骨髓细胞学检查本.ppt
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骨髓细胞学检查本.ppt
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第三节骨髓细胞学检查,内容Contents,主要内容,骨髓细胞学检查:
骨髓细胞学检查的临床意义骨髓和外周血细胞化学染色常见血液病的血液学特征:
缺铁性贫血1、贫血巨幼细胞性贫血溶血性贫血再生障碍性贫血,CompanyLogo,主要内容,常见血液病的血液学特征:
2、白血病:
骨髓细胞形态学分型(FAB分型)MMICM分型免疫表型分析(免疫学)I染色体分析(细胞遗传学)C基因诊断(分子生物学)M3、原发性血小板减少性紫癜(ITP)4、骨髓瘤(MM),CompanyLogo,病例:
患者:
男性,41岁,左上腹不适,乏力,消瘦3月余而入院体检:
T37.3C,R21次/分,P68次/分,Bp14/8kPa肝肋下1cm,脾肋下3cm;下一步做什么检查?
CompanyLogo,病例,实验室检查:
1、血液常规检验Hb:
150g/LWBC:
250109/LPLT:
559109/L分类:
原始粒细胞1%早幼粒细胞4%中、晚幼粒细胞41%嗜酸性粒细胞8%嗜碱性粒细胞6%问题在哪里?
实验诊断学laboratory,实验诊断学laboratory,实验诊断学laboratory,病例,2、骨髓细胞检查骨髓极度增生以粒细胞增生为主外周血分类:
原始粒细胞2%1%早幼粒细胞4%4%中晚幼粒细胞46%41%红细胞系统6%中晚幼红为主形态正常,病例,细胞化学染色:
中性粒细胞碱性磷酸酶(ALP)阴性细胞遗传学检验:
Ph染色体阳性分子生物学(基因)检查:
BCR/ABL1,如何分析?
如何诊断?
原始及幼稚细胞,病例分析,最后的诊断,慢性粒细胞性白血病(急性期),普通光学显微镜,CompanyLogo,白血病细胞,淋巴细胞白血病细胞,骨髓细胞形态学骨髓细胞形态学检验细胞化学染色,一种简单、历史悠久的诊断手段,破骨细胞,骨髓细胞,1,2,3,3,3,4,1-原粒2-早幼粒3-中幼粒4-晚幼粒,骨髓报告,CompanyLogo,骨髓细胞形态学检查,二、骨髓细胞学检查的临床意义,临床应用,1适应症血细胞减少或增多,外周血出现幼稚细胞;不明原因的骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜;不明原因的发热,肝、脾、淋巴结肿大;血液系统疾病化疗后的定期复查及疗效观察;其他:
骨髓活检、造血干细胞培养、染色体分析、微生物培养及寄生虫检查,CompanyLogo,临床应用,2、禁忌症:
出血倾向、血友病、晚期妊娠,CompanyLogo,骨髓标本的采集,骨髓取材的部位和方法部位:
胸骨、棘突、髂骨等处方法:
多用穿刺法吸取,穿刺部位的选择,部位:
胸骨,髂后上棘,髂前上棘,,胸骨穿刺,髂后上棘穿刺,标本采集,骨穿针,骨髓液的采集,骨髓量:
0.2mL抗凝:
EDTA-K2骨髓涂片3-5张迅速挥干,CompanyLogo,1、骨髓穿刺术,常规消毒,局部麻醉,骨髓穿刺术,局部麻醉,骨髓穿刺术,进骨髓穿刺针,骨髓穿刺术,抽吸骨髓液,制备骨髓片,骨髓片制备情况,涂片制备良好,涂片制备良好,涂片制备不佳,涂片制备差,2、骨髓涂片的显微镜检查,1、低倍镜检查:
(1)观察骨髓涂片质量:
取材:
骨髓小粒、脂肪小滴。
制片:
厚薄,头、体、尾分布染色:
细胞着色情况,
(2)骨髓增生程度分级增生程度有核细胞:
RBC常见原因平均增生极度活跃1:
1各型白血病增生明显活跃1:
10各型白血病、增生性贫血增生活跃1:
20正常骨髓像、某些贫血增生减低1:
50再障(慢性型)、粒缺增生极度减低1:
200再障(急性型),骨髓细胞形态学检查,骨髓增生程度分级(高倍镜),(3)巨核细胞计数,巨核细胞的数量:
低倍镜计数,油镜分类;骨髓涂片(1.5cm3.0cm血膜上),异常细胞,各类转移癌,2、油镜检查:
1)有核细胞分类:
计数200-500个有核细胞(增生极度活跃100个增生明显活跃-500个)计算各系统各阶段细胞百分率,选择合适部位,CompanyLogo,2、油镜检查:
(2)计数粒红比例(GE)(3)观察各系细胞形态有无异常(4)观察有无其他特殊细胞及寄生虫。
CompanyLogo,细胞形态观察,粒系红系单核淋巴浆细胞、巨核细胞其他细胞的数量。
骨髓小粒的成份。
有无寄生虫及其他异常细胞。
全片复查,增生情况,各阶段细胞所占的比例、大小、形态、核染色质、核仁、核形、胞质量多与少、浆、颗粒,CompanyLogo,正常骨髓象报告:
1)增生活跃2)粒红比值正常(ME24:
1)3)粒系增生良好:
a.占有核细胞的4060%;b.各阶段细胞比例适当原粒2%,早幼粒5%,中晚幼粒各15%,杆状核百分率分叶核,嗜酸性粒细胞5%,嗜碱性粒细胞1%;c.细胞形态无明显异常。
骨髓细胞学检查,4)红系增生良好:
a.占有核细胞的1520%左右b.各阶段比例适当;原红细胞1%,早幼红细胞5%,以中、晚幼红细胞为主,各占10%;c形态无明显异常或成熟红细胞形态大致正常。
骨髓细胞学检查,5)淋巴细胞系统占2025%;(主要是成熟细胞)6)单核细胞系统4%(主要是成熟细胞)7)浆细胞系统2%(主要是成熟细胞),骨髓细胞学检查,8)巨核细胞a.数量/全片:
735个(1.5cm3.0cm)b.各阶段情况正常;原巨核细胞05%幼巨核细胞010%,颗粒巨核细胞1050%,产血小板巨核细胞2070%,裸核型030%,血小板易见、成堆状存在,形态正常。
骨髓细胞学检查,8)其他细胞:
组织细胞、内皮细胞、肥大细胞、网状细胞及组织嗜碱细胞等欧间,未见异常。
9)无特殊细胞及寄生虫。
骨髓细胞学检查,骨髓报告的诊断价值肯定性、支持性、排除性、形态学描写疗效判断,骨髓象检查的注意事项,正确认识细胞检查者必须反复实践,积累经验,需经较长时间的锻炼才能熟练掌握。
不要根据一两个特点就做出肯定或否定的判断。
宁可看得仔细而少看,不可贪多而马虎。
(四)骨髓细胞形态学的临床意义,血液细胞,红细胞形态的诊断价值,红细胞形态的诊断价值,红细胞形态的诊断价值,CompanyLogo,粒细胞系统异常的临床意义,淋巴细胞的异常(白血病),红白血病,CompanyLogo,疟原虫微丝蚴,利什曼原虫弓形体虫,小结,骨髓细胞形态学的诊断价值肯定性诊断支持性诊断、排除性诊断、形态学描述疗效判断,细胞形态主观辨别?
三、常用的血细胞化学染色,定义:
血细胞化学染色是以形态学为基础,根据化学反应原理,将骨髓片染色,观察单个细胞内在的生化特性,了解它们的代谢活动,生理功能和病理变化.鉴别各种类型血液细胞,本节主要内容,常见的细胞化学染色及临床应用(POX、ALP、ACP、PAS、SE、NSE染色),细胞化学染色方法,酶脂类糖原铁,
(一)过氧化物酶染色(Peroxidase,POX),原理H2O2细胞内POXO联苯胺O联苯胺蓝+亚硝基氰化钠暗蓝色颗粒(定位于胞浆内)计数100个原始细胞报告百分率结果粒系:
强阳性单核系:
弱阳性淋巴系:
阴性临床意义鉴别急粒和急淋,过氧化物酶(POX),各型白血病的MPO反应,粒系白血病细胞淋巴细胞白血病细胞,
(二)酯酶染色EsteraseStaining,方法偶氮偶联法1特异性酯酶染色萘酚AS-D氯乙酸酯酶染色(SpecificEsteraseStaining)(NAS-DCEorCAE)(粒细胞酯酶)(单核细胞酯酶)2.非特异性酯酶染色Non-SpecificEsteraseStaining),-乙酸萘酚酯酶染色(-NAE),-丁酸萘酚酯酶染色(a-NBE),分类,氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色naphytholAS-Dchloroacetateesterase,AS-DCAE,细胞化学染色检验,临床评价,急性白血病的鉴别:
1.急性粒白血病M31+2+2+3+2.急性单核细胞白血病原、幼单核细胞-阴性3.急性淋巴细胞白血病原、幼淋细胞-阴性,细胞化学染色检验,-丁酸萘酚酯酶染色结果(单核细胞酯酶),骨髓细胞学检查,临床评价(单核细胞白血病),-乙酸萘酚酯酶(-NAE)染色结果(非特异性酯酶),细胞化学染色检验,临床评价,鉴别白血病类型;同时必须做NaF抑制试验,细胞化学染色检验,2张相同标本同时固定后,配制2缸孵育液,其中一缸内加入NaF(抑制酶活性),然后将2张标本分别放入2个缸内各自染色。
最后分别进行积分,求出抑制率。
(50),氟化钠抑制试验(NaFInhibittest),NaF抑制率,抑制前阳性率或积分,抑制后阳性率或积分,抑制前阳性率或积分,100,-,细胞化学染色检验,结果,急性粒细胞白血病-原粒细胞弱阳性,不被NaF抑制急性单核细胞白血病-原单核细胞阳性,被NaF抑制;,细胞化学染色检验,非特异性酯酶+NaF,一种特异性酯酶染色加一种特异性酯酶染色临床意义:
粒、单核细胞白血病,酯酶双染,酯酶双染(粒单细胞白血病),两种酯酶在同一张片子上染色,细胞化学染色检验,(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色(alkalinephosphataseALP),报告方式:
百分率:
计数100个成熟中性粒细胞,计算其阳性率。
积分值:
计数100个成熟粒细胞,按反应强度作出分级,将其百分率乘以级数然后相加。
参考值正常:
百分率10-40%,积分7-51临床意义1.区别CML、类白血病反应积分为0;积分200分2.AA时PNH3.化脓性感染病毒性感染时4、真性红细胞增多症继发性红细胞增多症N,类白血病反应慢粒白血病反应,慢性粒细胞性白血病ALPChronicmyeloidleukemia阴性,(四)糖原染色(过碘酸-雪夫反应)(periodicacidSchiff,PAS),各系细胞糖原结果判断,临床评价,阳性或强阳性:
红细胞系统疾病:
(幼红细胞)红血病、红白血病、MDS淋巴细胞系统疾病:
急淋(原淋、幼淋巴细胞)单核细胞系统疾病:
急单(原单、幼单核细胞),红血病、红白血病(原始红细胞),淋巴细胞判断,(四)、酸性磷酸酶(acidphoshataseACP),原理:
硫化铅和偶带偶联法结果:
胞质内出现棕黑色颗粒者为阳性(硫化铅)胞质内出现亮红色颗粒者为阳性(偶氮偶联法),临床意义鉴别多毛细胞白血病,不被L-酒石酸所抑制,鉴别T细胞白血病与B细胞白血病阳性阴性鉴别Gaucher病与Nienann-Pick病阳性阴性,Gaucher病Nienann-Pick病,细胞形态和血液病,细胞形态细胞化学染色,鉴别血液病,本节主要内容,常见的细胞化学染色及临床应用(POX、ALP、ACP、PAS、SE、NSE染色),主要内容,1、骨髓细胞学检查:
骨髓细胞学检查的临床意义2、骨髓和外周血-细胞化学染色,CompanyLogo,常见血液病的血液学特征,缺铁性贫血1、贫血巨幼细胞性贫血溶血性贫血再生障碍性贫血2、白血病:
骨髓细胞形态学分型(FAB分型)M(MICM分型)免疫表型分析(免疫学)I染色体分析(细胞遗传学)C基因诊断(分子生物学)M3、原发性血小板减少性紫癜(ITP)4、骨髓瘤(MM),CompanyLogo,参考资料,1.现代血细胞学图谱王淑娟王建中吴振茹主编人民卫生出版社2001.92.临床血液学检验胡翊群主编中国医药科技出版社2004.83.血液肿瘤骨髓诊断图谱熊树民主编上海科学技术出版社2003.64.白血病MICM分型诊断熊树民主编人民军医出版社2002.65.临床血液学图谱A.VictorHoffbrandJihnE.Pettit著主译任汉云北京大学医学出版社出版20136.牛津临床血液病手册主译黄晓军人民卫生出版社2006.37.实验诊断学彩色图谱张丽霞陈金宝主编上海科学技术出版社20028.临床血液细胞学图谱与应用熊树民余润田主编上海交通大学出版社2009,Thank
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- 骨髓 细胞学 检查