

支原体

实验室形成：

a）自发缺壁突变：

L型细菌

b）人工方法去壁：

彻底：

原生质体（G+）

不完全：

圆球体（G-）

4、细胞的特殊结构

荚膜某些细菌在生活过程中，向细胞壁外分泌一层疏松、透明、粘液状的物质，称为糖被（书中即为荚膜定义）。

若具有一定外形，相对稳定的附于细胞壁外，厚度≥0.2μm，称为荚膜。

功能：

a抵抗不利环境（干旱、宿主细胞吞噬、溶菌酶等），保护细菌，提高致病性；b储藏养料；c帮助附着;d堆积代谢废物

芽胞某些细菌，特别是G+杆菌，生长到稳定期后，在细胞内形成一个圆形或椭圆形的、由多层壁膜包围、对不良环境具有抗性的特殊结构称为芽胞，又称内生孢子功能：

抵御不良环境

鞭毛细菌从细胞内向外伸出的一根或数根，细长、波状弯曲的丝状物，是运动器官。

功能：

运动器官鉴定方法：

a电镜直接观察b鞭毛染色法c悬滴法暗视野观察运动情况d半固体穿刺培养e观察有无扩散菌落外形（形态、边缘等）f血清学反应

菌毛某些菌体表面遍布的比鞭毛更细、短、直、硬、多的丝状物叫菌毛。

功能：

a普通菌毛：

与细菌致病性有关b性菌毛：

比普通菌毛粗、长、少，仅1~4根，与遗传物质转移有关

5、拉丁双名法

Escherichiacoli（Migula）CastellanietChalmers1919

大肠埃希氏菌E.coil

StaphylococcusaureusRosenbach1884

金黄色葡萄球菌S.aureus

Bacillussubtilis（Ehrenberg）Cohn1872

枯草芽胞杆菌B.subtilis

6、细菌生长条件（对比真菌和放线菌）

细菌

充足的营养物质

适宜的酸碱度：

大多数pH6.8-7.4

适宜的温度：

25-37℃

气体条件：

需氧、微需氧、耐氧、专性厌氧、兼性厌氧

真菌

酸甜氧温湿慢

放线菌

需氧菌

pH=7.0~7.6（略偏碱）

28~30oC

对无机盐要求较高

慢：

3~7天

7、显微镜结构

8、革兰氏染色

过程：

a涂片、干燥、固定b结晶紫初染c碘液媒染d乙醇脱色e沙黄复染

9、IMViC试验

●I——吲哚试验

●M——甲基红试验

●V——VP试验

●C——枸橼酸盐利用试验

大肠杆菌——++

产气杆菌——++

9、放线菌（链球菌形态图）

10、细菌生长曲线

实践指导意义

●1、使用合适的菌种、菌龄、接种量和培养条件能尽量缩短延迟期，缩短生产周期

●2、灭菌工序应控制在迟缓期，以保证制剂质量及减少热原质污染

●3、对数期细菌广泛用作生产种子和科研材料

●4、在稳定期采取补加营养物质、移去代谢产物等措施延长该期，以收获更多次级代谢产物

●5、芽胞于对数生长期末期开始形成、稳定期大量形成、衰亡期释放，有利于菌种保藏

10、细菌繁殖方式（对比）

微生物

繁殖方式

生活方式

备注

细菌

无性二分裂

腐生/寄生

螺旋体

无性二分裂

腐生/寄生

运动器官-轴丝

立克次氏体

无性二分裂

严格寄生

传播媒介为节肢动物

衣原体

无性二分裂

严格寄生

独特的发育周期（原体、始体）

支原体

无性二分裂（有出芽、分支）

腐生/寄生

无生命培养基中生长的最小的原核微生物

放线菌

无性孢子/菌丝断裂

病毒

复制

寄生

真菌

有性/无性

腐生/寄生

酵母菌最常见的是芽殖，霉菌主要无性孢子。

特殊结构为菌丝，分为有隔菌丝和无隔菌丝

11、培养基

基础培养基，营养培养基，选择培养基，鉴别培养基，厌氧培养基（望文生义的选择就好）

微生物的遗传和变异

1、质粒指独立于染色体外并能自主复制的遗传物质

2、基因突变的诱变机制

5-Bu是T的类似物，HNo2能引起脱氨使A变H（次黄嘌呤），C变U

3、转化受体菌直接从周围环境中吸收供体菌游离的DNA片段从而获得了供体菌部分遗传性状的过程。

4、转导以噬菌体为媒介，将供体菌的遗传物质转移入受体菌，通过交换重组而使受体菌获得供体菌的部分遗传性状的过程。

5、接合供体菌和受体菌通过性菌毛直接接触，遗传物质自供体菌转移入受体菌，使后者获得前者的部分遗传性状的过程。

6、接合的机制

F++F-→F++F+

Hfr+F-→Hfr+F-大多数，高频重组

↘Hfr+Hfr极少数

F’+F-→F’+F’

真菌

1、定义真菌是一类不含叶绿素，无根、茎、叶分化，具有细胞壁的真核细胞型微生物

2、结构、酵母菌、霉菌的特点见上表

病毒

1、结构图

2、结构特点

a）核心（core）：

病毒的核酸

b）衣壳（capsid）：

包围病毒核酸核心的蛋白质外壳

c）衣壳粒（capsomer）：

衣壳的组成单位，一条或多条多肽链

d）核衣壳（nucleocapsid）：

衣壳+核心

e）包膜（envelope）：

包在核衣壳外的囊膜，由脂质和蛋白质组成，不同病毒松紧度不一样

f）刺突（spike）：

病毒表面向外突出的钉状突起，是特异性糖蛋白，往往是病毒的表面抗原

3、病毒的增殖

亲代±DNA→早期转录→mRNA→早期翻译→早期Pr（功能蛋白）

↓半保留复制↙

子代±DNA→晚期转录→mRNA→晚期翻译→晚期Pr（结构蛋白）

↓装配成熟↙

子代病毒粒子

4、干扰素

干扰素是受到病毒感染或其他干扰素诱生剂的作用，由细胞分泌的，能抑制病毒增殖，并具有多种生物学活性的糖蛋白（加粗的是特点共四个）

5、常见病毒

病毒

表面抗原

类型

疾病

流感病毒

NA,HA

RNA

流感

HBV（乙肝病毒）

HBsAg

DNA

乙肝

HIV

gp120，gp41

RNA

艾滋病

6、乙肝病毒颗粒图

抗生素

1、正常菌群人体的体表以及与外界相通的腔道中存在的微生物群，在人体免疫功能正常时对宿主无害，有些还对人有利，这些微生物称为正常菌群

2、菌群失调在微生态环境中正常微生物群的种群发生了定量或定性的异常变化

3、MIC最低抑菌浓度

4、MBC最低杀菌浓度

5、抗药性微生物或肿瘤细胞多次与药物接触放上敏感性降低的现象，是微生物对药物所具有的相对抗性。

6、简述细菌抗药性产生的遗传学机制和生化机制

抗药性产生的遗传学机制a自发突变+药物选择b细胞间抗药性的基因转移

抗药性产生的生物化学机制a产生使抗生素结构改变的酶b作用靶位改变c细胞通透性改变

7、什么是抗生素的效价？

简述其单位及常用的测定方法。

效价，指同一条件下比较抗生素的检品和标准品的抗菌活性，从而得出检品的效价。

单位，u，是衡量抗生素有效成分的具体尺度。

重量单位（生物活性部分重量）：

1µg≌1U

类似重量单位（特定抗生素盐纯品重量）1µg≌1U

重量折算单位（原始活性单位相当的纯品重量为1U）ex:

Pen0.5988µg≌1U,1mg≌1670U

特定单位（特定样品的某一重量为一定单位）Ex:

一批特定杆菌肽1mg≌55U

测定方法管碟法

8、管碟法

管：

牛津杯

碟：

培养基

判断指标：

抑菌圈大小

测定方法：

二剂量法

微生物的控制

1、能列举常用的热力消毒法及其应用

烧灼法：

对接种环和试管口的灭菌

巴氏消毒：

牛奶、酒类的消毒

高压蒸汽灭菌法：

培养基、药品的灭菌

2、对于特殊药物如何进行无菌检查？

特殊药品：

先处理后作检查

前处理

油类药物：

吐温培养基（Tween80）

抗菌药物或含防腐剂药物

加入灭活剂：

如青霉素酶

微孔滤膜法

稀释法：

将药物浓度稀释至MIC以下

离心沉淀法：

3000r/min离心30min，以底部浓缩菌液检验

敷料类、医用器具类：

无菌操作剪取或切段后浸没培养

3、非灭菌制剂的微生物限度检查

细菌总数测定：

30~300/板有效

真菌（酵母菌，霉菌）总数测定：

5~50/板有效

质控菌检查

活螨检查：

口服药及外用药均不得检出活螨

4、质控菌的类型

口服药不得检出大肠杆菌、沙门氏菌

外用药及眼科制剂不得检出铜绿假单胞菌、金葡菌

用于深部组织、创伤溃疡面的外用制剂不得检出破伤风梭菌

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PD能力有限，水平一般，希望各位同学斧正补充