高中生物人教版选修1教学案专题三 课题1 菊花的组织培养含答案.docx
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高中生物人教版选修1教学案专题三课题1菊花的组织培养含答案
2019-2020年高中生物人教版选修1教学案:
专题三课题1菊花的组织培养(含答案)
1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性。
2.植物组织培养的一般过程为:
3.影响植物组织培养的因素有:
植物材料、营养物质、植物激素及pH、温度、光照等。
4.菊花茎段组织培养一般选择未开花的植株茎上部新萌生的侧枝,且培养基中不必添加植物激素。
5.生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
6.菊花组织培养的实验操作流程:
制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。
一、植物组织培养的基本过程
1.理论基础:
植物细胞的全能性。
2.细胞分化:
在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
3.基本过程
(1)愈伤组织:
由离体的植物组织或细胞经脱分化形成的一团排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
(2)脱分化:
又叫去分化,是由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
(3)再分化:
愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。
二、影响植物组织培养的因素
1.植物材料
(1)不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。
(2)同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
2.营养物质
(1)大量元素,如N、P、K、Ca、Mg、S。
(2)微量元素,如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。
(3)有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。
3.植物激素:
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,二者的浓度、使用的顺序及用量的比例等都会影响实验结果。
4.环境条件:
如pH、温度、光照等,进行菊花的组织培养一般将pH控制在5.8左右,温度控制在18~22℃,并且每日用日光灯照射12h。
三、菊花组织培养的实验操作
→→→→→
1.制备MS固体培养基:
配制各种母液―→配制培养基―→灭菌。
2.外植体消毒:
取菊花嫩枝―→流水冲洗―→加洗衣粉刷洗―→流水冲洗20min吸干,体积分数为70%的酒精消毒6~7s―→无菌水清洗质量分数为0.1%的氯化汞溶液消毒1~2min―→无菌水清洗(至少3次)。
3.接种:
菊花茎段插入培养基时注意方向,不要倒插。
每瓶接种6~8块外植体。
4.培养:
最好放在无菌箱中培养,并定期消毒。
培养温度控制在18~22_℃,并且每日用日光灯照射12_h。
5.移栽:
移栽前应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日。
然后用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤中。
6.栽培:
将幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花。
1.植物学家将胡萝卜根的韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放入特定的培养基中培养,获得了许多完整的植株。
此过程依据的原理和技术是( )
A.细胞的分裂和细胞工程
B.细胞的分化和基因工程
C.细胞的全能性和组织培养
D.花药离体培养和单倍体育种
解析:
选C 由单个细胞到完整植株,依据的原理是植物细胞的全能性,该过程是植物组织培养。
2.在植物组织培养过程中,愈伤组织的形成和形态的发生是十分关键的。
这除需要必备的营养和一些刺激因素外,还需要有诱导作用的物质,它们是( )
A.铜、锌等微量元素 B.细胞分裂素和生长素
C.蔗糖和葡萄糖D.维生素和氨基酸
解析:
选B 愈伤组织的形成除了必备的营养和一些刺激因素外,还需加入植物激素,如细胞分裂素和生长素等,用以调节细胞分裂和分化。
3.当先使用细胞分裂素后使用生长素时,实验结果是( )
A.有利于细胞分裂,但细胞不分化
B.细胞既分裂又分化
C.分化频率提高
D.有利于细胞分化,但细胞不分裂
解析:
选B 细胞分裂素和生长素的使用顺序不同,培养的结果不同。
先使用生长素后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂,但细胞不分化;先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂又分化;两者同时使用,细胞分化频率提高。
4.下列关于植物组织培养中的灭菌和消毒操作,叙述错误的是( )
A.外植体可以用酒精消毒
B.镊子等器械只需用酒精消毒
C.操作前双手需用酒精消毒
D.培养基需用高压蒸汽灭菌
解析:
选B 植物组织培养需要严格的无菌操作,包括培养基及其他器械需进行灭菌,操作者双手需用体积分数为70%的酒精擦拭消毒,外植体应浸泡在酒精中消毒,整个操作过程在酒精灯火焰旁进行。
5.下列符合菊花组织培养基本步骤的是( )
A.制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培
B.制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→栽培→移栽
C.制备MS培养基→外植体消毒→接种→栽培→培养→移栽
D.制备MS培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培
解析:
选A 植物组织培养的操作程序为“制备MS培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培”。
接种后先培养再移栽,最后是栽培。
1.细胞的全能性
(1)概念:
指已经分化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。
(2)原因:
生物体的每一个体细胞都是由受精卵经有丝分裂而来的,含有本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全套基因。
(3)植物细胞表达全能性的条件:
①离体状态;②一定的营养物质;③植物激素;④其他适宜的外界条件(温度、pH、氧气、光照、无菌等)。
(4)细胞全能性大小与细胞种类的关系:
受精卵>生殖细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞;分化程度低的细胞>分化程度高的细胞。
2.MS培养基中各成分的作用
成分
作用
微量和大量元素
提供植物细胞生活所必需的无机盐
蔗糖
提供碳源,维持细胞渗透压
甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇等
满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的对特殊营养需求
3.植物组织培养的基本过程分析
名称
过程
形成体特点
条件
脱分化
由外植体形成愈伤组织
排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团
①离体
②提供营养物质(有机物、无机物)③提供激素④提供其他适宜条件
再分化
由愈伤组织形成幼苗或胚状体结构
有根、芽或有生根发芽的能力
营养生长生殖生长
发育成完整的植物体
由根、茎、叶、花、果实、种子组成
栽培
4.植物激素在植物组织培养过程中的作用
在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。
其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
(1)激素使用的先后顺序产生的影响:
使用顺序
实验结果
先使用生长素,后使用细胞分裂素
有利于细胞分裂,但细胞不分化
先使用细胞分裂素,后使用生长素
细胞既分裂也分化
同时使用
分化频率提高
巧记为:
“先生”,分裂不分化;“后生”,分裂又分化;“同使”,分化频率高
(2)激素用量比例产生的影响:
生长素/细胞分裂素比值
结果
比值高时
促根分化,抑芽形成
比值低时
促芽分化,抑根形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
简记为“高根、低芽、中愈伤”
[题组冲关]
1.下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法,不正确的是( )
A.植物组织培养中的关键激素是生长素和细胞分裂素
B.先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂和分化
C.先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂也分化
D.同时使用生长素和细胞分裂素时,两者用量的比例影响植物细胞的分化方向
解析:
选B 在植物组织培养中,先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂,但细胞不分化;先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂也分化。
2.下图是植物组织培养的简略表示图。
请据图回答:
(1)把组织培养的过程按正确顺序排列_______________________________________
(用字母和箭头表示)。
(2)外植体发育成一个完整个体需经过________和________两个过程。
(3)外植体若是菊花的根尖组织,则在正常环境下培养成的新菊花植株叶片的颜色是______,这一过程体现了植物细胞具有__________的特点。
解析:
植物组织培养的基本过程:
外植体脱分化形成愈伤组织,愈伤组织经再分化,形成根和芽。
根据图中的植物发育情况可以看出组织培养的顺序为B→D→C→A。
由根尖细胞培养成的新植株的叶片之所以是绿色的,是因为由愈伤组织分化而来的叶片细胞中,控制叶片绿色性状的基因选择性表达,体现了植物细胞的全能性。
答案:
(1)B→D→C→A
(2)脱分化 再分化 (3)绿色 全能性
1.实验流程及注意事项
[名师点拨] 无菌技术是植物组织培养成功的关键
由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高。
用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。
培养材料一旦被微生物(如细菌)污染,这些微生物就会争夺培养基中的营养,还会产生代谢废物毒害培养材料,导致实验失败。
因此要进行严格的无菌操作。
2.造成培养物污染的原因与处理
污染种类
细菌污染
真菌污染
污染原因
可能是由操作人员造成的,如未戴口罩、接种时说话、手未消毒或器械灭菌不彻底等
可能是由植物材料消毒不当引起的
处理措施
将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶进行清洗
[题组冲关]
3.关于生根的试管苗的移栽,下列说法不正确的是( )
A.关键是既要充分清洗根系表面的培养基,又不能伤及根系
B.一般使用无土栽培的办法
C.在培养基上移栽试管苗后要用5%的高锰酸钾消毒
D.新移栽的试管苗要在温室生长几天,等壮苗后再定植大田
解析:
选C 移栽生根的试管苗时,应提前对培养基进行消毒,而不是移栽后。
4.无菌条件是植物组织培养能否获得成功的关键,以下说法正确的是( )
①植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,因此对无菌操作的要求非常严格
②对培养基及器械要进行灭菌处理
③对培养材料进行表面消毒时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面还要考虑植物材料的耐受能力
④培养过程中不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待
⑤对培养材料可用高压蒸汽灭菌
⑥如果不小心引起污染,将可能造成培养工作前功尽弃
A.①②③④⑤ B.①②③④
C.①②③④⑥D.①②③④⑤⑥
解析:
选C 不同的材料或灭菌对象,所采用的灭菌方法不同,对培养材料不能采取高压蒸汽灭菌,否则会导致培养物死亡。
在操作过程中一定要严格无菌操作,以免杂菌污染,造成培养工作前功尽弃。
[随堂基础巩固]
1.下列各项中,不属于植物细胞表现出全能性必要条件的是( )
A.具有完整的细胞核
B.离体状态
C.导入其他植物细胞的基因
D.一定的营养物质和激素
解析:
选C 植物细胞(具有完整细胞核的细胞)只有在离体和一定营养物质及激素等的共同作用下,经脱分化形成愈伤组织,然后由愈伤组织再分化形成幼苗等才能表现出全能性。
导入其他植物细胞的基因与细胞全能性的表现无关。
2.下列关于愈伤组织的说法,正确的是( )
A.细胞大,排列整齐,分裂能力强
B.细胞高度液泡化,形状呈正方形
C.用叶培养形成的愈伤组织能够进行光合作用
D.细胞具有较高的全能性
解析:
选D 愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,还没有分化,具有较高的全能性。
3.植物组织培养中的“脱分化”过程是指( )
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞的过程
B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C.愈伤组织细胞分化为根与芽的过程
D.离体的植物组织、细胞经过培养产生愈伤组织的过程
解析:
选D 离体的植物组织或细胞在一定的培养条件下,先脱分化形成植物的愈伤组织,才可以再分化出根和芽,形成完整的植株。
而分化出根和芽的过程属于再分化。
4.影响植物组织培养的因素包括( )
①培养基的营养组成 ②外植体的选取 ③植物激素的使用 ④消毒 ⑤温度、pH、
光照
A.①②③④⑤B.①②③
C.①②③④D.①②③⑤
解析:
选A 培养基的营养组成、外植体的种类和生长发育状况、植物激素的浓度和使用顺序以及温度、光照、pH都是影响植物组织培养的因素,并且植物组织培养在离体、无菌条件下才能完成。
5.某生物兴趣小组用芦荟新鲜茎的一部分作为材料进行组织培养,出现了愈伤组织能正常形成且继续长大,但正常根和芽却迟迟不能形成的情况。
你认为导致该情况出现的最可能的原因是( )
A.葡萄糖、氨基酸等有机营养供应不足
B.培养环境光照、温度、pH或氧气浓度不适宜
C.生长素和细胞分裂素比例不协调
D.无菌条件没有控制好
解析:
选C 因为“愈伤组织能正常形成且继续长大”,说明培养基营养充足、环境条件适宜且没有受到杂菌污染;当生长素和细胞分裂素的比例达到一定值的时候,才能使愈伤组织分化出根和芽。
6.下列属于MS培养基和培养微生物所配制的培养基的主要区别是( )
A.MS培养基一般含植物激素,微生物培养基不含植物激素
B.MS培养基需要氨基酸,微生物培养基不含各种氨基酸
C.MS培养基需要碳源,微生物培养基不含碳源
D.MS培养基含维生素B1和维生素B2,而微生物培养基不含
解析:
选A MS培养基是用于植物组织培养的培养基,其中一般含有植物激素,而培养微生物的培养基中不含植物激素,MS培养基中需提供植物生长必需的大量元素和微量元素;另外,由于培养的微生物一般都是异养微生物,所以在微生物的培养基中以有机物为主,一般含有碳源、氮源和生长因子。
7.下图所示为植物组织培养的一般过程,请据图回答下列问题:
(1)对菊花来说,要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养,其原因是_____________
___________________________________________________________。
(2)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。
营养物质包括________和小分子有机物,激素包括__________和____________等植物激素。
(3)此过程要无菌操作,主要是指对________等进行灭菌消毒。
B阶段需要光照,原因是________________________________________________________________________。
(4)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶肉细胞具有叶绿素,这是基因________________的结果。
解析:
菊花的嫩枝组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝,主要因为其分裂、分化能力强。
培养基中应含有供组织细胞生长发育所需的各种营养成分,还有调节细胞分裂和分化的激素。
脱分化阶段细胞进行有丝分裂,再分化阶段愈伤组织细胞经有丝分裂和分化形成试管苗,此阶段需要光照,原因是叶绿素的合成需要光照条件。
答案:
(1)生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化
(2)无机物(或矿质元素) 生长素 细胞分裂素 (3)培养基 叶绿素的形成需要光照条件 (4)选择性表达
[课时跟踪检测]
一、选择题
1.下列实例中能体现出细胞全能性的是( )
①胡萝卜单个细胞培养成可育的植株
②受精卵形成种子的过程
③用烟草组织培养的单个组织培养出了可育的完整植株
④由种子发育成植株
A.①③④ B.①③ C.②③ D.①②③
解析:
选B 细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。
其中①和③都属于由分化的细胞经过培养形成可育的植株,体现了细胞的全能性。
受精卵形成种子,但没有发育成完整个体。
由种子发育成的植株实质上是由种子中的胚(新植物体的幼体)发育而来的。
2.下列关于植物组织培养的说法错误的是( )
A.一般来说进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养
B.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
C.在培养过程中要先让愈伤组织生根后再使其生芽
D.移栽生根的试管苗之前,先打开瓶口,让试管苗在培养间生长几日
解析:
选C 在培养过程中要先让愈伤组织生芽后再使其生根。
3.植物组织培养过程中发生脱分化时,可能发生变化的有( )
①植物细胞的形态结构 ②细胞内遗传物质 ③细胞内表达的基因 ④细胞分裂能力
A.①②③④B.①②③
C.①③④D.①②④
解析:
选C 脱分化是由高度分化的具有特定形态、结构和生理功能的细胞,在激素的诱导下,恢复到未分化状态的过程。
在该过程中,细胞原有的形态结构和功能丧失,而其细胞分裂能力增强,全能性表达能力增加,细胞内遗传物质不变。
4.关于影响植物组织培养的因素,说法正确的是( )
A.不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同
B.在植物组织培养中,培养基中必须添加植物激素
C.提高生长素的比例,有利于促进生根
D.外植体形成愈伤组织的过程需要光照
解析:
选C 不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料也会因年龄、保存时间的长短等导致实验难易程度不同;在植物组织培养中,培养基中常常要添加植物激素,但不是都必须添加植物激素;提高生长素的比例,有利于生根;经脱分化形成愈伤组织的过程不需要光照,试管苗形成后才需要见光培养。
5.在制备MS固体培养基的过程中,操作有误的是( )
A.提前配制的母液,一般在4℃条件下保存
B.配制母液时,无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍
C.配制培养基时,琼脂要及早加热熔化
D.MS培养基的pH要求不太严格,可控制为5~7
解析:
选D MS培养基的pH直接影响到细胞对离子的吸收,过酸或过碱都对植物材料有很大的影响,所以pH一般应控制在5.8左右。
6.菊花的组织培养需要严格的无菌操作,下列说法不正确的是( )
A.对分装好的培养基需进行高压蒸汽灭菌
B.用酒精对外植体进行消毒时,持续的时间不能太长
C.将菊花茎段插入时应注意方向,不应倒插,是为了防止杂菌污染
D.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间
解析:
选C 植物的组织培养需要严格的无菌操作;将菊花茎段插入时,不应倒插,原因是倒插的茎段不能形成愈伤组织,而不是为了防止杂菌污染。
用酒精对外植体进行消毒时,持续的时间不能太长,过长会杀死外植体细胞。
7.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重感染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示以外其他均相同。
下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是( )
A.污染主要是由培养基灭菌时间长短造成的
B.污染主要来源于组织培养所用的离体组织
C.调节培养基pH能解决污染问题
D.调节培养温度能解决污染问题
解析:
选B 通过4个实验结果可以看出培养基灭菌时间、培养基pH、培养温度对污染率没有太大的影响,由离体组织消毒时间越长污染率越低可知,污染主要来源于组织培养所用的离体组织。
8.如图表示一定条件下将胡萝卜的离体组织培育形成试管苗的过程。
有关叙述不正确的是( )
A.需在无菌条件下将离体组织接种到培养基中
B.图中①②过程分别表示脱分化和再分化
C.利用此过程获得的试管苗均为纯合子
D.此实验说明分化的植物细胞仍具有全套的遗传信息
解析:
选C 利用植物离体组织培育试管苗,首先需将离体组织接种到培养基中,此过程应在无菌条件下进行;接入培养基中的离体组织经①(脱分化)过程形成愈伤组织,愈伤组织通过②(再分化)发育为试管苗;在此过程中,植物细胞只进行有丝分裂,若胡萝卜植株为杂合子,则离体细胞经组织培养后得到的植株全为杂合子;植物组织培养的原理是细胞的全能性,而细胞全能性的本质是分化的植物细胞拥有该物种全套的遗传信息。
9.下列关于接种时注意事项的叙述,全部正确的是( )
①接种室要消毒 ②无菌操作 ③接种时可以随便交谈 ④外植体如茎段、茎尖可随机放入培养基 ⑤接种时要防止交叉污染 ⑥接种完立刻盖好瓶口
A.①②③④B.①②③④⑤⑥
C.③④⑤⑥D.①②⑤⑥
解析:
选D 在接种时,整个过程必须在无菌条件下进行,不能随便谈话,防止产生污染,因此操作过程应禁止谈话,并戴口罩;接种外植体时注意将形态学下端插入培养基,而且要分布均匀,以保证必要的营养和光照条件。
10.在菊花的组织培养操作完成了3~4d后,观察同一温室中的外植体,发现有的瓶内外植体正常生长,有的瓶内外植体死亡,你认为外植体死亡的原因不可能是( )
A.培养条件,比如pH、温度等不适宜
B.接种时外植体未消毒
C.接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体
D.将外植体倒插入培养基中
解析:
选A 一般来讲,在同一温室内进行植物组织培养时,培养条件应是相同的。
二、非选择题
11.在植物组织培养过程中,激素的添加已成为一种常规的实验手段,在植物组织培养过程中已研究过的植物激素有:
生长素、细胞分裂素、赤霉素等。
下表为某同学研究激素的使用顺序对实验结果影响的记录,请回答相关问题:
使用顺序
实验结果
先使用NAA,后使用KT
有利于细胞分裂,但细胞不分化
先使用KT,后使用NAA
A
同时使用
B
(1)植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、____________和____________的关键性激素。
该实验中属于细胞分裂素的是________。
(2)请将表格中空白处A和B补充完整,A为________________,B为________________。
NAA和KT的用量比值适中时,促进________________的生长。
(3)用于离体培养的植物器官或组织称为______。
若该实验材料为菊花,则应对其进行________(填“消毒”或“灭菌”)。
(4)接种过程中要注意在________________旁进行;接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养环境应注意调节合适的________和________。
解析:
生长素和细胞分裂素能够促进细胞分裂、脱分化和再分化,NAA属于生长素类似物,KT属于细胞分裂素。
先使用NAA,后使用KT,有利于细胞分裂,但细胞不分化;先使用KT,后使用NAA,细胞既分裂也分化;NAA和KT同时使用,分化频率提高;NAA和KT的用量比值适中时,促进脱分化,有利于愈伤组织的形成。
答案:
(1)脱分化 再分化 KT
(2)细胞既分裂也分化 分化频率提高 愈伤组织
(3)外植体 消毒
(4)酒精灯火焰 温度 光照时间
12.下面是基因型为AaBb的菊花茎尖离体培养示意图,据图回答下列问题:
A,B,胚状体―→
(1)图中A和B分别表示____________和______________________________________。
菊花茎尖培养成植物体的根本原因是__________________________________________。
(2)菊花的组织培养过程中,细胞通过______分裂来完成。
在培养形成试管苗的过程中,应大量供给的矿质元素是______________________________________________________。
(3)脱分化是指________________________________________,脱分化和再分化这两个过程的进行除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,还要保证________条件,否则植物组织培养就不能成功。
(4)接种时所有的操作都必须在________
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