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酿酒分析实验指导
实验注意事项
实验课是提高教学质量的重要环节,通过实验巩固理论知识,培养独立工作能力,为了保证实验顺利进行,实验前应注意以下几点:
1每次实验前必须详细预习实验讲义,明确实验目的、原理方法及实验步骤,并在记录本上拟出简单的实验原理、使用方法及操作时的注意事项。
2实验时应严格按照实验步骤及试剂用量进行操作,不能任意变更。
不熟悉的仪器设备,应先请教老师后再使用。
切勿随意乱动。
3实验时如有问题发生,应首先用自己学过的知识,独立思考加以解决,努力培养独立分析问题、解决问题的能力。
如自己不能解决,可与指导老师共同讨论研究,提出解决问题的方法。
4实验进行时,必须把随时观察到的现象和实验数据如实地记录在记录本上,不得记在其他纸上,要养成良好的作原始记录的习惯。
5实验中所有的玻璃仪器及其他器皿,应洗涤干净。
桌面、地面要保持清洁。
实验完毕后,所有仪器设备应恢复原状。
6必须遵守实验室的规则:
1)室内不得高声谈笑,必须保持安静的实验环境。
2)爱护仪器,不浪费药品、节省水电。
遵守实验室的安全措施。
3)公用仪器及试剂瓶,不要移动原有位置。
注意瓶塞切勿盖错,以免污染试剂。
用毕后立即放回原处。
对于有害药品应按实验室规定取用。
4)滤纸、火柴棒、碎玻璃等投入废品缸,切勿丢入水池,以保证下水道畅通。
5)所用仪器如有损坏,应自行登记并向指导老师报告。
6)保持实验室的整齐清洁,个人所带与实验无关的东西,如书包等物要放在指定地方,不得乱放在实验桌上。
7)最后一组实验人员,离开实验室时,应检查水电、门、窗等是否关闭,以保证实验室的安全。
河北科技师范学院
二零零七年三月
实验一、葡萄酒酒度的测定
1、原理
以蒸馏法去除样品中不挥发性物质,用酒精计测得酒精体积百分数。
查表加以温度校正,求得20℃时乙醇的体积百分数(%,V/V),即酒精度。
2、仪器
酒精计(分度值为0.1度)
全玻璃蒸馏器:
1000ml
100ml容量瓶
100ml量筒
3、试样的制备
①用一洁净、干燥的100ml容量瓶准确量取100ml样品于蒸馏瓶中。
用50ml水分三次冲洗容量瓶,洗液并入蒸馏瓶中,再加几颗玻璃珠。
②连接冷凝器,以取样用的原容量瓶作接收器(外加冰浴)。
开启冷却水,缓慢加热蒸馏。
③收集馏出液接近刻度,取下容量瓶,盖塞。
于20℃水浴中保温30min,补加水至刻度,混匀,备用。
4、分析步骤
①将制得的试样倒入洁净、干燥的100ml量简中,静置数分钟,待其中气泡消失;
②轻轻放入洗净、干燥的酒精计,使其不得接触量筒壁,同时插入温度计,平衡5min;
③水平观测,读取与弯月面相切处的刻度示值,同时记录温度。
根据测得的酒精计示值和温度,查表,换算成20℃时酒精度。
所得结果表示至一位小数。
实验二、葡萄酒总浸出物的测定
一、原理
用密度瓶发测定样品或蒸出酒精后的样品密度,根据密度值查表,求出总浸出物的含量。
二、仪器与试剂
瓷蒸发皿:
200ml附温度计密度瓶
高精度恒温水浴:
20.0±0.1℃100ml容量瓶
三、测定步骤
1)试样的制备
用100ml容量瓶量取100ml20℃样品,倒入100ml的瓷蒸发皿中;于80℃水浴上蒸发至约原来体积的1/3,冷却;将残液小心移入原100ml容量瓶中,用水多次荡洗蒸发皿,洗液并入容量瓶中,于20℃定容至刻度。
2)密度瓶质量的测定
将密度瓶(包括附温度计和侧孔罩)彻底洗净(用蒸馏水漂洗);干燥(依次用乙醇、乙醚洗涤并吹干)。
然后带温度计和侧孔罩称重。
重复干燥和称重,直至恒重,得出密度瓶的质量(m)。
3)蒸馏水质量的测定
取下密度瓶上的温度计,将新煮沸30min后冷却至15℃左右的蒸馏水注满密度瓶,插上温度计,瓶中不得有气泡。
将密度瓶浸入(20.0±0.1)℃的恒温水浴中,待内容物温度达20℃并保持10min后。
用滤纸吸去侧管溢出的液体,使侧管中的液面与侧管管口齐平,立即盖好侧孔帽;取出密度瓶,迅速擦干瓶壁上的水,立即称重。
在同样条件下做平行试验,求出平均值,作为密度瓶加蒸馏水的质量(m1)。
4)试样质量的测定
用制备好的试样将密度瓶冲洗2~3次,然后注满密度瓶按3的操作方法操作,得出试样加密度瓶的质量(m2)。
四、计算
脱醇样品20℃的密度ρ1,以ρ1×1.0018的值,查表求出总浸出物的含量JZ(g/L)
实验三、直接滴定法测定总糖或还原糖
一、实验原理:
将斐林试剂A、B液混合后,生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,沉淀很快与酒石酸钾钠起反应,生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。
这种络合物被葡萄糖还原,生成红色的氧化亚铜沉淀。
当达到终点时,稍微过量的还原糖立即把次甲基蓝指示剂还原,此时溶液由蓝色变为无色,显示出氧化亚铜的红色指示定终点。
用含糖样品溶液滴定已标定的斐林试剂A、B液,就可以计算出样品中还原糖或总糖的含量。
二、仪器及试剂:
1、仪器:
调温电炉,分析天平,烘箱,
干燥器,水浴锅,滴定管等
2、试剂:
1)盐酸酸溶液(1∶1):
取100ml的盐酸,缓慢倒入100ml的水中,摇匀。
2)氢氧化钠溶液(200g/L):
称取100g氢氧化钠,加水溶解并稀释定容至500ml,摇匀,贮于塑料瓶重。
3)斐林氏A:
34.7gCuSO4加水至500ml定容。
斐林氏B:
173g酒石酸钾钠加50g
氢氧化钠加水至500ml定容
4)1%次甲基蓝指示剂:
称量1.0g次甲基蓝,溶解于水中并稀释至100ml。
5)2.5g/L标准葡萄糖溶液:
精确称取经105℃以下温度干燥至恒重的葡萄糖2.5g(准确至0.0001g),溶解于水中,稀释定容至1000ml。
三、操作方法:
1、试样的制备
1)测总糖用试样
准确吸取一定量的样品(V1)于100ml容量瓶中,使之含总糖为0.2~0.4g;
加5ml盐酸(1∶1)溶液,加水至20ml,摇匀;
于68±1℃水浴上水解15min,取出,冷却;
用200g/L氢氧化钠溶液中和至中性,调温至20℃,加水定容至刻度(V2)
2)测还原糖用试样:
准确吸取一定量的样品(V1)于100ml容量瓶中,使之含还原糖为0.2~0.4g,加水定容至刻度(V2)
2、测定
1)斐林试液的标定:
准确吸取斐林试液A、B各5.00ml,加水50ml,置250ml三角瓶中,在电炉上加入至沸,在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定,当溶液的蓝色消失呈红色时,加2滴次甲基蓝指示剂,继续滴加葡萄糖至蓝色消失为终点。
记录葡萄糖标准溶液消耗的体积。
另取斐林试液A、B各5.00ml置250ml三角瓶中,加水50ml和比上述实验少1ml的葡萄糖标准溶液加热至沸并保持2min,加2滴次甲基蓝指示剂,继续滴加葡萄糖至蓝色消失为终点。
记录葡萄糖标准溶液消耗的总体积。
2)预测:
精确吸取斐林氏A、B液各5ml,加水50ml,置于250ml三角瓶中,在沸腾的状态下用制备好的试样滴定,当溶液的蓝色消失将呈红色时,加入次甲基蓝指示剂2滴,继续滴定蓝色消退,记录用量。
3)测定:
斐林试液A、B各5.00ml置250ml三角瓶中,加水50ml和比上述实验少1ml的试样溶液加热至沸并保持2min,加2滴次甲基蓝指示剂,继续滴加试样至蓝色消失为终点。
记录溶液消耗的总体积。
四、计算:
F=C*V
式中:
F---斐林氏A、B液各5ml相当于葡萄糖的质量,g;
C---葡萄糖标准溶液的浓度,g/L;
V---消耗的葡萄糖标准溶液的总体积,ml;
F
X3=----------------*1000
(V1/V2)*V3
式中:
X3---总糖或还原糖的含量,g/L;
F---斐林氏AB溶液各5ml相当还原糖的重量(以葡萄糖计),g;
V1---吸取的样品体积,ml;
V2---样品稀释定容后的体积,ml;
V3---测定时消耗样品稀释液的体积,ml;
实验四、葡萄酒滴定酸的测定
一、实验原理
葡萄酒中的有机酸在用标准碱液滴定时,被中和生成盐类。
用酚酞做指示剂,当滴定至终点时,根据耗用标准碱液量,可计算出样品中总酸含量。
通常以该葡萄酒中含量最多的酸来表示酸度。
二、仪器及试剂:
1、仪器:
容量瓶滴定管移液管
三角瓶分析天平
2、试剂:
1%酚酞:
称取1.0g的酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100ml。
0.05MNaOH标准溶液;
邻苯二甲酸氢钾
三、实验方法:
1、标准溶液的配制与标定
1)在粗天平上称取约100gNaOH,加水100ml使之全部溶解,冷却后置于聚乙烯塑料瓶中,密封,放置数日澄清后,取上清液2.8ml,加新煮沸过并已冷却的蒸馏水至1000ml,摇匀。
2)将分析纯苯二甲酸氢钾于120℃干燥箱中干燥1小时至恒重,冷却称取0.1~0.2g于250ml锥形瓶中,加入50ml蒸馏水溶解,加入3滴酚酞指示剂,用以上配好的碱液滴定至微红色,计算氢氧化钠当量浓度。
同时做空白试验。
氢氧化钠标准溶液浓度按下式计算:
m
C(NaOH)=-------------------------
(V1-V2)×0.2042
式中:
C(NaOH)----标准氢氧化钠溶液的浓度,mol/L;
m----邻苯二甲酸氢钾的质量,g;
V1---滴定终点消耗氢氧化钠溶液体积,ml;
V2---空白试验消耗氢氧化钠溶液体积,ml;
0.2042---与1.00ml氢氧化钠标准溶液[C(NaOH)=1.000mol/L]相当的以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。
2、测定方法
取调温至20℃的样品2~5ml(V2),加入50ml蒸馏水将样品移入250ml锥形瓶中,同时加入2d酚酞指示剂,摇匀后,用标准碱液滴定至浅红色,并保持30s内不变色,记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积(V1)。
空白试验:
用同样的方法,只是不加入酒样,做空白试验。
记录消耗标准碱液的体积(V0)。
四、计算:
C*(V1-V0)×Si
X=-------------------------×1000
V2
式中:
X----样品中滴定酸的含量(以酒石酸计),g/L;
C----标准氢氧化钠溶液的浓度,mol/L;
V0---空白试验消耗标准碱液体积,ml;
V1---滴定终点消耗标准碱液体积,ml;
V2---滴定时吸取样液体积ml;
Si---与1.00ml氢氧化钠标准溶液[C(NaOH)=1.000mol/L]相当的以克表示的试样主体酸的质量。
S酒石酸=0.075;S苹果酸=0.067;S柠檬酸=0.064;S草酸=0.045
实验五、葡萄酒挥发酸的测定
一、实验原理
以蒸馏的方式将样品中挥发酸蒸出,然后用碱标准溶液滴定,以消耗的碱标准溶液的量来计算挥发酸的含量。
二、仪器及试剂
1、试剂
氢氧化钠标准溶液c(NaoH)=0.05mol/L(配制及标定方法同试验四)
酚酞指示液(10g/L):
称取1.0g酚酞,溶于乙醇,用乙醇稀释至100ml。
酒石酸溶液(200g/L):
称取20g酒石酸溶解至100ml。
2、仪器蒸馏装置:
单沸式蒸馏装置
三、分析步骤
1、安装水蒸气蒸馏装置
按仪器要求安装好蒸馏装置;在蒸气发生瓶(A)内装入中性蒸馏水,其液面应低于内芯(B)进汽门3cm,高于B中样品液面;取20℃样品l0.00ml(V)于蒸馏装置样品瓶中,加入10ml酒石酸溶液;把B插人A内,按上氮气球(D),连接冷凝器(E);将100ml处有标记的250ml三角瓶置于冷凝器下面接收馏出液。
2、蒸馏
待全部安装妥当后,进行蒸馏。
先打开蒸气发生瓶的排汽管(C);把水加热至沸,2min后夹紧C,使蒸气进入B中进行蒸馏;待馏出液达100ml时,放松C,停止蒸馏,取下三角瓶,用以样品的测定。
3、滴定
将馏出液加热至沸,除去CO2,但沸腾时间不能超过30s,立即冷却,加入2滴酚酞指标剂,用氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色,并保持30s内不变色为终点。
4、记录
记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积(V1)。
四、计算
样品中的挥发酸按下式计算:
C×V1×60.0
X=-----------------------
V
式中:
X-----样品中挥发酸的含量,g/L;
C-----氢氧化钠标准溶液的物质量浓度,mol/L;
V1-----氢氧化钠标准溶液的体积,ml;
60.0-----与1.00ml氢氧化钠标准溶液[C(NaOH)=1.00mol/L]相当的以克表示的乙酸的含量,g;
V-----取样体积,ml;
实验六、苹果酸层析分析
一、原理
将葡萄酒以小原点的形式点样于滤纸上,经展开、显色后,根据比移值与标准比较定性。
酒石酸移动速度最慢,离葡萄酒点样点最近,酒石酸Rf在0.26~0.30;
乳酸和琥珀酸速度最快,被推动到滤纸的最顶端,琥珀酸Rf在0.69~0.76;
苹果酸移动的速度处于两者之间,苹果酸Rf在0.52~0.56。
二、仪器与试剂
1、仪器
滤纸:
美国沃特曼1号或新华1号,杭州新华造纸厂
点样器:
毛细管或微量注射器
电吹风
50ml小烧杯
层析缸
2、试剂
50%乙酸
溴酚蓝的正丁醇溶液:
在1L的正丁醇中加入1g溴酚蓝溶解。
展开剂:
取50ml溴酚蓝丁醇溶液与25ml50%乙酸混合。
标样:
苹果酸标样,乳酸标样,酒石酸标样
三、操作方法
1、将配制好的展开剂装入层析缸内,封严。
2、在滤纸下端4~5cm处轻轻做一条基线,然后将酒样和标样点于滤纸上,电吹风吹干后再点,应少量多次,且每滴样品在滤纸上直径不超过5mm。
3、将滤纸卷成筒状,并用两个小夹夹住。
4、将滤纸轻轻放入层析缸内,使滤纸不触及层析缸的内壁,点样点也不能浸入展层剂中,然后将层析缸盖严。
5、当展层剂移到距滤纸顶部1~2cm时,将滤纸取出,并用夹子固定住进行干燥。
四、注意事项
1)裁纸时,按着纤维排列的方向不留毛边。
2)点样量不能过多,否则会造成拖尾;点样点直径应小于3mm为佳,未知发酵液试样依据酸性强弱点样,酸弱时,点5滴,酸强时,点3滴。
3)控制标样品与试样用量保持一致,根据标样和试样层析斑点大小估测样品中酸的多小。
4)注意爬层时间,避免溶剂前沿过头。
5)点样的毛细管应专样专用,避免混淆。
实验七二氧化硫的测定
一、原理
二氧化硫可以与碘发生氧化还原反应,用碘标准溶液作滴定剂,淀粉作指示剂,根据碘标准液消耗的量计算试样中二氧化硫的含量。
试样用硫酸酸化可使水合态的二氧化硫变为游离态,以测定游离二氧化硫的含量。
试样用碱处理,使结合态的二氧化硫变为游离二氧化硫,经过酸化,以测定总二氧化硫的含量。
二、试剂与溶液
1)硫酸溶液(1∶3):
取1体积浓硫酸缓慢注入3体积水中。
2)淀粉指示液(10g/L):
称取1g淀粉,加5ml水使成糊状,在搅拌下将糊状物加到90ml沸腾的水中,煮沸1—2min,冷却,稀释至100ml。
3)氢氧化钠溶液(100g/L):
取100g氢氧化钠溶解稀释至1L。
4)碘标准溶液c(1/2I2)=0.02mol/L。
称取13g碘(相对分子质量126.9)及35g碘化钾,用水溶解稀释至1000ml,摇匀,贮于棕色瓶中,此溶液的浓度约为0.1mol/L。
标定:
采用标准硫代硫酸钠溶液标定碘标准溶液,标定的反应方程式如下:
I2+2S2O32-===2I-+S4O62-
准确量取30.00ml配制好的碘溶液置于250ml碘量瓶中,加150ml水,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,近终点时加3ml淀粉指示剂,继续滴定至溶液蓝色消失。
记录消耗硫代硫酸钠标准溶液的量(V)。
以水替碘液作空白试验:
取250ml水,加0.05ml配制好的碘溶液(C=0.1mol/L)及3ml淀粉指示液,用硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液蓝色消失,记录消耗硫化硫酸钠标准溶液的量(V2)。
碘标准溶液的浓度按下式计算:
(V-V2)×C1
C=----------------------------
V1-0.05
式中:
C——碘标准溶液物质量浓度,mol/L;
C1——硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度,mol/L;
m——重铬酸钾质量,g;
V——硫代硫酸钠溶液的用量,ml;
V2——空白实验消耗硫代硫酸钠溶液的量,ml;
V1——碘溶液的用量,ml;
0.05——空白试验中加入碘溶液的量,ml;
硫代硫酸钠溶液的标定:
称取0.15g于120℃烘干至恒重的基准重铬酸钾,置于碘量瓶中,加入25ml蒸馏水,加2g碘化钾及20ml硫酸溶液(20%),摇匀,于暗处放置10min。
加150ml水,用配置好的硫代硫酸钠溶液滴定。
近终点时加3ml淀粉指示剂继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。
同时做空白试验。
计算:
硫代硫酸钠标准溶液浓度:
m
C(Na2S2O3)=----------------------------
(V1-V2)×0.04903
式中:
C(Na2S2O3)——硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度,mol/L;
m——重铬酸钾质量,g;
V1——硫代硫酸钠溶液的用量,ml;
V2——空白实验消耗硫代硫酸钠溶液的量,ml;
0.04903——与1.00ml硫代硫酸钠标准溶液[C(Na2S2O3)=1.000mol/L]相当以克表示的重铬酸钾的质量。
三、分析步骤
1、游离二氧化硫
吸取50.00ml样品于250ml碘量瓶中,加入少量碎冰块,使温度降至5—10℃,再加入lml淀粉指示液,l0ml硫酸溶液,立即用碘标准溶液滴定至淡蓝色,保持30s不变即为终点,记录消耗的碘标准溶液的体积(v)。
以水代替样品,做空白试验,消耗的碘标准溶液的体积记为(V0)。
计算:
C×(V-V0)×32
X1=-------------------*1000
50
式中:
X1——样品中游离二氧化硫的含量,mg/L;
C——碘标准溶液物质量浓度,mol/L;
V——消耗的碘标准溶液的体积,ml;
V0——空白实验消耗碘标准溶液的体积,ml;
32——与1.00ml碘标准溶液[C=1.000mol/L]相当以毫克表示的二氧化硫的质量;
50——取样体积,ml;
2、总二氧化硫
取25mL氢氧化钠溶液于250ml碘量瓶中,再准确吸取25.00ml样品,并以吸管尖插入氢氧化钠溶液的方式,加入到碘量瓶中,摇匀,盖塞,静置15min,使结合态的二氧化硫完全转化为游离二氧化硫,再加人少量碎冰块,1ml淀粉指示液,10ml硫酸溶液,摇匀,立即用碘标准溶液滴定至淡监色,30s内不变即为终点,记下消耗的碘标准溶液的体积(V)。
以水代替样品做空白试验,消耗的碘标准溶液的体积记为(V0)。
四、计算
C×(V-V0)×32
X2=----------------------------*1000
25
式中:
X2——样品中总二氧化硫的含量,mg/L;
C——碘标准溶液物质量浓度,mol/L;
V——消耗的碘标准溶液的体积,ml;
V0——空白实验消耗碘标准溶液的体积,ml;
32——与1.00ml碘标准溶液[C=1.000mol/L]相当以毫克表示的二氧化硫的质量。
25——取样体积,ml;
实验八、铁含量的测定
一、实验原理
磺基水杨酸在碱性条件下与三价铁生成黄色络合物,以比色法测定。
二、实验试剂
1、1:
1.5氢氧化铵溶液:
取100ml的氨水,注入150ml水中,摇匀。
2、10%磺基水杨酸溶液:
称取100g的磺基水杨酸,用水溶解稀释至1L。
3、铁标准储备液(0.1g/L):
称取0.864g硫酸铁铵溶于水,加1ml硫酸,移入1000ml容量瓶中,稀释至刻度。
4、铁标准使用液(10mg/L):
吸取10.00ml铁标准储备液于100ml容量瓶中,用0.5%硝酸溶液稀释至刻度。
三、实验步骤:
1、试样的制备
准确吸取25.00ml样品(V)于蒸发皿中,在水浴上蒸干,置于电炉上小火炭化,然后移入(550±25)℃高温电炉中灼烧,灰化至残渣呈灰白色,取出,加入10ml(1∶1)的盐酸溶解,在水浴上蒸发至2ml,再加入5ml水,加热煮沸后,移入50ml的容量瓶中,用水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶中,用水稀释至刻度(V1),摇匀,同时做空白试验。
2、取比色管7支,按下表顺序加入各种试剂
编号
0
1
2
3
4
5
6
标准铁溶液(ml)
0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
样品10ml
水(ml)
10
9.5
9.0
8.5
8.0
7.5
0
磺基水杨酸(ml)
5
5
5
5
5
5
5
1:
3氢氧化铵(ml)
5
5
5
5
5
5
5
摇匀,放置10分钟,以1-5号管为标准系列,或在480纳米下测光密度,绘制标准曲线。
四、计算
(m1-m0)×V1
X=----------------------------
V×V2
式中:
X——样品中铁的含量,mg/L;
m1——测定用样品从标准曲线上查的铁的质量,μg;
m0——试剂空白液中铁质量,μg;
V——取样体积,ml;
V1——样品消化液的总体积,ml;
V1——测定用试样的体积,ml;
实验九、葡萄酒中总酚的测定
一、原理
葡萄酒中的所有酚类物质被福林-肖卡试剂氧化。
该试剂由磷钨酸和磷钼酸的混合物组成,氧化酚后,会变成蓝色的氧化钨和蓝色氧化钼的混合物。
产生的蓝色在765nm有最大吸收峰,生成物的颜色深浅与酚的含量成正比,可比色测定其含量。
二、仪器与试剂
1、仪器
分光光度计、恒温水浴、圆底烧瓶、100ml容量瓶、冷凝管
2、试剂
1)福林-肖卡试剂:
市售的试剂可以使用,也可按照下面的方法配制:
把100g钨酸钠和25g钼酸钠溶解在700ml蒸馏水中,加入50ml85%的磷酸,100ml浓盐酸,加入几粒玻璃珠,连接好冷凝器,用文火加热回流10小时。
回流后用50ml水冲洗冷凝管上的附着物,然后取下。
加入150g硫酸锂,几滴溴,加热煮沸15min,冷却,加入蒸馏水使其达1000ml。
最后的颜色应是黄色,不带丝毫的蓝色、绿色,发绿即不得使用。
2)碳酸钠饱和溶液
称取20g无水碳酸钠溶于100ml蒸馏水中,在70~80℃溶解,放置过夜,次日加入少许水合碳酸钠到饱和溶液中做晶种,使结晶析出,24h后过滤后备用。
3)酚母液
称取0.500g五倍子酸,用水溶解定容到100ml。
三、测定步骤
1)标准曲线的绘制
①用移液管精确吸取0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、10.0ml酚母液于100ml的容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。
各瓶的酚浓度分别为0、50、100、150、250、500mg/L。
②再分别取6支100ml容量瓶,分别吸取上述溶液各1ml,各加水60ml,混合,各加入福林-肖卡试剂5ml,充分混匀。
③在30s至8min内各加入15ml碳酸钠溶液,混合后用水定容。
④将以上各液在20℃下放置2小时,然后在分光光度计上765nm下测定吸光度。
以酚浓度做横坐标,吸光度做纵坐标,绘制标准曲线
2)样品的测定
①白葡萄酒:
吸取1ml样品于100ml的容量瓶中,其他步骤按照
(1)②③操作。
然后在分光光度计上765nm处测定吸光度。
②红葡萄酒:
吸取10ml样品稀释至100ml,再吸取1ml稀释的样品按上法进行测定。
四、结果计算
样品吸光度数
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