临床血液学检验操作规程G.docx
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临床血液学检验操作规程G.docx
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临床血液学检验操作规程G
淄博万杰肿瘤医院检验科
临床血液学检验标准操作规程
文件编号
编制部门
检验科
发布日期
月28日年20049
实施日期
2004年10月8日
版本
2.0
数页
共X页
编制
张淑芳
核审
梁勇
批准
朱才义
件文号受控
文件修订稿
修订记录
修订版次
修订期日
页码
对应条款
修订内容
批准
2
1.血液一般检验
1.1适用范围
适用于检验科血液常规检验操作。
1.2基本操作规程
1.2.1血液标本采集
1.2.1.1末稍血标本采集:
采血部位:
成人以左手无名指为宜,婴幼儿通常自拇指或足跟两侧采血。
(1)轻轻按摩采血部位,使其自然充血。
用75%酒精棉球消毒局部皮肤,待干。
(2)紧捏刺血部位,用一次性无菌刺血针穿刺取血。
动作应迅速,深度约2~3mm,(3)稍加挤压,以血液能流出为宜。
用干棉球擦去第一滴血,按需要依次采血。
(4)采血完毕,用消毒干棉球压住伤口止血片刻。
(5)参考:
叶应妩等主编.《全国临床检验操作规程》(第二版).第1页..1997
1.2.1.1静脉血标本采集:
静脉血标本采集主要由申请检验科室的护士完成(参见相应操作规程)。
真空(负压)采血技术已经成为欧美国家血液采集技术标准,中华医学会检验医学分会鼓励在全国推广真空(负压)采血技术。
1.2.2血液常规检验
标本接收和标本采集
(1)血常规检验采用EDTA-K抗凝的静脉血或末梢血标本。
1)2血常规检验应尽量采用静脉血标本;对特殊患者(如新生儿、必须为治疗2)保留静脉血管的肿瘤患者等),可以采用末梢血标本。
检验人员在接收临床血常规检验标本时,应对送检标本和检验申请单进行3)认真核查,并对不合格标本和不合格检验申请单作相应处理。
基本操作步骤
(2)对检验申请单和标本管作对应编号;1)将血标本充分混匀;2)按照《COULTER-JT血细胞分析仪操作规程》上机检测、打印结果。
3)结果分析和报告(3)检验人员应参照血常规检验参考值指标和临床诊断审核检验结果。
如发现1)与临床诊断不符的检验结果,或有以下异常结果,应对标本进行复查:
A.血红蛋白低于100g/L或高于180g/L
99/L(新生儿例外)L或高于20×10B.白细胞低于3.0×10/99/10L××10/L或高于45080C.血小板低于D.白细胞分类比例异常,且与临床诊断不符
急诊血常规检验应在标本送达后半小时内发出检验报告。
2)
手工法血细胞分析1.2.3
3
1.2.3.1白细胞计数
取小试管一支,加白细胞稀释液0.38ml。
(1)用微量吸管准确吸取末稍血20ul,擦去管尖外部余血,将吸管插入试管中稀释
(2)液底部,轻轻将血放出,并吸取上层清液反复嗽洗吸管二次,最后用手摇动试管混合。
充池,静置2~3min,待白细胞下沉后,用低倍镜计数四角4个大方格内的白(3)细胞数。
6计算白细胞/L=4个大方格内的白细胞总数×50×10(4)参考值:
(5)
成人儿童新生儿参考:
叶应妩等主编.1.2.3.2白细胞分类计数
采血后推制厚薄适宜的血膜片,血膜应呈舌状,头、体、尾清晰可分。
(1)推好的血膜在空气中待干,
(2)变形缩小。
染色(3)1)瑞氏-姬姆萨法:
平置血膜片于染色架上,滴加染液血膜约1min后,滴加缓冲液染液充分混合,5~10min2)选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值(百分率)。
参考值(4)细胞类别中性嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞淋巴单核(参考《全国临床检验操作规程》
9~4×10/L
9~5×10/L
9~×10/L15
《全国临床检验操作规程》天气寒冷或潮湿时,5~10后用水冲去染液待干。
粒细胞杆状核分叶核
1%50%
0.5%
0%
细胞
20%
细胞
3%
第二版(
1L1L11L
21(第二版..1994~5应3℃保温促干以免细3~滴,使其迅速盖滴,轻轻摇动玻片或对准血片吹气,10个白细胞,成~5%~70%~5%~1%~40%~8%5~1997
1.2.3.3血小板计数
取清洁试管,加入血小板(草酸铵法)稀释液0.38ml。
(1)准确吸取毛细管血20ul,擦去管尖附着血液,置于血小板稀释液内,立即充分
(2)混匀,待完全溶血后,再次混匀1min。
取上述均匀的血小板悬液1滴,注入血球计数板的计数池内。
(3)静置10~15min,使血小板下沉。
(4)9用高倍镜计数中央1个大方格(400个小格)内血小板,乘以0.2×10即为每(5)(在相差显微镜或暗视野显微镜下进行血小板计数,效果升血液内血小板数。
.
4
更佳)
9参考值:
100~300×10/L
(6)(参考《全国临床检验操作规程》第二版.第页..)(1997)22
1.2.3.4嗜酸性粒细胞直接计数
操作
(1)1)小试管中加Hinkelmann液或乙醇-伊红稀释液0.38ml。
2)常法取末稍20ul,加入管内混匀,待红细胞溶解后两侧充池。
3)静置3~5min,用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸
性粒细胞数。
计算与报告
(2)1010个大方格内嗜酸性粒细胞数×20×参考值:
(3)6/L(50~300/×10L)50~300(参考《全国临床检验操作规程》第二版(1.2.3.5网织红细胞计数
基本操作
(1)1)于小管中滴加1滴1%的煌焦油蓝生理盐水溶液。
2)加入末稍血2滴于上述试管中混匀。
3)静置15~20min后,取用1滴制成薄血片。
4)油镜下检查1000个红细胞中网积红细胞数,以百分率或绝对值报告。
参考值:
(2)成人新生儿(参考《全国临床检验操作规程》1.2.3.6嗜碱性点彩红细胞计数
基本操作
(1)1)按常法制成薄血片,自然干燥后,用甲醇固定2)碱性亚甲基蓝染液1~2min,水洗、待干。
3)油镜下检查1000个红细胞中嗜碱性点彩红细胞数,以百分率报告。
6参考值:
<0.01%(<100/10红细胞)
(2)(参考《全国临床检验操作规程》
0.5%~1.5%
3.0%~6.0%
第二版(第二版(
=嗜酸性粒细L119919914~153mi1991)
1.2.3.7异常红细胞检查
大小异常
(1)正常红细胞大小一致,直径为6~9um,在各种贫血时,红细胞可出现大小不一,凡直径>10um者称大细胞,>15um者称巨红细胞,常见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾病等;直径<6um者称小细胞,多见于缺铁性贫血病。
形态异常
(2)1)球形红细胞
,因而红细胞呈小圆球um2.6,厚度增加,通常>um6红细胞直径通常<
5
形,细胞中心区血红蛋白含量较正常红细胞多,常见于下列疾病:
A.遗传性球形红细胞增多症;
B.自身免疫性溶血性贫血;
C.异常血红蛋白病(HbS及HbC病等)
2)椭圆形红细胞
红细胞呈椭圆形,横径缩短,长径增大,有时可呈畸形。
正常人血液中也可见到,但最多不超过15%。
这种红细胞增多见于:
A.遗传性椭圆形红细胞增多症,一般要高于25%~50%才有诊断价值。
B.大细胞性贫血,可达到25%。
C.其他各类贫血都可有不同程度的增多。
3)靶形红细胞
比正常红细胞扁薄,中心有少许血红蛋白,部分可与周围的血红蛋白连接,边缘部染色深,故呈靶状。
主要见于:
A.地中海贫血;
B.严重缺铁性贫血;
C.一些血红蛋白病(血红蛋白C、D、E、S病);
D.肝病、脾切除后阻塞性黄疸等。
4)镰形红细胞
细胞狭长似镰刀,也可呈麦粒状或冬青叶样。
主要见于遗传性镰形红细胞增多症。
5)口形红细胞
红细胞淡染区呈裂口状狭孔。
正常<4%。
增高见于:
A.口形红细胞增多症;
B.急性乙醇中毒。
6)棘形红细胞
棘形红细胞是一种带刺状的红细胞,刺呈针刺状或尖刺状,见于:
A.棘红细胞增多症(遗传性血浆β-脂蛋白缺乏症),可高达70%~80%。
B.严厉重肝病或制片不当。
7)皱缩红细胞
红细胞表面有圆形棘样突起,可见于干燥太慢的血片,也可见一于急性铅中毒,尿中毒症等病人的血片上。
8)锯齿细胞
也称刺毛细胞,形态和皱缩细胞相似。
主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙酮酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。
9)裂片细胞
指红细胞碎片,包括盔形红细胞等,多见于DIC、微血管病性溶血性贫血和心原溶血性贫血等红细胞破碎综合征。
其他也见于化学中毒、肾功能不全、血栓性血小板减少性紫癜等。
染色异常(3)1)着色过浅
红细胞中心淡染区扩大,多见于缺铁性贫血、地中海贫血及其他血红蛋白病。
着色过深2).
6
中心淡染区不见,着色过深,多见于先天性溶血性贫血及大细胞性贫血患者。
3)嗜多色性红细胞
红细胞染成灰蓝色、灰红色、淡灰色,较正常红细胞稍大。
这是一种尚未完全成熟的红细胞,多染性物质是核糖体,随着细胞的成熟而逐渐消失,主要见增生性贫血。
结构异常(4)1)嗜碱性点彩红细胞
用亚甲基蓝染色,成熟红细胞胞浆内有散在的深蓝色嗜碱性颗粒,外周血中有点彩红细胞增多,表示贫血时骨髓再生旺盛或有紊乱现象。
某些重金属中毒时,可大量出现。
2)卡波环
成熟红细胞浆内有染成紫红色的细线状环,呈圆形或8字形,可能是残留核模所致,见于恶性贫血、溶血性贫血、铅中毒等。
3)豪-周小体的核碎块
成熟红细胞中含有紫红色圆形小体,大小不等,数量不一,可能是残留的核染色质微粒。
见于增生性贫血、脾切除后、巨幼细胞性贫血、恶性贫血等。
4)有核红细胞
正常人血片中不见,溶血性贫血、急慢性白细胞病、红白血病、髓外造血及严厉重缺氧等常见到。
(参考《全国临床检验操作规程》第二版.第页..))17~18(1997
1.2.3.8异常白细胞形态检查
在外周血象中,除了各类白血病幼稚细胞外,通常能见到一些细胞形态上的异常变化。
中性粒细胞
(1)1)核象变化:
反映中性粒细胞的成熟程度,正常血象中有少量杆状核细胞出现,它与分叶核细胞之间的比值约占1:
13。
A.核左移:
是指杆状核细胞增多,常见于感染.如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核左移,多见于类白细胞病反应或白血病。
再生性左移——伴白细胞总数增高的核左移,常见于急性化脓性感染,如大叶性肺炎等。
退行性左移——白细胞总数不增高或减低的核左移,常见于严重感染,机体低抗力低下时,如伤寒伴感染中毒性休克的败血症等。
B.核右移:
是指不仅分叶核粒细胞增多,且分叶过多、常见4叶、5叶(正常时多分3叶),这是造血功能衰退或
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