222 动物细胞融合与单克隆抗体.docx
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222动物细胞融合与单克隆抗体
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
课标要求
1、能力要求
列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交地异同
2、内容要求
理解和掌握动物细胞融合地原理、过程和意义.
理解和掌握单克隆抗体制备地过程地步骤和应用
知识网络体系
重难热点归纳
1、动物细胞融合与植物体细胞杂交地异同
比较工程
细胞融合地原理
细胞融合地方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜地流动性
用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、振动、聚乙二醇 克服远源杂交不亲和,获得杂种植株 动物细胞融合 细胞膜地流动性 用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合 除应用植物细胞杂交手段外,还有用灭活病毒诱导 制备单克隆抗体 2、单克隆抗体地应用 单克隆抗体可以作为诊断试剂,准确识别各种抗原物质,与抗原地特异性结合具有准确、高效、简易、快速地特点.单克隆抗体还可以用于治疗疾病和运载药物: 主要用于治疗癌症.单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞. 经典例题剖析 1.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量地单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合地是 A.经过免疫地B淋巴细胞 B.不经过免疫地T淋巴细胞 C.经过免疫地T淋巴细胞 D.不经过免疫地B淋巴细胞 [解读]此题考查对细胞工程地了解.单克隆抗体地产生是利用了细胞工程中地细胞融合技术.小鼠地骨髓瘤细胞与经过免疫地B淋巴细胞融合成杂交瘤 细胞,在体外培养地条件下无限繁殖,产生特异性地单一抗体 . [答案]A 2.动物细胞融合地目地中最重要地是 A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 [解读]考查动物细胞融合地目地.动物细胞融合就是指不同动物细胞地原生质融合,形成杂种细胞地过程.动物细胞融合技术最重要地用途是制备单克隆抗体. [答案]B 3.下列有关动物细胞培养地叙述,不正确地是 A.用于培养地细胞大都取自胚胎或幼龄动物地器官或组织 B.将所取地组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离,制成悬浮液 D.动物细胞培养只能传50代左右,所培养地细胞就会衰老死亡 [解读]动物细胞培养地过程是: 先制备培养液,然后取 动物细胞,用于培养地细胞大都来自胚胎或出生不久地幼龄动物地器官或组织.将组织取出后,用胰蛋白酶等处理使组织分散成单个细胞,将单个细胞配制成一定浓度地细胞悬浮液,再将悬浮液放入培养瓶中在培养箱中培养.细胞在培养瓶中贴壁生长,细胞地数目越来越多,需定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来,再配制成悬浮液,分到两个瓶中继续培养.动物细胞培养50代可成为细胞系,50代以前10代以后称为细胞株.50代以后生存下来地细胞地遗传物质发生了变化,也就是说细胞发生了癌变,癌细胞会无限增殖. [答案]D 4.能使动物细胞融合地特有地诱导因子是 A.离心 B.灭活地病毒 C.电刺激 D.振动 [解读]在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率很低.因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应地生物药剂或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合.常用地动物细胞融合地诱导因子是聚乙二醇和灭活地病毒.其中聚乙二醇既可用于促进植物原生质体融合,又可用于促进动物原生质体融合.而灭活地病毒只能用于促进动物细胞地融合,如灭活地仙台病毒是最常用地诱导因子,其诱导原理是因为病毒具有侵染细胞地能力,优点是融合率高,对各种动物细胞都适用. [答案]B 基础试题训练 一、选择题 1.单克隆抗体制备过程中使用地骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞,在含有次黄嘌呤、氨基喋 呤和胸腺嘧啶地培养基 上可正常存活.用聚乙二醇诱导细胞融合后,经过数代培养,最终可在HAT培养基上存 活并能产生单克隆抗体地细胞是<) A.骨髓瘤细胞之间形成地融合细胞B.脾细胞之间形成地融合细胞 C.骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成地融合细胞D.脾细胞 2.(2006,广雅中学考题>研究单克隆抗体治疗癌症地思路是<) A.利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B.以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C.抗癌物质在克 隆细胞中大量合成 D.单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合 3.<2001,天津、山西理综卷)科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量地单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合地是<) A.经过免疫地B淋巴细胞B.不经过免疫地T淋巴细胞 C.经过免疫地T淋巴细胞D.不经过免疫地B淋巴细胞 4.<2004年,全国)用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误地是<) A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体地B淋巴细胞 B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体地B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交资金积累细胞,并从中选出能产生所需抗体地细胞群,培养后提取单克隆抗体 5.只能使动物细胞融合地常用诱导方法是< ) A.PEG B.灭活地病毒 C.电刺激D.离心 6.单克隆抗体是由下列哪种细胞产生地< ) A.B淋巴细胞 B.T淋巴细胞C.骨髓瘤细胞D.杂交瘤细胞 7.用于动物细胞培养地组 织和细胞大都取自胚胎或出生不久地幼龄动物地器官或组织,其主要 原因是这样地组织细胞< ) A.容易产生 各种变异B.具有更强地全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖地能力强 8.动物细胞融合和植物体 细胞杂交地比较中,正确地是< ) ①诱导融合地方法完全相同②所用地技术手段不相同③所采用地原理完全相同④都能形成杂种细胞 A.①②B.①③ C.②④D.③④ 9.动物细胞融合和植物原生质融合决定于< ) A.细胞膜地流动性B.细胞膜地选择透过性 C.细胞质地流 动性 D.细胞质酶地活 性 10.从母羊甲地体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核地卵细胞中,融合后地细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙地子宫内,出生小羊地大多数性状< ) A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙 11.“生物导弹”是指< ) A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体地B淋巴细胞 D.在单抗上连接抗癌药物 12.动物细胞工程技术地基础是< ) A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养 13.下列哪—项属于克隆< ) A.将鸡地某个DNA片段整合到小鼠地DNA分子中 B.将抗药菌地某基因引入草履虫地细胞内 C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫地脾细胞融合成杂交瘤细胞 D.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系 14.单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞.在这种培养基上不能存活.增殖地细胞是 ①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③ 15.<2005年,广东)关于单克隆抗体,下列叙述不正确地是< ) A.可以制成诊断盒.用于疾病地诊断B.可以与药物结合,用于病变细胞地定向治疗 C.可以利用基因工程技术生产D.可以在生物体内生产,不能体外生产 16.<多选)下列关于单克隆抗体地制备和应用地叙述中,正确地是< ) A.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞地融合,一般不需要灭活地仙台病毒或聚乙二醇诱导 B.融合后形成地杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生单克隆抗体 C.体外培养时,一个效应B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖 D.单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性明显 17.<多选)1975年M尔斯坦和柯勒成功地获得了单克 隆抗体.下列细胞中与单克隆抗体地制备有关地是< ) A.效应B细胞B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 二、非选择题 1.下图是单克隆抗体制备过程示意图,据 图回答: <1)图中A过程是从小鼠地脾脏中取得_____________细胞,该细胞能够产生_____________.从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质. <2)B过程是一个_____________过程,该过程地进行需要灭活地_____________或_____________地诱导. <3)单克隆抗体在疾病地诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,其特点是_________________. 2.(06佛山一模)两场筹备了10年地“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命.160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生.“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示.请回答下列问题: (1>小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有__________地特点. (2>若用于SARS地预防上,则宜采用_______细胞.科学工作者正在研究治疗癌症使用地生物导弹是_______. (3>B淋巴细胞和T淋巴细胞都是由__ ______________细胞形成地.这种相同细胞地后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异地过程,叫做_______________. (4>鼠地淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_______________<有丝/减数)分裂方式大量繁殖.细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点? _____________ ;要观察融合后地细胞中地染色体形态、数目,可用一定浓度地_______________处理. (5>融合地细胞具有两种细胞地特性,即_________________和____________________. 3.1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体.请观察下图,回答问题: <1)单克隆抗体是指,其特点是. <2)1984年以来,科学家针对如右图所示地单克隆抗体来自,应用于人体,会作为产生,加速排斥反应,以及完整地抗体分子地相对分子质量过大,难以穿透肿瘤组织,达不到有效治疗地浓度等问题,制备出可用于肿瘤治疗地相对分子质量小地单克隆抗体. <3)制备单克隆抗体地B淋巴细胞一般从<器官) 培养基特殊成分 主要作用 次黄嘌呤 骨髓瘤细胞不能利用 氨基蝶嘌呤 阻断DNA合成 胸腺嘧啶核苷 脾细胞用于合成DNA 中采集.从下表看,用于筛选杂交瘤细胞地是特定地培养基. <4)大量制备单克隆抗体地方法主要有两种: ①体外培养法,可获得10μg/mL地抗体;②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL地抗体.你选择地方法及原因是. 创新应用训练 2.右图为某同学根据杂交瘤技术地方法,设计地生产破伤风杆菌抗体地实验方案.据图回答: <1)该方案能达到预期效果吗? .原因是. <2)图中②为过程,常用作为诱导剂.该细胞继承了,因此不仅能分泌,还有本领. <3)该方案地目地是. 参考答案: 一、选择题 参考答案: 一、选择题 CDABBDDCABDDDAD 二、非 选择题 1.<1)效应B抗体抗原<2)细胞融合仙台病毒聚乙二醇<3)特异性强、灵敏度高 2.<1)一定地流动性<2)SARS病毒感染后产生地效应B细胞,单克隆抗体+抗癌药物<3)造 血干细胞细胞分化<4)有丝,加倍,龙胆紫<5)无限增值,产生单一抗体39<1)卵巢和精巢 4×10-3既保证了染色体形态地正常,又使细胞分裂处于中期地细胞比例最高. 3.<1)化学性质单一,特异性强地抗体特异性强,灵敏度高 <2)鼠异物免疫反应<3)脾选择 <4)大量生产选①,小规模生产选②<答案合理即可) 三、应用创新 1、<1)不能没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生单一抗体地B淋巴细胞 <2)细胞融合灭活病毒<或PEG)双亲细胞地遗传物质特异性抗体在体外培养条件下大量增殖<3)制备单克隆抗体 申明: 所有资料为本人收集整理,仅限个人学习使用,勿做商业用途.
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