高中生物实验超详细.docx
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高中生物实验超详细
高中生物实验总结
实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布〔必修一P26〕
一、实验原理:
1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA大局部存在于细胞质中。
2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。
利用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。
3、盐酸的作用
①盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;
②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质别离,有利于DNA与染色剂结合
4、0.9%的NaCl溶液作用:
保持口腔上皮细胞的正常的形态
二、目的要求:
初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
三、材料用具:
人的口腔上皮细胞〔也可用其他动物或植物细胞代替,如洋葱鳞片叶表皮细胞〕
大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜
质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂〔取A液20mL,B液80mL配成染色剂,使用时现配。
A液:
取吡罗红甲基绿粉1g,参加100mL蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用。
B液:
取乙酸钠,用蒸馏水溶解至1000mL。
取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL。
取稀释的乙酸钠溶液30mL和乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH为的溶液〕,蒸馏水
五、方法步骤:
1、取口腔上皮细胞制片
①在干净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。
②用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签
上附有碎屑的一端,放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。
点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
〔固定细胞〕
2、水解
①在小烧杯中参加30mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。
②在大烧杯中参加30℃温水。
③将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
3、冲洗涂片
用蒸馏水缓水流冲洗载玻片10s。
4、染色
①用吸水纸吸去载玻片上的水分。
②将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上,染色5min。
③吸去多余染色剂,盖上盖玻片。
5、观察
①低倍镜观察:
选择染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节明晰。
②换用高倍物镜观察:
调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
六、考点提示:
1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以防止装片中出现太多的杂质;
2、取洋葱表皮细胞时,尽量防止材料上带有叶肉组织细胞;
3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗;
4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回挪动,使载玻片均匀受热,以免破裂;
5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质〔必修一P18〕
一、实验原理:
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反响。
1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具复原性的半缩醛羟基,因此叫做复原糖;蔗糖分子内没有,为非复原糖。
实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性复原糖,而不能鉴定可溶性非复原糖。
糖类中的复原糖〔如葡萄糖、果糖、麦芽糖〕与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。
用斐林试剂鉴定复原糖时,溶液变化过程为:
浅蓝色→棕色→砖红色沉淀
淀粉遇碘变蓝色〔直链〕或紫〔红〕色〔支链〕。
2、脂肪和类脂〔磷脂、糖脂、固醇脂等〕统称为脂类。
它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能。
脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色〔或被苏丹Ⅳ染液染成红色〕。
3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反响。
〔蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反响。
〕
因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反响,检测生物组织中糖类,脂肪或蛋白质的存在。
二、实验目的:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。
三、实验材料:
1、做可溶性复原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果或梨匀浆。
〔因为组织的颜色较浅,易于观察。
〕
经试验比拟,颜色反响的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
2、做脂肪的鉴定实验。
应选富含脂肪的种子,以花生种子、花生种子匀浆为最好,实验前一般要浸泡3~4小时〔也可用蓖麻种子〕。
3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的豆浆、鲜肝提取液。
4、淀粉的鉴定:
马铃薯匀浆。
四、实验用具:
双面刀片、试管〔最好用刻度试管〕、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜
五、实验试剂:
1.斐林试剂〔甲液:
质量浓度为NaOH溶液,乙液:
质量浓度为4溶液〕
2.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
3.双缩脲试剂〔A液:
质量浓度为NaOH溶液,B液:
质量浓度为4溶液〕
4.体积分数为50%的酒精溶液
5.碘液
6.蒸馏水
六、方法步骤:
1.实验材料、仪器和试剂的选择每小组从教师提供的实验材料中选择一两种,预测其中含有哪些化合物,再选择所需要的仪器和试剂。
2.设计记录表格,记录预测结果,然后按照试验步骤进展检测,用“+〞或“-〞记录实测结果。
3.检测的方法步骤
〔1〕可溶性糖的检测和观察
1.制备组织样液。
〔去皮、切块、研磨、过滤〕苹果或梨组织液必须临时制备。
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2.取1支试管,向试管内注入2mL待测组织样液。
3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。
〔应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混合均匀后在注入〕。
〔切勿将甲液、乙液分别参加苹果组织样液中进展检测。
斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的Cu(OH)2在70~900oC下分解成黑色CuO和水,甲、乙液分别参加时可能会与组织样液发生反响,无Cu(OH)2生成〕。
4.试管放在盛有50-65oC温水的大烧杯中,加热约2min。
5.观察试管中出现的颜色变化:
浅蓝色→棕色→砖红色〔沉淀〕。
〔好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不要朝向实验者。
也可用酒精灯对试管直接加热,短实验时间。
。
防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤。
〕
〔2〕脂肪的检测和观察
①方法一:
向待测组织样液中滴加3滴苏丹III染液,观察样液被染色的情况。
②方法二:
制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况〔以花生为例〕。
取材取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。
〔干种子要浸泡3~4小时,新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短,不易切片;浸泡时间过长,组织较软,切片不易成形。
切片要尽可能薄些,便于观察〕
切片用刀片在花生子叶的横断面上平行切下假设干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用。
制片从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央;在花生子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ,染色3min〔假如用苏丹Ⅳ染液,染色1min〕,〔染色时间不宜过长〕,薄片周围染液,再滴加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液,洗去浮色,〔酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。
同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
〕用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴上一滴蒸馏水〔滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡〕,盖上盖玻片,制成临时装片。
观察在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移至视野中央,将影像调节清楚;换高倍镜观察,视野中被染成橘黄色的脂肪颗粒明晰可见。
〔装片不宜久放,时间一长,油滴会溶解在乙醇中〕
〔3〕蛋白质的检测和观察
制备组织样液〔浸泡、去皮研磨、过滤〕。
黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新颖豆浆以节约实验时间。
可用蛋清代替豆浆,蛋清要先稀释。
假如稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反响后会粘固在试管内壁上,使反响不容易彻底,并且试管也不易洗干净。
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL,摇匀。
③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀。
〔先加NaOH溶液,为Cu2+与蛋白质反响提供一个碱性的环境。
A、B液混装或同时参加,会导致Cu2+变成Cu(OH)2沉淀,而失效。
CuSO4溶液不能多加,否那么CuSO4的蓝色会遮盖反响的真实颜色〕
④观察试管中出现的颜色变化。
〔溶液变紫色〕
〔4〕淀粉的检测和观察
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。
〔碘液不要滴太多,以免影响颜色观察〕
七、考点提示:
1、常见复原性糖与非复原性糖有哪些?
答:
葡萄糖、果糖、麦芽糖都是复原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非复原性糖。
2、复原性糖植物组织取材条件?
答:
含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:
苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
3、研磨中为何要加石英砂?
不加石英砂对实验有何影响?
答:
加石英砂是为了使研磨更充分。
不加石英砂会使组织样液中复原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。
4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法?
混合的目的?
为何要现混现用?
答:
混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。
5、复原性糖中参加斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为?
答:
浅蓝色棕色砖红色。
6、花生种子切片为何要薄?
答:
只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。
7、转动细准焦螺旋时,假设花生切片的细胞总有一局部明晰,另一局部模糊,其原因一般是什么?
答:
切片的厚薄不均匀。
8、脂肪鉴定中乙醇作用?
答:
洗去浮色。
9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?
先加A液的目的怎样通过比照看颜色变化?
答:
不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做比照。
10、在鉴定蛋白质的实验中,假设用鸡蛋清作实验材料,必须稀释,以免实验后黏住试管,不易洗刷。
11、斐林试剂与双缩脲试剂的区别:
〔1〕溶液浓度不同〔斐林试剂乙液:
质量浓度为CuSO4溶液,双缩脲试剂B液:
质量浓度为CuSO4溶液〕
〔2〕使用原理不同
斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热的条件下与醛基反响,被复原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定复原糖的存在,实验中溶液颜色的变化过程为:
浅蓝色----棕色-----砖红色
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反响。
双缩脲反响的本质是在碱性条件下,Cu2+与双缩脲发生的紫色反响。
而蛋白质分子中有很多与双缩脲〔H2NOC-NH-CONH2〕构造相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲发生颜色反响,可以使用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
〔3〕使用方法不同:
斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混合均匀后在注入;双缩脲试剂先向试管内注入A液1mL,摇匀,再向试管内注入B液4滴,摇匀。
实验三用显微镜观察多种多样的细胞〔必修一P7〕
一、目的要求:
1.使用高倍显微镜观察几种细胞,比拟不同细胞的异同点
2.运用制作临时装片的方法
二.材料用具:
1.建议选用的观察材料:
真菌〔如酵母菌〕细胞,低等植物〔如水绵的丝状绿藻〕细胞,高等植物细胞〔如叶的保卫细胞〕,动物细胞〔如鱼的红细胞或蛙的皮肤上皮细胞〕。
以上这些材料,做成临时装片后就可以观察。
也可以使用其他替代材料。
2.用具:
显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、清水。
假如实验过程中需要染色,应准备常用的染色液。
三.方法步骤:
①转动反光镜使视野亮堂。
①在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央。
③转动转换器,换成高倍物镜。
④观察并用细准焦螺旋调焦。
四:
讨论:
1.使用高倍镜观察的步骤和要点是什么?
答:
〔1〕首先用低倍镜观察,找到要观察的物像,移到视野的中央。
2.试归纳所观察到的细胞在构造上的共同点,并描绘它们之间的差异,分析产生差异的可能的原因:
答:
这些细胞在构造上的共同点是:
有细胞膜、细胞质和细胞核,植物细胞还有细胞壁。
各种细胞之间的差异和产生差异的可能原因是:
这些细胞的位置和功能不同,其构造与功能相适应,这是个体发育过程中细胞分化产生的差异。
图是一个大肠杆菌的电镜照片和构造形式图,大肠杆菌与你在本实验中观察到的细胞有什么主要区别?
答:
从形式图中可以看出,大肠杆菌没有明显的细胞核,没有核膜,细胞外有鞭毛,等等。
五、考点提示:
〔1〕是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野亮堂?
为什么?
提示:
低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。
问〔2〕为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?
提示:
假如直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。
因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。
问〔3〕用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?
提示:
不行。
用高倍镜观察,只需微调即可。
转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。
注:
1.目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小;物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。
2.获取蛙皮肤上皮细胞的方法,是把蛙养在无水的玻璃缸内2~3h,待蛙的皮肤稍干后,再移入有水的玻璃缸内。
数分钟后,蛙的局部上皮开场龟裂并脱落到水中。
用肉眼可以看见水中有浅灰色、透明的上皮膜。
取一小块上皮膜用于制片、观察,看到的就是蛙皮肤的单层上皮细胞。
这种制备方法不会对蛙造成伤害。
实验四用高倍镜观察线粒体和叶绿体〔必修一P47〕
一、实验原理:
1、叶肉细胞中的叶绿体,分布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形。
可以在高倍显微镜下观察它的形态和分布。
2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
健那绿〔JanusgreenB〕染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时,通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态和分布。
二、目的要求:
使用高倍显微镜观察叶绿体、线粒体的形态和分布。
三、材料用具:
新颖的藓类的叶〔叶子薄而小,叶片是绿色的单层细胞,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,不需加工即可进展观察,所以作为实验的首选材料〕或菠菜叶〔假设用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。
因为表皮细胞不含叶绿体〕、黑藻叶等。
新配制的质量分数为1%的健那绿染液〔将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解〕
显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签
四、方法步骤:
1.制作藓类叶片临时装片在干净的载玻片中央滴一滴清水。
用镊子取一片藓类的小叶,或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮,放入水滴中,盖上盖玻片。
注意:
临时装片中的叶片不能放干了,要随时保持有水状态〔保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中,否那么细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布的观察〕。
2.观察叶绿体将制作好的叶片临时装片放在低倍显微镜下观察,找到叶片细胞后,换用高倍显微镜,仔细观察叶片细胞内叶绿体的形态和分布情况。
3.制作人的口腔上皮细胞临时装片在干净的载玻片中央滴一滴健那绿染液。
用消毒牙签在自己漱净的口腔内壁上轻轻地刮几下,将牙签上附有碎屑的一端,放在染液中涂抹几下,盖上盖玻片。
4.观察线粒体在高倍显微镜下观察经过染色的人的口腔上皮细胞临时装片,可以看到蓝绿色的线粒体,细胞质接近无色。
四、讨论:
1、细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?
为什么?
答:
不是。
呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能承受较多光照,又不至于被强光灼伤。
2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?
答:
叶绿体的形态和分布都有利于承受光照,完成光合作用。
如叶绿体在不同光照条件下改变方向。
又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以承受更多的光照。
实验五观察植物细胞的质壁别离和复原〔必修一P61探究〕
一、实验目的:
1.学会观察植物细胞质壁别离与复原的方法。
2.理解植物细胞发生浸透作用的原理。
二.实验原理:
把白菜剁碎做馅时,常常要放一些盐。
放盐后稍等一会就可见有水分渗出。
对农作物施肥过多,会造成“烧苗〞现象。
1.质壁别离的原理:
当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞就会通过浸透作用而失水,细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。
由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁别离。
2.质壁别离复原的原理:
当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过浸透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会渐渐地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁别离复原。
二、实验材料:
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。
因为液泡呈紫色,易于观察。
也可用水绵代替。
质量浓度为/ml的蔗糖溶液。
用蔗糖溶液做质壁别离剂对细胞无毒害作用。
刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸、显微镜,清水
三、实验步骤:
步骤
注意问题
分析
1.制作洋葱表皮的临时装片。
在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平〔也可挑取几条水绵放入水滴中〕。
盖上盖玻片。
盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。
防止装片产生气泡。
2.用低倍显微镜观察洋葱鳞片叶外表皮细胞中字的的中央液泡的大小,以及原生质层的位置
可看到:
液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。
〔或水绵细胞中有带状叶绿体,原生质层呈绿色,紧贴着细胞壁。
液泡含花青素,所以液泡呈紫色。
先观察正常细胞与后面的“质壁别离〞起对照作用。
3.观察质壁别离现象。
从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
镜检。
观察到:
液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁别离。
原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。
重复几次
糖液浓度不能过高
蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过浸透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁别离。
为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。
否那么,细胞严重失水死亡,看不到质壁别离的复原。
4.观察细胞质壁别离的复原现象。
从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。
镜检。
观察到:
液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状。
发生质壁别离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。
重复几次。
细胞液的浓度高于外界溶液,细胞通过浸透作用吸水,所以发生质壁别离复原现象。
因为细胞失水过久,也会死亡。
为了使细胞完全浸入清水中。
四、实验结论:
当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,水分会由细胞液中渗出到外界溶液中,通过浸透作用失水;由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同,细胞壁伸缩性较小,而原生质层性较大,从而使二者分开;反之,当外界溶液浓度低于细胞液浓度时,那么细胞通过浸透作用吸水,别离后的质和细胞壁又复原。
实验讨论
1.假如将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度一样的蔗糖溶液中,这些表皮细胞会出现什么现象?
答:
表皮细胞维持原状,因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时,红细胞会不会发生质壁别离?
为什么?
答:
不会。
因为红细胞不具细胞壁。
3.质壁别离实验的拓展应用
〔1〕判断成熟植物细胞的死活
〔2〕测定细胞液浓度范围
〔3〕比拟不同植物细胞的细胞液浓度
〔刚刚发生质壁别离所需时间越短。
细胞液浓度越小〕
〔4〕鉴别不同种类的溶液〔如KNO3溶液和蔗糖溶液〕
〔5〕证明原生质层具有选择透过性
〔6〕证明细胞壁的伸缩性小于原生质层的伸缩性
〔7〕检测杂种细胞是否再生出细胞壁,是否具有活性
实验六探究影响酶活性的因素〔必修一P78、P83〕
实例1:
比拟过氧化氢酶和Fe3+的催化效率
一.实验原理:
新颖肝脏中有较多的过氧化氢酶。
经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。
二.实验目的:
通过比拟过氧化氢在不同条件下分解的快慢,理解过氧化氢酶的作用和意义。
三.材料用具
质量分数为20%的肝脏〔如猪肝、鸡肝〕研磨液,新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液,质量分数为3.5%的FeCl3溶液
量筒,试管,滴管,试管夹,试管架,卫生香,火柴,酒精灯,大烧杯,三脚架,石棉网,温度计
四.方法步骤:
步骤
注意问题
解释
取4支干净试管,分别编号1,2,3,4,向试管内分别参加2ml过氧化氢溶液,按序号依次放在试管架上
不让H2O2接触皮肤
H2O2有一定的腐蚀性
将2号试管放在90℃左右的水浴中加热,观察气泡冒出的情况,并与1号试管作比拟。
向3号试管内滴入2滴FeCl3溶液,向4号试管内滴入2滴肝脏研磨液,观察哪支试管产生的气泡多。
不可用同一支滴管
肝脏研磨液必须是新颖的
肝脏要制成研磨液
由于酶具有高效性,假设滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性
因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低
研磨可破坏肝细胞构造,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积
2~3min后,将点燃的卫生香分别放在3、4号试管内液面的上方,观察哪支试管中的卫生香燃烧更猛烈。
放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中
现象:
3号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,4号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无变化
防止卫生香因潮湿而熄灭
实验:
影响酶活性的条件
细胞中几乎所有的化学反响都是由酶来催化的。
酶对化学反响的催化效率称为酶活性〔enzymeactivity〕。
唾液淀粉酶、胃蛋白酶等消化酶都是在消化道中起作用的。
不同部位消化液的pH不一样。
唾液的pH为,胃液的pH为,小肠液的pH为。
唾液淀粉酶会随胃液流入胃,胃蛋白酶会随食糜进入小肠。
实例2:
温度对酶活性的影响
〔一〕实验目的:
1.初步学会探究温度对酶活性的影响的方法。
2.探究淀粉酶在不同温度下催化淀粉水解的情况。
〔二〕实验原理:
1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖〔淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。
〕麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:
市售a-淀粉酶的最适温度约60℃
〔三〕方法步骤:
操作
注意问题
解释
取3支试管,编上号,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液
另取3支试管,编上号,然后分别注入1mL新颖淀粉酶溶液
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