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血清浆蛋白质测定
第七章血清(浆)蛋白质测定
实验34双缩脲法测定血清总蛋白
【原理】血清(浆)中蛋白质的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。
此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似,故称之为双缩脲反应。
这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰,吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系,经与同样处理的蛋白质标准液比较,即可求得蛋白质含量。
【试剂与器材】可购商品试剂或自配。
1.6mol/LNaOH溶液称取NaOH240g,溶于新鲜制备的蒸馏水(或刚煮沸冷却的去离子水)约800ml中,冷却后定容至1L,贮于有盖塑料瓶中。
若用非新开瓶的NaOH,须先配成饱和溶液,静置2周左右,使碳酸盐沉淀,其上清饱和NaOH溶液经滴定后,算出准确浓度再使用。
2.双缩脲试剂称取硫酸铜结晶(CuSO4·5H2O)3g溶于新鲜制备的蒸馏水(或刚煮沸冷却的去离子水)500ml中,加入酒石酸钾钠(NaKC4H4O6·4H2O,用以结合Cu2+,防止CuO在碱性条件下沉淀)9g和KI(防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu2O的离析)5g,待完全溶解后,在搅拌下加入6mol/LNaOH溶液100ml,并用蒸馏水定容至1L,置塑料瓶中盖紧保存。
此试剂室温下可稳定半年,若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制。
3.双缩脲空白试剂除不含硫酸铜外,其余成分与双缩脲试剂相同。
4.60~70g/L蛋白质标准液常用牛血清白蛋白或收集混合血清(无黄疸、无溶血、乙型肝炎表面抗原阴性、肝肾功能正常的人血清),经凯氏定氮法定值,亦可用定值参考血清或标准白蛋白作标准。
但定值质控血清定值准确性较差,不能用作血清总蛋白测定的标准物。
5.仪器自动生化分析仪或分光光度计。
【操作步骤】
1.生化自动分析仪法按试剂盒说明书提供的参数进行操作。
2.手工操作法
(1)手工操作参数:
波长540nm,光径1cm;温度:
室温(18~26℃);模式:
终点法;反应时间:
30min,样本量:
100μl,试剂量:
5ml。
(2)操作:
取试管4支,标明测定管(U)、标准管(S)、标本空白管(B)、试剂空白管(RB),按表7-1操作。
表7-1双缩脲法测定血清总蛋白操作步骤
加入物(ml)
B
RB
S
U
血清
0.10
-
-
0.10
蛋白标准液
-
-
0.10
-
蒸馏水
-
0.10
-
-
双缩脲空白试剂
5.0
-
-
-
双缩脲试剂
-
5.0
5.0
5.0
混匀,置25℃30min或37℃10min,在波长540nm处比色,用蒸馏水调零,测各管吸光度。
【计算】
【参考范围】正常成人参考范围为60~80g/L。
长久卧床者约低3~5g/L,60岁以上约低2g/L,新生儿总蛋白浓度较低,随后逐月缓慢上升,大约1年后达成人水平。
参见表7-2。
表7-2血清TP与年龄和体位的关系
早产儿
36~60g/L
≥3岁
60~80g/L
新生儿
46~70g/L
成人
1周龄
44~76g/L
非卧床
64~83g/L
7月龄~1岁
51~73g/L
卧床
60~78g/L
1~2岁
56~75g/L
【临床意义】
1.血清总蛋白浓度降低
(1)蛋白质合成障碍:
当肝功能严重受损时,蛋白质合成减少,以白蛋白降低最为显著。
(2)蛋白质丢失增加:
严重烧伤,大量血浆渗出;大出血;肾病综合征尿中长期丢失蛋白质;溃疡性结肠炎可从粪便中长期丢失一定量的蛋白质。
(3)营养不良或消耗增加:
营养失调、低蛋白饮食、维生素缺乏症或慢性肠道疾病所引起的吸收不良使体内缺乏合成蛋白质的原料;长期患消耗性疾病,如严重结核病、恶性肿瘤和甲状腺功能亢进等,均可导致血清总蛋白浓度降低。
(4)血浆稀释:
如静脉注射过多低渗溶液或各种原因引起的水钠潴留。
2.血清总蛋白浓度增高
(1)蛋白质合成增加:
大多见于多发性骨髓瘤患者,此时主要是异常球蛋白增加,使血清总蛋白增加。
(2)血浆浓缩:
如急性脱水(如呕吐、腹泻、高烧等),外伤性休克(毛细血管通透性增大),慢性肾上腺皮质功能减退(尿排钠增多引起继发性失水)。
【注意事项】
1.黄疸血清、严重溶血;葡萄糖、酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰,故用标本空白管来消除。
但如标本空白管吸光度太高,可影响测定的准确度。
2.高脂血症混浊血清会干扰比色,可采用下述方法消除:
取2支带塞试管或离心管,各加待测血清0.1ml,再加蒸馏水0.5ml和丙酮10ml,塞紧并颠倒混匀10次后离心,倾去上清液,将试管倒立于滤纸上吸去残余液体。
向沉淀中分别加入双缩脲试剂及双缩脲空白试剂,再进行与上述相同的其他操作和计算。
3.本法也可用于血清总蛋白浓度的标化,测定的操作步骤完全与测定标本时相同,但显色温度须控制在(25±1)℃的范围内,以及使用经过校正的高级分光光度计(波长带宽≤2nm,比色杯光径为准确1.0cm)进行比色。
然后再按下式计算标化结果:
式中0.298为蛋白质双缩脲络合物的比吸光系数。
即按Doumas双缩脲试剂的标准配方,在上述规定的测定条件下,双缩脲反应液中蛋白质浓度为1.0g/L时的吸光度。
【评价】
1.双缩脲显色反应仅和蛋白质中肽键数成正比关系,与蛋白质的种类、分子量及氨基酸的组成无明显关系,各种蛋白质的显色程度基本相同。
2.本法重复性好,RCV为4%,CCV为3.9%;线性范围为0~140g/L;本法干扰少,并且大多可以避免;使用单一的稳定试剂,操作简便、快速,既适于手工操作,也便于自动化分析,已被推荐为测定血清总蛋白的参考方法。
3.唯一的缺点是灵敏度较低,比酚试剂法低约100倍。
但本法的检出限为0.2~1.7g/L,这相当于70g/L的血清3~24μl,已能满足临床生化检验的需要。
4.本法是临床测定血清总蛋白质首选最方便、最实用的常规方法。
5.临床上常见的血清蛋白定量法主要有双缩脲法、临床折射计法、染料结合法、BCA法和免疫比浊法。
实验35溴甲酚绿法测定血清白蛋白
【原理】血清白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷,在有非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的染料溴甲酚绿(bromocresolgreen,BCG)结合形成蓝绿色复合物,在波长630nm处有吸收峰,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比例,与同样处理的白蛋白标准比较,可求得血清中白蛋白含量。
【试剂与器材】可购商品试剂或自配。
1.0.5mol/L琥珀酸缓冲贮存液(pH4.0)称取NaOH10g和琥珀酸56g,溶于蒸馏水800ml中,用1mol/LNaOH溶液调至pH4.1±0.05后,加蒸馏水定容至1L。
置4℃冰箱保存。
2.10mmol/LBCG贮存液称取BCG(MW=720.02)1.80g溶于1mol/LNaOH溶液5ml中,加蒸馏水至250ml。
3.叠氮钠贮存液称取叠氮钠4.0g溶于蒸馏水中,配成100ml。
4.聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)贮存液称取Brij-3525g溶于蒸馏水约80ml中,加温助溶,冷却后加蒸馏水至100ml。
室温可稳定一年。
5.BCG试剂在1L容量瓶内加蒸馏水约400ml,琥珀酸缓冲贮存液100ml,用吸管准确加入BCG贮存液8.0ml,并用蒸馏水冲洗吸管壁上残留的染料,加叠氮钠贮存液2.5ml、Brij-35贮存液2.5ml,最后加蒸馏水至刻度,混匀。
此溶液pH应为4.15±0.05,盛于加塞的聚乙烯瓶内。
在室温保存可稳定半年。
6.60g/L白蛋白标准液称取人血清白蛋白6g、叠氮钠50mg,溶于蒸馏水中并缓慢搅拌助溶,配成100ml。
密封贮存于4℃冰箱,可稳定半年。
也可用定值参考血清白蛋白标准。
7.仪器自动生化分析仪或分光光度计。
【操作步骤】
1.生化自动分析仪分析法各参数见有关仪器操作说明书。
2.手工操作法
(1)手工操作参数:
波长630nm,光径1cm;温度:
室温;模式:
终点法;反应时间:
30秒;样品量:
0.02ml;试剂量:
4ml。
(2)操作:
取试管3支,按表7-3操作。
表7-3BCG法测定白蛋白操作步骤
加入物(ml)空白管标准管测定管
血清--0.02
白蛋白标准液-0.02-
蒸馏水0.02--
BCG试剂4.04.04.0
在波长630nm处用空白管调零,用定量加液器加BCG试剂,与测定管血清混合后,立即在30±3s内,读取吸光度。
如标本因严重高脂血症而混浊,需加做标本空白管(取血清0.02ml,加入琥珀酸缓冲贮存液4.0ml),用琥珀酸缓冲贮存液调零,测定标本空白管吸光度。
用测定管吸光度减去标本空白管吸光度后,再计算结果。
【计算】
同时用双缩脲法测定血清标本中总蛋白浓度,减去血清白蛋白浓度即为球蛋白浓度,并可求得血清白蛋白、球蛋白比值(A/G比值)。
【参考范围】正常成人35~55g/L。
【临床意义】
1.血清白蛋白浓度增高常见于严重脱水所致的血浆浓缩。
2.血清白蛋白浓度降低在临床上比较重要和常见,通常与总蛋白降低的原因大致相同。
急性降低主要见于大出血和严重烧伤;慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功能受损、肠道肿瘤及结核病伴慢性出血、营养不良和恶性肿瘤等。
血清白蛋白低于20g/L,临床上出现水肿。
3.A/G比值某些病人可同时出现白蛋白减少和球蛋白升高的现象,严重者A/G比值<1.0,这种情况称为A/G比值倒置。
4.文献报导还有极少见的因白蛋白合成障碍,血清中几乎没有白蛋白的先天性白蛋白缺乏症。
【注意事项】
1.BCG是一种pH指示剂,变色域为pH3.8(显黄色)~5.4(显蓝绿色),因此控制反应液的pH是本法测定的关键。
2.配制BCG试剂也可用其他缓冲液如枸橼酸盐或乳酸盐缓冲液。
但以琥珀酸盐缓冲液的校正曲线通过原点,线性好,灵敏度高,成为首选推荐配方。
3.试剂中的Brij-35也可用其他表面活性剂代替,如吐温-20或吐温-80,终浓度为2ml/L,灵敏度和线性范围不变。
4.当60g/L的白蛋白标准液与BCG结合后,溶液光径1.0ml,在630nm处测定的吸光度应为0.811±0.035,如达不到此值,表示灵敏度较差。
5.蛋白质标准是一个复杂问题。
实验证明,BCG不但与白蛋白呈色,而且与血清中多种蛋白质成分呈色,其中以α1-球蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白更为显著,其反应速度较白蛋白稍慢。
由于在30s内呈色对白蛋白特异,故BCG与血清混合后,在30s读取吸光度,可明显减少非特异性呈色反应。
为了减少本法基质效应的影响,最好用参考血清作标准。
【评价】
1.本法操作简便、快速,胆红素、溶血和中度脂血无干扰,既可手工操作,也能自动化分析,是目前国内测定血清白蛋白的最常用方法。
2.本法线性范围为10~60g/L,RCV<4%。
但该法与溴甲酚紫法比较,对血清白蛋白特异性稍差。
3.血清白蛋白测定法主要有色氨酸含量法、染料结合法、电泳法、免疫化学法和电化学测定法。
附:
溴甲酚紫法测定血清白蛋白
【原理】在pH5.2的缓冲液中,有Brij-35存在时,溴甲酚紫(bromocresol-puple,BCP)可与白蛋白结合形成绿色复合物,在603nm波长处的吸光度与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,便可计算血清中的白蛋白浓度。
【试剂与器材】可采用商品试剂或自配。
1.250g/LBrij-35溶液见BCG法。
2.50mmol/LBCP贮存液称取BCP675mg溶于无水乙醇15ml中,当溶液变为橙色透明时,用无水乙醇稀释至25ml。
置4℃冰箱保存至少可稳定3个月。
3.BCP试剂称取无水醋酸钠6.03g(或三结晶水的醋酸钠10g)溶于蒸馏水950ml中,加Brij-35液1ml,BCP贮存液1ml,用2.5mol/L醋酸溶液(AR级的醋酸150ml用蒸馏水稀释到1L)调pH至5.20±0.03(约需10ml),加蒸馏水至1L(BCP贮存液也可在调好pH后再加)。
在室温可稳定一周。
4.0.154mol/LNaCl溶液称取NaCl9g用蒸馏水溶解到1L。
5.白蛋白标准液采用人白蛋白或定值人血清,切不可用动物血清白蛋白。
【操作步骤】
1.生化自动分析仪分析法参数按仪器说明书的要求设定。
2.手工法操作取试管3支,按表7-4操作。
表7-4BCP法测定白蛋白操作步骤
加入物(ml)空白管标准管测定管
血清--0.025
白蛋白标准液-0.025-
0.154mol/LNaCl溶液0.025--
BCP试剂5.05.05.0
混匀,1min后在波长603nm处比色,用空白管调零,读取测定管和标准管吸光度。
【计算】
【参考范围】正常成人36~46g/L。
【注意事项】
1.BCP溶液pH须严格控制在5.20±0.03范围内。
2.严重脂肪混浊血清对测定有干扰,应加做标本空白管(血清0.025ml加0.154mol/LNaCl溶液5.0ml)予以校正。
【评价】本法反应最适pH为5.20,接近α-和β-球蛋白的等电点,抑制了这两种球蛋白与BCP的非特异性反应,故对测定白蛋白具有高特异性。
此外,BCP与白蛋白的反应为即时完全反应,不受时间和温度变化的影响,呈色后稳定1h以上。
本法线性范围5~50g/L,在10~40g/L呈良好线性,50g/L时稍偏低;CV为0.45%;回收率99.3%~102%,平均回收率100.5%。
本法兼有BCG法的主要优点,克服了BCG法的多数缺点,与火箭电泳法结果相一致,成为测定血清白蛋白染料结合法中较好的一个方法。
BCP与牛、猪(新鲜或冻干)血清反应性仅为BCG反应的1/3,不适用于动物血清白蛋白作质量控制,机制尚待阐明。
实验36免疫透射比浊法测定前白蛋白
血清前白蛋白(pre-albumin,PA)是由4个相同亚基组成的四聚体,分子量为55.0kD,含糖量0.5%,含色氨酸3.15%。
在pH8.6时的电泳速度较白蛋白(Alb)快(约快25%)。
其在体内的半衰期(t1/2)(1.9d)明显比Alb(17~21d)短。
血清PA测定目前以免疫比浊法应用最多,其次是免疫扩散技术。
免疫比浊法以其测定原理,可分散射比浊(nephelometry)和透射比浊(turbidimetry)二类。
前者是利用溶液中抗原抗体反应形成的复合物微粒被一定波长的光照射时发生散射,通过检测散射光强度,计算出样品中PA量。
后者则是基于抗原抗体复合物微粒形成后,使透过光减少,根据吸光度值推算PA量。
本文介绍免疫透射比浊法测定前白蛋白。
【原理】当抗体(即抗PA)浓度过量且固定时,抗体与被测抗原(PA)反应所形成的免疫复合物的量与吸光度值成正比,即与样品中PA量成正比。
【试剂】
1.20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)。
2.50g/L聚乙二醇(PEG)-6000溶液称取5gPEG-6000,NaN3100mg,用20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)溶解,并加至100ml刻度,混匀,4℃保存。
3.样品稀释液取20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)100ml,加Brij-3530mg溶解后于4℃保存。
4.前白蛋白抗血清(抗PA)应用液抗PA(效价1:
60,上海生物制品研究所生产)1ml加50g/L聚乙二醇(PEG)溶液5.0ml,混匀,4℃放置24h,3000r/min离心30min,弃沉淀,上清液为抗PA应用液
5.PA参考血清PA参考血清复溶后,用样品稀释液稀释成相当于原血清PA浓度0.05、0.10、0.20、0.30、0.40g/L。
【操作步骤】
1.标本血清、血浆均可用,以用血清者居多。
宜空腹采静脉血。
血清按常规方法制备。
血清贮于4℃或-20℃,10d内稳定;室温放置,2d内稳定。
如当日不能测定,推荐将血清保存于-20℃,1周内完成测定。
血清应避免严重的溶血和脂浊。
明显脂浊的血清,在条件许可时,最好作高速离心(100000×g离心20min)处理,以除尽乳糜微粒和大部分前-β脂蛋白。
2.自动生化仪(以ENCOREI型为例)分析主要分析参数:
方法类型:
终点法;反应温度:
30℃;波长:
340nm;杯径1cm;样品量:
4倍稀释血清40μl;PA参考品:
设0.05、0.1、0.2、0.3和0.4g/L5种浓度,其4倍稀释度各40μl;6倍稀释抗PA量:
250μl;20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)量:
30μl;开始读数时间:
90s,最终读数时间:
270s;读数间隔时间:
10s;样品空白:
定时空白方式(抗原抗体混合后6s和反应平衡后各读一次A340)。
【计算】
【参考范围】见表7-5。
表7-5不同年龄正常人血清PA水平(透射比浊法)
年龄nmg/L(x±s)作者
0~4天103118(73~144)HamLin等
1月~4岁25116(67~171)
5~11岁24149(91~220)
12~20岁22207(124~302)
20~64岁男45307(207~376)
女62264(193~355)
65~74岁45238(195~289)
75~80岁14216(184~292)
85~98岁26204(113~263)
【临床意义】
1.在肝病中的意义由于PA半衰期比Alb短,肝脏疾病时血清PA变化较Alb早,有30%肝病患者血清Alb正常而PA降低。
急性、亚急性重症肝炎起病后1周内,PA的降低远较血清Alb敏感。
大量临床观察显示,各型肝炎患者(病毒性肝炎、乙醇性肝炎和药物性肝炎)血清PA水平均有不同程度降低,以肝硬化和重症肝炎降低最著。
动态随访测定血清PA,可作为预测重型肝炎预后的灵敏指标,对估计预后具有较大参考价值。
2.在恶性肿瘤诊断中的意义PA测定对癌症的诊断具有诊断价值。
由于测定血清PA比检测甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA)简单,方便,PA似可作为筛选指标,用于恶性肺癌的普查,发现病人。
研究证实,血清PA与血清类粘蛋白(Orosomtlcoid,OM)同时测定,求出类粘蛋白/PA比值(OPR),用于肺癌的诊断、疗效评价和预后预测比PA单项指标敏感,因而更具价值。
3.在营养不良评估中的意义PA以其短半衰期和高色氨酸含量,一直被认为是评价蛋白质和(或)热卡缺乏的灵敏指标。
此外,在感染或组织损伤引起的急性时相反应期间,PA也可降低。
血清PA,在无感染情况下,是儿童营养不良的灵敏生化标志。
PA可能是急性时相代谢性影响引起的实际营养不良的更灵敏的早期评价指标。
PA和视黄醇结合蛋白、运铁蛋白可作为评价病人营养状态的灵敏生化标志。
一般认为,血清PA低于110mg/L,视黄醇结合蛋白低于16mg/L,运铁蛋白低于1.5g/L,Alb低于30g/L,表明营养不佳,应及时补充营养。
如PA水平达到>135mg/L,表示营养状况已恢复到稳定状态。
【评价】
1.本法的灵敏度(最低检测限0.008g/L),准确度(平均回收率98.6%)和精密度(批内、批间CV分别为2%、4.9%)较高。
2.溶血(Hb<5g/L),胆红素(TBil<170μmol/L)对本法无干扰。
这可能与本法设定时空白方式(相当于样品空白)有关。
3.本法设有抗原过量监测。
在反应开始后150~270s期间,ΔA340/min值变化应<3.5%。
如此值大于3.5%,仪器对测定结果标志“抗原过量”,此时应提高样品的稀释倍数后重新测定。
4.免疫透射比浊法(Immunoturbidimetry,IT)测定血清PA的优点是可使用普通分光光度计或自动生化仪,故更适合于常规应用。
该法的不足是易受脂血干扰,可呈正干扰或负干扰。
溶血和黄疸对该法也有干扰,但可通过加做样品空白,得到较好的解决。
在自动生化仪上用IT法测定PA时,可采用定时空白方式,即在抗原抗体混合后立即(A1)和反应达平衡后(A2)各读一次吸光度,A1为空白吸光度,代表试剂、样品和抗血清在抗原抗体反应前的吸光度值。
当反应平衡后测得的吸光度值(A2)减去A1,可校正溶血、胆红素的干扰。
实验37凝固(Clauss)法定量测定纤维蛋白原
纤维蛋白原(Fibrinogen,Fbg)即凝血因子Ⅰ,是血液中含量最高的凝血因子,Fbg具有双重生物活性,既是凝血酶作用的底物又是高浓度纤溶酶的靶物质。
因此,Fbg在凝血系统和纤溶系统中同时发挥着重要作用。
Fbg检测的方法很多,根据检测原理不同可分为三大类:
①根据Fbg的生物学特性建立的方法,如凝固(Clauss)法。
②根据Fbg的理化特性建立的方法,如盐析沉淀法、盐析比浊法或热沉淀比浊法。
③根据Fbg的免疫学特性建立的方法,如双抗体夹心ELISA法、免疫电泳法或免疫扩散法。
本文介绍根据Fbg的生物学特性建立的方法——凝固(Clauss)法定量测定纤维蛋白原。
【原理】于稀释不同浓度的标化血浆和待测血浆中加入过量的凝血酶,后者作用于Fbg使之转变为纤维蛋白。
当Fbg完全转变为纤维蛋白时为凝固终点,凝固终点所对应的时间为凝固时间。
以标化血浆的不同Fbg含量为横坐标,各凝固时间为纵坐标绘制校正曲线,凝固时间与血浆Fbg含量呈负相关。
待测样本的凝固时间通过计算或查校正曲线即可得到Fbg含量。
【试剂与器材】可采用商品试剂或自配。
1.凝血酶冻干品。
2.标化(参比)血浆定值2.95g/L。
3.样本稀释剂。
4.仪器自动或半自动凝血仪。
【操作步骤】
1.血浆标本的制备以10.9mmol/L枸橼酸钠为抗凝剂,于硅化玻璃试管或塑料试管内按抗凝剂与血液1:
9的比例采集空腹静脉血(0.2ml抗凝液+1.8ml全血),立即充分混匀。
3000r/min离心10min,收集上层液获得缺乏血小板血浆。
2~8℃保存,不宜超过6h。
2.手工方法
(1)准备:
将每瓶凝血酶用2.5ml蒸馏水轻摇溶解。
将每瓶标化血浆用1.0ml蒸馏水轻摇复溶。
将待测血浆用样本稀释剂作1:
10稀释(100μl血浆+1000μl缓冲液)。
(2)校正曲线制备:
将复溶后的标化血浆用样本稀释剂分别作1:
5、1:
10、1:
15、1:
20稀释。
取不同稀释度标化血浆各200μl于试管中,37℃水浴3min,然后分别加入37℃预温凝血酶溶液100μl,立即启动秒表,记录凝固时间(s)。
(3)标本测定:
取待测稀释血浆200μl于试管中,37℃水浴3min,加入37℃预温凝血酶溶液100μl,立即启动秒表,记录凝固时间(s)。
3.凝血仪分析
(1)校正曲线制备:
按试剂说明将标化血浆稀释为不同浓度,分别加入过量的凝血酶,37℃孵育,405nm波长测定其凝固时间。
(2)标本测定:
按试剂说明将待测血浆稀释一定倍数,加入过量的凝血酶,37℃孵育,405nm测定其凝固时间。
【计算】以不同浓度Fbg标化血浆含量(g/L)为横坐标,以相应的凝固时间(s)为纵坐标,在双对数坐标纸上作校正曲线,待测标本Fbg含量可通过计算或从校正曲线上直接读出。
【参考范围】正常成人2.0~4.0g/L。
【临床意义】
1.Fbg增加纤维蛋白原是一种急性时相蛋白,其增加往往是机体的一种非特异反应,常见于下列疾病:
(
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- 血清 蛋白质 测定