届高考生物一轮复习 第十单元 现代生物科技专题 第37讲 胚胎工程备考一体学案 苏教版.docx
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届高考生物一轮复习第十单元现代生物科技专题第37讲胚胎工程备考一体学案苏教版
第37讲 胚胎工程
[考纲要求] 1.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础(Ⅰ)。
2.胚胎干细胞的移植(Ⅰ)。
3.胚胎工程的应用(Ⅱ)。
考点一 受精和胚胎发育
1.精子和卵子的发生
项目
精子的发生
卵子的发生
场所
睾丸的曲细精管
卵巢(MⅠ)、输卵管(MⅡ)
时间
从初情期开始,直到生殖机能衰退
①卵泡的形成和在卵巢内的储备:
胎儿期;②排卵:
初情期后
过程
过程
特点
①MⅠ和MⅡ是连续的,需变形;②两次分裂细胞质都是均等分配
①MⅠ和MⅡ是不连续的,不需要变形;②只有MⅡ中的第一极体分裂为第二极体时细胞质均等分配,其余细胞质都是不均等分配
结果
形成4个精子
形成1个卵子和3个极体
相
同
点
①原始生殖细胞的增殖方式为有丝分裂;
②原始生殖细胞产生成熟生殖细胞为减数分裂;减数分裂过程中经染色体复制一次,细胞分裂两次,子细胞中染色体数目减半
2.体内受精
(1)精子获能:
刚刚排出的精子,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后,才能获得受精能力。
卵泡液、输卵管分泌物、血清等液体可使精子获能。
(2)卵子的准备:
卵子要在输卵管内进一步成熟,当达到减数第二次分裂中期时,才具备与精子受精的能力。
(3)受精过程
3.哺乳动物胚胎发育过程
↓
↓
↓
↓
胚层分化
↓
胚体形成
1.有关精、卵细胞的发生及受精的判断
(1)精子和卵子的发生都是从初情期开始的( × )
(2)卵子形成过程中,减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续的( × )
(3)排卵是指卵泡从卵巢中排出( × )
(4)成熟的精子并不具有受精能力,必须获能后才具备受精能力( √ )
(5)卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙出现两个极体( √ )
(6)透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障( √ )
2.有关早期胚胎发育的判断
(1)卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大( × )
(2)卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加( × )
(3)在胚胎发育过程中,细胞的分化出现在桑椹胚期( × )
(4)内细胞团将来发育成胎膜和胎盘( × )
如图表示哺乳动物发育过程的几个阶段,据图分析:
(1)A、B、C的名称分别是什么?
提示 桑椹胚、囊胚、原肠胚。
(2)图中的4和7两个空腔是同一个结构吗?
提示 不是,分别是囊胚腔和原肠腔。
(3)细胞分化开始出现于哪个时期?
1部分的细胞将来形成什么结构?
提示 细胞分化开始出现于B(囊胚)时期,1部分的细胞将来形成胎膜和胎盘。
(4)早期胚胎的发育过程中,卵裂时细胞的体积和所有的细胞体积之和有何变化?
提示 卵裂过程中,细胞只分裂而不生长,所以每个细胞的体积越来越小,但总体积并不增加或略有缩小。
命题点一 精、卵细胞的发生与受精过程分析
1.下列不是精子、卵子发生的区别的是( )
A.初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间
B.MⅠ和MⅡ的时间连续性
C.成熟生殖细胞是否经过变形
D.成熟生殖细胞中染色体的数目
答案 D
解析 初级精母细胞的形成时间是从初情期到生殖机能衰退,初级卵母细胞的形成时间是在胚胎出现性别分化后,A项正确;精子形成过程中,MⅠ和MⅡ在时间上是连续的,而卵细胞形成过程中,MⅠ和MⅡ在时间上是不连续的,B项正确;精子的形成过程需要变形,卵子的形成过程不需要变形,C项正确;精子和卵细胞中的染色体数目相同,都是体细胞的一半,D项错误。
2.如图表示高等动物卵子的发生过程,请据图回答下列有关问题:
(1)图中A是__________,B是__________,E是__________,阶段C是指个体发育的(时期)。
(2)精子开始形成的时期是____________,精子形成过程不同于卵子形成过程的最主要特征是____________,该过程保留的主要结构是____________和____________。
(3)当观察到两个极体时,表明___________________________________________________。
(4)能发生染色体的着丝点分裂的阶段是____________(填序号)。
(5)阶段C发生的场所是____________。
答案
(1)第一极体 合子 精子 胎儿期
(2)初情期 需要变形 细胞核 线粒体 (3)卵子已经完成了受精 (4)①④ (5)卵巢
解析
(1)图中①为卵原细胞增殖(有丝分裂)并演变为初级卵母细胞的过程;③④为减数分裂,只有在受精时,次级卵母细胞才能最终完成减数第二次分裂,因此E是精子,B是合子;阶段C为卵泡的形成,发生在胎儿期。
(2)精子开始形成的时期是初情期,精原细胞经过减数分裂,产生精子细胞,精子细胞需要经过变形过程才能形成精子(卵子形成不需要变形),精子细胞中很多结构会消失,而细胞核和线粒体则会保留下来。
(3)当观察到两个极体时,表明卵子已经完成了受精。
(4)染色体的着丝点分裂可发生在有丝分裂后期和减数第二次分裂后期,即图中的①④。
(5)阶段C(卵泡的形成)发生在卵巢内。
命题点二 早期胚胎发育过程的分析
3.下图表示高等动物的个体发育过程,下列说法正确的是( )
A.图中①过程表示胚胎发育,②过程表示胚后发育
B.受精卵卵裂处于囊胚形成的过程中,每个细胞的体积不断增大
C.兔子、雄鹰和眼镜蛇在个体发育过程中会出现羊膜
D.原肠胚是进行胚胎移植的最好时期
答案 C
解析 由受精卵发育为幼体的过程是胚胎发育,由幼体发育为成体的过程是胚后发育,A项错误;卵裂形成的囊胚总体积基本不变,而每个细胞的体积减小,B项错误;兔子、雄鹰和眼镜蛇分别是哺乳类、鸟类和爬行类动物,都是真正的陆生脊椎动物,羊膜和羊水能保证其胚胎发育所需的水环境,还具有防震和保护作用,C项正确;原肠胚期已发生了细胞的分化,最好在早期胚胎时进行胚胎移植,如牛、羊一般在桑椹胚或囊胚阶段移植,而其他生物要在更早阶段进行,D项错误。
4.如图表示哺乳动物发育过程的几个阶段,请据图回答下列问题:
(1)写出各个阶段的名称:
A:
____________,B:
____________,C:
____________。
(2)写出图中各标号的名称:
[2]__________,[4]__________,[5]____________,
[7]__________,[8]____________。
(3)A时期的细胞具有发育上的_______性,B时期开始出现_________,C时期开始出现_____。
(4)[2]将来发育成__________________。
(5)动物胚胎是由合子经有丝分裂形成的,合子只由一个精子和卵子结合,防止多精入卵受精的两道屏障分别是________________、________________。
答案
(1)桑椹胚 囊胚 原肠胚
(2)内细胞团 囊胚腔 外胚层 原肠腔 内胚层 (3)全能 细胞分化 胚层分化 (4)胎儿的各种组织 (5)透明带反应 卵细胞膜反应
解析
(1)图中A是桑椹胚,B是囊胚,C是原肠胚。
(2)图B中[1]是滋养层,[2]是内细胞团,[3]是透明带,[4]是囊胚腔;图C中[5]是外胚层,[6]是滋养层,[7]是原肠腔,[8]是内胚层。
(3)桑椹胚细胞具有全能性;囊胚开始出现细胞分化,已分化为滋养层细胞和内细胞团;原肠胚已有胚层分化,分化为外胚层、内胚层,在内、外胚层之间将形成中胚层。
(4)内细胞团将发育为胎儿的各种组织,滋养层将发育为胎儿的胎膜和胎盘。
(5)受精时的透明带反应和卵细胞膜反应是防止多精入卵的两道屏障。
考点二 胚胎工程及其应用
1.体外受精技术
(1)卵母细胞的采集和培养
(2)精子的采集和获能
(3)受精:
获能的精子和培养成熟的卵子在人为控制的适宜条件下和专用的受精溶液中完成受精作用。
2.胚胎移植技术
(1)过程
(2)实质:
胚胎移植是产生胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。
3.胚胎分割技术
(1)概念
①方法:
机械方法。
②分割份数:
将早期胚胎切割成二分胚、四分胚甚至八分胚等。
③目的:
获得同卵双生或同卵多生后代。
(2)定位:
被视为一种胚胎克隆方法。
(3)材料:
发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。
(4)要求:
将内细胞团均等分割。
4.胚胎冷冻保存技术
(1)概念:
将动物的早期胚胎或分割后的胚胎,采用特殊的保护剂,使其长期保存在超低温环境下。
(2)作用:
①建立胚胎库,以加速动物的繁育进程和保护优良资源。
②可以使胚胎移植不受时间和地域的限制。
5.胚胎干细胞
(1)干细胞
①概念:
动物(包括人)胚胎及某些器官中具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞。
②分类:
专能干细胞、多能干细胞、全能干细胞。
(2)胚胎干细胞
①概念:
是早期的胚胎中未分化的细胞或从原始性腺中分离出来的一类细胞。
②特点:
具有体积小、核大、核仁明显等形态特征,具有发育的全能性。
6.胚胎工程的应用
(1)在畜牧业生产上的应用:
①大量繁育家畜良种;②控制家畜后代的性别比例。
(2)在医学及科学研究上的应用
①胚胎干细胞的研究,有助于人们理解复杂的人体发育过程,并促进对人胚胎发育细节的研究,从而揭示人与动物的发育机制及影响其发育的因素。
②胚胎干细胞为细胞水平上研究新药提供材料。
③胚胎干细胞研究为细胞或组织移植提供无免疫原性的材料,可用于疾病的治疗。
1.有关胚胎移植与胚胎分割技术的判断
(1)在胚胎移植中,对供体母畜要进行超数排卵处理,对供、受体要进行同期发情处理( √ )
(2)胚胎移植技术中对供体和受体母畜都要进行相同激素处理( × )
(3)胚胎分割移植时应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚( × )
(4)胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低( √ )
(5)利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎( √ )
(6)胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割( × )
(7)在对囊胚进行分割时,要将滋养层细胞均等分割( × )
2.有关胚胎干细胞的判断
(1)胚胎干细胞在体外培养条件下具有增殖而不发生分化的特点( √ )
(2)胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点( × )
(3)胚胎干细胞在分化诱导因子的作用下可以向不同类型的组织细胞分化( √ )
据图分析胚胎移植的操作流程
(1)图中供体牛和受体牛分别是哪些?
选择标准是什么?
提示 供体牛是良种公、母牛;受体牛是一般受体奶牛和一般受体肉牛。
选择标准:
供体是遗传性能和生产性能优良的个体,受体是健康、有繁殖能力的个体。
(2)对供体牛和受体牛要进行怎样的处理?
提示 对供体母牛进行超数排卵处理;对供、受体母牛进行同期发情处理。
(3)用于移植的早期胚胎应是发育到哪些阶段的胚胎?
提示 桑椹胚或囊胚。
(4)排卵和冲卵有什么区别?
提示 排卵是指卵子从卵泡中排出,冲卵是把供体母牛子宫内的早期胚胎冲洗出来。
命题点一 体外受精过程和早期胚胎培养原理及过程分析
1.如图表示通过体外受精培育牛的过程,下列叙述错误的是( )
A.获取的精子经获能后才能进行体外受精
B.②过程只与细胞膜的流动性有关
C.③过程的细胞增殖方式是有丝分裂
D.④过程属于胚胎移植过程
答案 B
解析 在进行体外受精时,获取的精子需获能后才能进行体外受精,A项正确;图中的②过程是受精作用,该过程涉及精卵细胞的识别、细胞膜的融合(与膜的流动性有关)、核的融合等,B项错误;③过程是卵裂过程,该过程的细胞增殖方式是有丝分裂,C项正确;④过程是将早期胚胎移入受体子宫的过程,属于胚胎移植过程,D项正确。
2.培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。
据图回答下列问题:
(1)甲过程为________________,该过程中可通过给母山羊注射__________使其超数排卵。
(2)乙过程的操作之一是对精子进行______________________处理。
(3)乙过程与丙过程中采用的培养液成分不同,乙过程的培养液为__________________,丙过程的培养液为__________________。
(4)丁过程是___________,是指将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的代孕母羊子宫内。
答案
(1)卵母细胞的采集 促性腺激素
(2)获能 (3)专用的受精溶液 发育培养液 (4)胚胎移植
解析 分析图示可知,甲过程为卵母细胞的采集,一般用促性腺激素处理良种母山羊,使其超数排卵。
乙过程为精子获能以及受精作用,获能的精子和成熟的卵子在适宜条件下和专用的受精溶液中完成受精。
丙过程为早期胚胎培养,在发育培养液中进行。
丁过程为胚胎移植,是指将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同(而不是性状相同)的其他雌性动物子宫内使之继续发育为新个体。
命题点二 胚胎移植和干细胞技术应用实例分析
3.(2017·三明一中第二次月考)下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程,请回答下列问题:
(1)A细胞是____________,在进行体外受精前要对精子进行____________处理。
(2)进行胚胎分割时,应选择发育到______________时期的胚胎进行操作。
(3)②指的是____________。
(4)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意________________________。
(5)受体母牛必须和供体母牛是同种,并且要经过______________________处理。
(6)将胚胎移植入受体后,还要对受体母牛进行是否____________的检查。
答案
(1)(次级)卵母细胞 获能
(2)桑椹胚或囊胚 (3)囊胚腔 (4)要将内细胞团均等分割 (5)同期发情(6)妊娠
解析
(1)A细胞是次级卵母细胞,在进行体外受精前要对精子进行获能处理。
(2)进行胚胎分割时,应选择发育到桑椹胚或囊胚时期的胚胎进行操作。
(3)图中①是内细胞团,②是囊胚腔。
(4)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意要将内细胞团均等分割。
(5)受体母牛必须和供体母牛是同种,并且要经过同期发情处理。
(6)将胚胎移植入受体后,还要对受体母牛进行是否妊娠的检查。
4.如图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。
请据图回答下列问题:
(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至____________期的内细胞团或胎儿的____________中分离得到的一类细胞。
(2)图中分化程度最低的干细胞是____________。
在体外培养条件下,培养液中加入____________因子,可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
(3)在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因____________的结果。
(4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的。
骨髓移植的实质是将上图中的________细胞移植到患者体内。
(5)若要克隆某种哺乳动物,从理论上分析,上述红细胞、白细胞、皮肤细胞、神经细胞中不能作为供体的细胞是成熟的________,其原因是__________________________________。
答案
(1)囊胚 原始性腺细胞
(2)胚胎干细胞 分化诱导 (3)选择性表达 (4)造血干 (5)红细胞 哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核
解析
(1)胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,这个早期胚胎指的是囊胚阶段的内细胞团。
(2)图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞,其全能性最高,在体外培养条件下,在培养液中加入分化诱导因子,则该种干细胞可被诱导分化形成不同类型的组织细胞。
(3)细胞分化是细胞中基因选择性表达的结果。
(4)骨髓是人体的造血组织,存在有造血功能的干细胞,骨髓移植的实质是将造血干细胞移植到患者体内。
(5)克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核,而哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核,所以不能作为供体。
矫正易错 强记长句
1.精子获能是指精子获得受精“能力”,而不是获得能量。
2.排卵是指卵子从卵泡中排出,而不是卵泡从卵巢中排出。
3.受精的标志≠受精完成的标志:
受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体;而受精完成的标志是雌、雄原核的融合。
4.胚胎移植过程中两次使用激素:
第一次常用孕激素对受、供体进行同期发情处理;第二次用促性腺激素处理供体使其超数排卵。
5.胚胎移植过程中有两次检查:
第一次对收集的胚胎进行检查;第二次对受体母畜是否妊娠进行检查。
6.胚胎干细胞来源于早期胚胎中未分化的细胞或从原始性腺中分离出来的一类细胞,具有体积小、核大、核仁明显等形态特征。
1.受精过程:
获能的精子穿过放射冠和透明带→精卵通过细胞表面的糖蛋白相互识别→精子遗传物质进入卵细胞。
2.防止多精入卵的两道屏障是:
透明带反应和卵细胞膜反应。
3.胚胎发育过程:
受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚→胚层分化→胚体形成。
囊胚开始出现细胞分化,原肠胚出现胚层分化。
4.胚胎移植的基本程序:
对供、受体的选择和处理→配种或进行人工授精→对胚胎的收集、检查、培养或保存→胚胎移植→移植后检查。
5.胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良动物的繁殖潜力。
重温高考 演练模拟
1.(2017·江苏,14)下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述,错误的是( )
A.精子在获能液中于37℃、5%CO2条件下培养的目的是使精子获能
B.小鼠在特定光控周期条件下饲养,注射相关激素有促进超数排卵的作用
C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质,因此发育成的个体没有形态学差异
D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育
答案 C
解析 精子在获能液中培养的目的是使精子获能,其培养条件应符合动物细胞培养要求,A项正确;小鼠在特定光控周期条件下饲养的目的是通过特定的光周期调控其性激素的分泌,注射促性腺激素的目的是促进其超数排卵,B项正确;虽然分割的胚胎具有相同的遗传物质,但环境也会对胚胎的发育产生影响,导致发育的个体出现形态学差异,C项错误;胚胎干细胞具有发育的全能性,注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育,D项正确。
2.《自然—方法学》消息,科学家以皮肤细胞为材料,通过逆转录病毒等现代生物工程工具对这些细胞进行“重置”,成功制造出两种濒危动物的多能干细胞,甚至可以分化成为配子(即精子和卵子)。
下列说法不正确的是( )
A.此种干细胞可分化出生物体所有细胞
B.多能干细胞核具有发育成个体的潜能
C.利用此干细胞替换动物体内已经失灵的功能细胞,可以治疗糖尿病等疾病
D.如果用此技术成功分化出配子,则可用“试管婴儿”技术保证濒危动物的种群数量
答案 A
解析 多能干细胞不同于全能干细胞,它不可以分化出生物体的所有细胞。
3.(2017·湖南八校联考)随着生物科学技术的发展,动物的生殖方式变得越来越多样化。
如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是健康的黄牛,请据图回答下列问题:
(1)应用1中获得的良种小牛,遗传物质来源于______________个体,性别为____________。
(2)在应用2、3、4中,若要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其__________。
(3)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题;对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将__________均等分割,否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育,如需做性别鉴定,还需从__________细胞取样做DNA分析。
(4)应用4中细胞进行定向诱导,可分化形成各种组织和器官。
在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外,营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸,还要加入____________;向培养液中通入95%空气和5%二氧化碳,空气中的氧气参与细胞的代谢,二氧化碳可以维持培养液的__________。
答案
(1)供体1和供体2 雌性
(2)获能 (3)内细胞团 滋养层 (4)动物血清(或血浆) pH
解析
(1)应用1属于核移植技术,其中重组细胞的细胞核来自供体1、细胞质来自供体2,所以良种小牛的遗传物质来自供体1和供体2,其中控制性别的基因位于细胞核中,所以良种小牛的性别与供体1(母牛)相同。
(2)只有获能的精子才能与成熟的卵母细胞完成受精作用。
(3)胚胎分割时,囊胚期的内细胞团应均等分割,这样有利于胚胎的恢复和进一步发育。
从滋养层细胞取样做DNA分析可鉴定性别。
(4)培养动物细胞时,培养液中还应加入血清或血浆。
向培养液中通入CO2可维持培养液pH的稳定。
4.(2018·衡阳调研)科学家利用活体卵子及皮肤成纤维细胞,在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎,进而可开发出有研究价值的胚胎干细胞。
回答下列问题:
(1)胚胎干细胞在形态上表现为体积小,细胞核大,____________明显等特点,在功能上具有________________。
自然状况下的胚胎干细胞是从哺乳动物的____________________中分离出来的一类细胞。
(2)若将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变,在分子水平上需要采用____________________技术。
(3)通过胚胎干细胞体外诱导分化,可培育出人造组织器官,解决目前临床上存在的________________________和______________________问题。
(4)科学家克隆人体胚胎时选用活体卵子,而不用精子,其原因是________________________________________________________________________。
答案
(1)核仁 发育的全能性 早期胚胎或原始性腺
(2)DNA分子杂交(基因探针) (3)供体器官不足 器官移植后存在免疫排斥 (4)卵细胞含有早期胚胎发育所需要的营养物质;卵细胞较大,也较易操作
解析
(1)胚胎干细胞在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显等特点,在功能上具有发育的全能性。
自然状况下的胚胎干细胞是从哺乳动物的早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。
(2)若将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变,在分子水平上需要采用DNA分子杂交技术。
(3)通过胚胎干细胞体外诱导分化,可培育出人造组织器官,可以解决目前临床上器官移植存在的两大问题:
供体器官不足和器官移植后存在免疫排斥。
(4)科学家克隆人体胚胎时选用活体卵子,而不用精子,其原因是卵细胞较大,营养物质丰富,含有早期胚胎发育所需要的营养物质,也较易操作。
5.(2013·新课标Ⅰ,40)阅读如下资料:
资料甲:
科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。
资料乙:
T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。
科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。
资料丙:
兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体,科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙体内,成功产出兔甲的后代,证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。
回答下列问题:
(1)资料甲属于基因工程的范畴。
将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用____________法。
构建基因表达载体常用的工具酶是_________
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